Standardisierte Akupunktur plus modifizierter Xiaoxuming-Dekokt bei akutem ischämischem Schlaganfall: Eine randomisierte kontrollierte Studie

Zusammenfassung

Diese randomisierte kontrollierte Studie stellt ein reproduzierbares Protokoll für standardisierte Akupunktur in Kombination mit modifiziertem Xiaoxuming-Dekokt als Zusatztherapie bei akutem ischämischem Schlaganfall bereit. Die Intervention war mit einer geringen neurologischen Verbesserung am Tag 28 und ausgewählten Unterschieden bei Biomarkern verbunden; Analysen auf Ebene der Teilnehmer stützten weder eine Vermittlung noch einen kausalen Vermittlungsanspruch.

Zusammenfassung

Ein akuter ischämischer Schlaganfall wird von systemischer Entzündung und einer Störung der Darmmikroben begleitet. Diese Einzelzentrenstudie, eine verblindete, randomisierte kontrollierte Studie, untersuchte, ob eine standardisierte Akupunktur in Kombination mit einer modifizierten Xiaoxuming-Decoction, zusätzlich zur Standardtherapie, die frühe neurologische Erholung verbessert und mit vordefinierten Darm- und Entzündungsbiomarkern assoziiert ist. Erwachsene mit bildgebend bestätigtem akutem ischämischem Schlaganfall innerhalb von 72 Stunden und einem Stroke-Scale-Score der National Institutes of Health (NIHSS) von 4–15 wurden 1:1 entweder der Standardtherapie oder der kombinierten Intervention über 28 Tage zufällig zugewiesen, mit jeweils 64 Teilnehmern pro Gruppe. Der primäre Endpunkt war der NIHSS am Tag 28, adjustiert nach dem Ausgangs-NIHSS, Alter, Geschlecht, Reperfusionsbehandlung und Zeit von Symptombeginn bis zur Randomisierung, wobei fehlende Ergebnisse mittels 30-facher multipler Imputation berücksichtigt wurden. Sekundäre und explorative Endpunkte umfassten den Barthel-Index, die modifizierte Rankin-Skala (mRS) am Tag 90, unerwünschte Ereignisse, Entzündungsmarker, Lipopolysaccharid (LPS), die mikrobielle Diversität im Stuhl, ausgewählte Gattungen sowie kurzkettige Fettsäuren. Die Analyse mittels multipler Imputation ergab einen niedrigeren NIHSS-Wert am Tag 28 in der Interventionsgruppe (adjustierter Unterschied: −1,30 Punkte; 95 % Konfidenzintervall: −2,36 bis −0,24; P = 0,017). Der Barthel-Index am Tag 28 war in der Interventionsgruppe höher, während der NIHSS am Tag 90, der Barthel-Index und die beobachtete mRS 0–2 sich nicht signifikant unterschieden. Am Tag 28 wiesen die Teilnehmer der Interventionsgruppe eine höhere Shannon-Diversität und höhere Konzentrationen an Butyrat im Stuhl auf, sowie niedrigere Werte an Interleukin-6 und LPS. Die individuellen Veränderungen in Butyrat, Interleukin-6, LPS und Shannon-Diversität korrelierten nicht signifikant mit der Veränderung des NIHSS; daher wurde keine Mediationsanalyse durchgeführt. Es wurde kein schwerwiegendes, interventionsbedingtes unerwünschtes Ereignis festgestellt. Die kombinierte Intervention war mit einer geringfügigen frühen neurologischen Verbesserung und Unterschieden bei ausgewählten Biomarkern assoziiert, doch die biologischen Befunde sind explorativ und belegen keinen kausalen Gehirn-Darm-Mechanismus.

Einleitung

Der Schlaganfall bleibt weltweit eine der häufigsten Todesursachen und führt oft zu langfristigen Behinderungen; die überwiegende Zahl der Fälle sind ischämische Schlaganfälle. Die Standardtherapie betont eine schnelle Diagnose, bei Indikation eine Reperfusion, eine Thrombozytenaggregationshemmende Therapie, das Management von Risikofaktoren, die Prävention von Komplikationen und die Rehabilitation^1,2. Auch bei diesen Maßnahmen treten häufig verbleibende neurologische Defizite auf, was die Bewertung reproduzierbarer zusätzlicher Therapieansätze motiviert.

Postischämische Entzündungen, endotheliale und Blut-Hirn-Schranke-Stress, periphere Immunaktivierung sowie Stoffwechselstörungen tragen zu sekundären Verletzungen und Erholungsprozessen bei³. Schlaganfälle können auch die Darmmotilität, Durchlässigkeit, mikrobielle Zusammensetzung und die vom Darm ausgehende Immunsignalübertragung verändern, wodurch bidirektionale Zusammenhänge entstehen, die gemeinhin als das Gehirn-Darm-Achse bezeichnet werden⁴.

Klinische Studien haben einen akuten ischämischen Schlaganfall mit einer Darm-Dysbiose, veränderten Profilen kurzkettiger Fettsäuren (SCFA) und schlechteren Behandlungsergebnissen assoziiert⁵. Butyrat ist von besonderem Interesse, da es die Integrität der Epithelbarriere unterstützt und die Immunsignalisierung reguliert⁶. Diese Beobachtungen rechtfertigen die parallele Messung der mikrobiellen Diversität, mikrobieller Metaboliten, der Endotoxinexposition und entzündlicher Mediatoren zusammen mit neurologischen Outcome-Parametern, wobei zu beachten ist, dass gleichzeitige Veränderungen eine kausale Vermittlung nicht beweisen.

Die Akupunktur wurde als begleitende Schlaganfalltherapie untersucht, doch die veröffentlichten Studien unterscheiden sich hinsichtlich Zeitpunkt, Auswahl der Akupunkturpunkte, Frequenz und Beurteilung der Ergebnisse^7,8. Ein reproduzierbares Protokoll erfordert daher detaillierte Vorgaben zu Nadelung, Stimulierung, Nadelverweildauer, Sicherheitsmaßnahmen und Einhaltung der Verfahren. Xiaoxuming-Decoction ist eine klassische Kräuterformulierung zur Behandlung schlaganfallbedingter Erkrankungen. Systematische und pharmakologische Untersuchungen deuten auf einen möglichen Nutzen hin, doch die klinischen Belege sind aufgrund geringer Stichprobengröße, Heterogenität und Verzerrungsrisiko begrenzt^9,10. In einem zweigruppigen Design mit kombinierter Intervention lässt sich ihr Beitrag von der Akupunktur nicht abgrenzen.

Diese Studie evaluierte eine standardisierte kombinierte Intervention anhand klinischer Endpunkte und vorab definierter explorativer Darm- und Entzündungsbiomarker¹¹. Die Hypothese lautete, dass die Hinzunahme von standardisierter Akupunktur sowie der modifizierten Xiaoxuming-Decoction zur Standardtherapie eine verbesserte frühe neurologische Erholung bewirken und vorab definierte, mit der Darm-Hirn-Achse assoziierte Biomarker günstig verändern würde.

Protokoll

Die Ethikgenehmigung für diese Studie wurde am 10. Juni 2025 durch den Ausschuss für medizinische Ethik des Krankenhauses für Traditionelle Chinesische und Westliche Medizin in der Stadt Dazhou erteilt (Genehmigungsnummer 2025–29; gültig bis 9. Juni 2027). Jeder Teilnehmer oder dessen gesetzlich bevollmächtigter Vertreter gab vor der Randomisierung eine schriftliche, informierte Zustimmung ab. Die Zustimmung umfasste Akupunktur, pflanzliche Behandlung, Blut- und Stuhlprobenentnahme, den Schutz von Mikrobiomdaten sowie das Recht, sich von der biologischen Probennahme zurückzuziehen, ohne den Anspruch auf Standardversorgung zu verlieren. Die Verfahren erfolgten gemäß der Deklaration von Helsinki. Die im Protokoll verwendeten Forschungsinstrumente sind in der Tabelle der Materialien aufgelistet. Die Studie wurde nicht prospektiv registriert, da die Registrierung abgeschlossen war, bevor die Rekrutierung der Teilnehmer begann.

1. Studiendesign und Randomisierung

Die Teilnehmer wurden vom 1. März bis zum 31. Dezember 2025 rekrutiert, und jeder Teilnehmer wurde über einen Zeitraum von 90 Tagen beobachtet. Die Studie hatte ein singlezentrisches, bewerterverblindetes Parallelgruppendesign mit einer 28-tägigen aktiven Intervention. Berechtigte Teilnehmer wurden im Verhältnis 1:1 entweder der Standardtherapie allein oder der Standardtherapie in Kombination mit Akupunktur und modifizierter Xiaoxuming-Decoction zugewiesen. Die Randomisierung erfolgte mittels computergenerierter Blöcke der Größe 4 oder 6 und wurde nach dem Ausgangs-NIHSS-Score (4–8 vs. 9–15) geschichtet. Die Zuordnung wurde mittels fortlaufend nummerierter, undurchsichtiger, versiegelter Umschläge verdeckt gehalten.

Die abschließende 28-tägige Intervention wurde am 28. Januar 2026 abgeschlossen, die endgültige Nachuntersuchung am 31. März 2026 abgeschlossen, die Datenbank wurde am 15. April 2026 gesperrt und die vorgegebene Analyse wurde bis zum 30. April 2026 abgeschlossen. Die Studie folgte den CONSORT-Grundsätzen¹²; der Teilnehmerfluss ist in Abbildung 1 dargestellt, und der Untersuchungszeitplan ist in Tabelle 1 angegeben.

2. Teilnehmer-Screening und -Rekrutierung

Patienten mit akutem ischämischem Schlaganfall, der durch Computertomographie oder Magnetresonanztomographie bestätigt wurde, wurden innerhalb von 72 Stunden nach Symptombeginn oder der letzten bekannten gesunden Zustandszeit untersucht. Teilnahmeberechtigt waren Erwachsene im Alter von 40 bis 80 Jahren mit einem basislinienmäßigen Stroke-Scale-Wert der National Institutes of Health (NIHSS) von 4–15, stabilen Vitalzeichen nach der Notfallevaluierung, der Fähigkeit, die zugewiesene Intervention innerhalb von 24 Stunden zu beginnen, und der Bereitschaft, Blut- und Stuhlproben bereitzustellen. Die NIHSS-Bewertungen wurden durch geschulte Prüfer durchgeführt¹³.

Ausschlusskriterien waren intrazerebrale Blutung; transitorische ischämische Attacke ohne Infarkt; Koma; geplante dekompressive Chirurgie; unsichere orale Nahrungsaufnahme; aktive Infektion, die eine systemische Antibiotikatherapie erforderte; Einnahme von Antibiotika, Probiotika oder präbiotischen Supplementen innerhalb der letzten 4 Wochen; entzündliche Darmerkrankung; chronischer Durchfall; gastrointestinaler Eingriff innerhalb der letzten 6 Monate; Malignität; schwere hepatische oder renale Dysfunktion; unkontrollierte Hypertonie; instabile koronare Herzkrankheit; ungeeignete Arrhythmie; Thrombozytenzahl < 80 × 10⁹/L; Kontraindikation gegen Akupunktur; Allergie gegen die pflanzliche Rezeptur; Schwangerschaft oder Stillzeit; Teilnahme an einer anderen interventionellen Studie innerhalb der letzten 3 Monate; oder Unfähigkeit, die Nachuntersuchung abzuschließen. Gewöhnliche pflanzliche Lebensmittel, eingelegtes Gemüse und fermentierter Tofu wurden nicht als verbotene Produkte eingestuft, da die routinemäßige chinesische Ernährung nicht vollständig standardisiert werden konnte.

3. Standardversorgung und mikrobiomrelevante Expositionen

Beide Gruppen erhielten eine richtlinienbasierte Behandlung, einschließlich intravenöser Thrombolyse und/oder mechanischer Thrombektomie, wenn indiziert; Antiaggregations-, lipid-senkende, blutdruck- und blutzuckerregulierende Maßnahmen; Flüssigkeitszufuhr und Ernährung; Dysphagie-Screening; Prävention von Pneumonie und tiefer Beinvenenthrombose; Rehabilitation; sowie Sekundärprävention¹⁴. Die Reperfusions-Therapie wurde aufgrund der Studienteilnahme weder verzögert noch ersetzt.

Von der Randomisierung bis zum Tag 28 waren nicht zum Studienprotokoll gehörende Akupunktur, Moxibustion, pflanzliche Arzneimittel zur Schlaganfallbehandlung sowie Probiotika-, Präbiotika- und Synbiotika-Präparate und andere mikrobiotazielgerichtete Zubereitungen verboten. Den Teilnehmern und Betreuungspersonen wurde mitgeteilt, dass diese Einschränkungen auf Nahrungsergänzungsmittel und kommerzielle Probiotika-Produkte, nicht jedoch auf alltägliche Lebensmittel, zutrafen.

Die Reperfusionstherapie und Protokollabweichungen wurden dokumentiert. Ernährung, Schweregrad der Dysphagie, enterale Ernährung, postzufallsverteilte Antibiotikagaben, die Verwendung von Protonenpumpenhemmern, Verstopfung und die Verweildauer wurden als mögliche mikrobiombezogene Störgrößen erfasst. Diese Variablen wurden nicht als Kovariaten in den statistischen Mikrobiommodellen berücksichtigt und galten daher als verbleibende Störgrößen.

4. Verblindung der Zuteilung

Die Randomisierungssequenz wurde von einem unabhängigen Statistiker erstellt. Vom Koordinator wurden nummerierte, undurchsichtige, versiegelte Umschläge vorbereitet, der nicht an Rekrutierung, Behandlung, Outcome-Bewertung, Laborarbeiten oder statistischer Analyse beteiligt war. Der nächste Umschlag wurde erst geöffnet, nachdem die informierte Einwilligung vorlag, die Zulässigkeit bestätigt und die Basisbefunde abgeschlossen waren. Die Randomisierungssequenz wurde in einer passwortgeschützten Datei gespeichert, auf die Outcome-Beurteiler, Laborpersonal und Analytiker bis zum Abschluss der primären Analyse keinen Zugriff hatten.

5. Ergebnis-, Labor- und Analyse-Verblindung

Die NIHSS-, Barthel-Index- und modifizierte Rankin-Skala-(mRS-)Beurteilungen wurden durch Beurteiler durchgeführt, die unabhängig von der Therapiedurchführung waren. Den Teilnehmern und Betreuungspersonen wurde angewiesen, die Zuordnung zur Behandlungsgruppe gegenüber den Ergebnisbeurteilern nicht preiszugeben. Biologische Proben wurden mit codierten Identifikatoren gekennzeichnet, und Laborpersonal sowie Statistiker blieben bis zum Abschluss der vorgegebenen Analysen gegenüber den Gruppencodes verblindet. Vorfälle mit versehentlicher Aufhebung der Verblindung wurden dokumentiert.

6. Standardisierte manuelle Akupunktur

Die Akupunktur wurde innerhalb von 24 Stunden nach der Randomisierung begonnen, nachdem der behandelnde Neurologe die hämodynamische Stabilität und ein akzeptables Blutungsrisiko bestätigt hatte. Die Behandlung war als eine 30-minütige Sitzung pro Tag, 5 Tage pro Woche über 4 Wochen geplant, insgesamt 20 geplante Sitzungen.

Die Teilnehmer wurden sicher positioniert und die Haut wurde vor der Nadelung desinfiziert. Baihui (GV20), Shuigou (GV26), bilaterales Fengchi (GB20), Quchi (LI11), Hegu (LI4), Zusanli (ST36), Yanglingquan (GB34) und Sanyinjiao (SP6) wurden entsprechend der in Tabelle 2¹⁵ angegebenen Seitenlokalisation und Nadeltiefe nadiert.

Es wurden sterile, Einweg-Akupakturnadeln aus rostfreiem Stahl mit einer Größe von 0,25 mm × 40 mm verwendet. Die Nadeln wurden je nach Akupunkturpunkt und Körperbau in einer Tiefe von 10–25 mm eingeführt. Manuelle Hub-Zieh- und Drehtechniken wurden angewendet, bis ein Deqi-Gefühl oder eine lokale Nadelreaktion erreicht war. Die Nadeln blieben 30 Minuten lang liegen und wurden alle 10 Minuten manuell erneut stimuliert. Eine Elektroakupunktur kam nicht zum Einsatz.

Die Akupunktur wurde von lizenzierten Akupunkteuren mit mindestens fünf Jahren klinischer Erfahrung durchgeführt. Die Sitzungen wurden bei Fieber, instabilen Blutdruckwerten, neurologischer Verschlechterung, aktiver Blutung, starker Unruhe oder Erschöpfung sowie bei Ablehnung durch den Teilnehmer verschoben. Der Grund für die Verschiebung und alle damit verbundenen unerwünschten Ereignisse wurden dokumentiert.

7. Modifizierte Decoction Xiaoxuming

Jede Tagesdosis enthielt Ephedrae Herba 6 g, Cinnamomi Ramulus 9 g, Paeoniae Radix Alba 12 g, Saposhnikoviae Radix 9 g, Zingiberis Rhizoma Recens 6 g, Glycyrrhizae Radix et Rhizoma 6 g, Angelicae Sinensis Radix 10 g, Chuanxiong Rhizoma 10 g, Astragali Radix 20 g, Poria 15 g und Paeoniae Radix Rubra 12 g. Die Identität der verordneten pflanzlichen Rohstoffe wurde durch die Krankenhausapotheke vor der Zubereitung überprüft, und es wurden die üblichen Verteilungs- und Extraktionsverfahren angewandt. Die Rezeptur ist in Tabelle 3⁹˒¹⁶ detailliert beschrieben.

Es waren nur vorab festgelegte Modifikationen zulässig. Bei Verstopfung konnten Cannabis Fructus 10 g hinzugefügt, bei weichem Stuhl Poria auf 20 g erhöht und bei ausgeprägtem spontanem Schwitzen Astragali Radix auf 30 g erhöht werden. Jede Modifikation, vergessene Dosis, Erbrechepisode und Therapieunterbrechung wurde dokumentiert.

Eine tägliche Dosis wurde in der Krankenhausapotheke ausgekocht und auf 400 mL konzentriert. Die Zubereitung wurde in zwei Portionen zu je 200 mL aufgeteilt und nach dem Frühstück sowie nach dem Abendessen über einen Zeitraum von 28 Tagen verabreicht. Die Verabreichung wurde in Fällen unsicheren Schluckens, anhaltenden Erbrechens, Allergie, Alanin- beziehungsweise Aspartat-Aminotransferase >3× der oberen Normgrenze, geschätzter glomerulärer Filtrationsrate <45 mL/min/1.73 m², unkontrolliertem Blutdruck, klinisch bedeutsamer Tachyarrhythmie, neu aufgetretenen Brustschmerzen oder von dem Prüfer festgelegtem Risiko unterlassen.

8. Einschränkungen der Kontrollgruppe

Den Teilnehmern, die der Kontrollgruppe zugewiesen wurden, wurde ausschließlich die Standardversorgung zuteil. Nicht dem Protokoll entsprechende Akupunktur, Moxibustion, schlaganfallbezogene Kräutertherapien sowie Probiotika-, Präbiotika- oder Synbiotika-Präparate und produktspezifische Mikrobiota-zielgerichtete Substanzen waren bis zum 28. Tag verboten. Jede Anwendung dieser Maßnahmen wurde als Protokollabweichung dokumentiert.

9. Überwachung der Einhaltung und Sicherheit

Die Akupunktur-Adhärenz wurde als Anzahl der abgeschlossenen Sitzungen geteilt durch die 20 geplanten Sitzungen berechnet. Die Adhärenz bezüglich der Kräutertherapie wurde anhand zurückgegebener Verpackungen und Medikationsprotokolle bewertet. Die per-Protokoll-Adhärenz wurde als Abschluss von mindestens 16 Akupunktursitzungen und Einnahme von mindestens 80 % der verordneten Dekokt-Dosen definiert. Stationäre Patienten wurden täglich beobachtet, ambulante Patienten hingegen bei planmäßigen Nachuntersuchungen überwacht. Erfasste unerwünschte Ereignisse umfassten lokales Bluten, Hämatom, Schmerzen, Schwindel, Synkope, Infektionen, gastrointestinale Symptome, Hautausschlag, hepatische oder renale Auffälligkeiten, Herzklopfen, Blutdruckschwankungen und allergische Reaktionen. Schwere unerwünschte Ereignisse sowie deren Zuordnung wurden unabhängig durch zwei Ärzte als nicht verwandt, möglicherweise verwandt, wahrscheinlich verwandt oder definitiv verwandt klassifiziert.

10. Bewertung der klinischen Ergebnisse

Die NIHSS wurde zum Studienbeginn sowie an den Tagen 14, 28 und 90 erhoben. Die NIHSS am Tag 28, angepasst an die Basislinien-NIHSS, war der primäre Endpunkt. Der Barthel-Index wurde zum Studienbeginn sowie an den Tagen 28 und 90 erfasst, und der mRS wurde am Tag 90 erhoben. Rezidivierender Schlaganfall, Tod aus jeglichem Grund und unerwünschte Ereignisse wurden bis zum Tag 90 dokumentiert¹⁷. Ein günstiger Outcome am Tag 90 wurde als mRS 0–2 definiert. Die klinischen und biologischen Endpunkte, Erhebungszeitpunkte, Definitionen und Analyseklassifizierungen sind in Tabelle 4 zusammengefasst.

11. Blutentnahme und Biomarker-Analysen

Venöses Blut wurde zum Basiszeitpunkt vor der Intervention sowie an den Tagen 14 und 28, vorzugsweise zwischen 06:30 und 08:30 Uhr nach einer nächtlichen Fastenphase, gesammelt. Wenn zutreffend, wurde die Blutentnahme außerhalb des Fastenzustands dokumentiert.

Die Proben wurden innerhalb von 2 Stunden verarbeitet. Die Zentrifugation erfolgte bei 850 × g für 10 Minuten bei 4 °C. Serum und Plasma wurden in sterile Cryoröhrchen portioniert und bei −80 °C gelagert. Proben desselben Teilnehmers wurden nach Möglichkeit in derselben Ansatzcharge analysiert.

Hochsensibles C-reaktives Protein, Interleukin-6 (IL-6), Tumor-Nekrose-Faktor-Alpha, Lipopolysaccharid (LPS) und Zonulin wurden mithilfe der angegebenen Assays quantifiziert. IL-6, Tumor-Nekrose-Faktor-Alpha, LPS und Zonulin wurden im Duplikat gemessen, und die Messungen wurden wiederholt, wenn der Variationskoeffizient der Duplikate 15 % überstieg.

Die vom Hersteller angegebenen Katalogspezifikationen, nicht die studienspezifischen Validierungsergebnisse, waren wie folgt: hs-CRP-Sensitivität, 5,36 pg/mL; Messbereich, 18,75–1.200 pg/mL; intra-/inter-assay-CV im Serum, 1,4 %/4,0 %; IL-6-Sensitivität, 0,7 pg/mL; Messbereich, 3,12–300 pg/mL; intra-assay-CV in Serum/Plasma, 1,6 %–4,2 %; inter-assay-CV, 3,3 %–6,4 %; Tumornekrosefaktor-alpha-Sensitivität, 6,23 pg/mL; Messbereich, 15,6–1.000 pg/mL; intra-assay-CV, 2,2 %–3,0 %; inter-assay-CV, 7,3 %–8,4 %; sowie Zonulin-Nachweisgrenze, 0,183 ng/mL; Bestimmungsgrenze, 0,183 ng/mL; Linearität, 3,03–40,25 ng/mL; Wiederholbarkeits-CV, 3,5 %–6,0 %; und Reproduzierbarkeits-CV, 7,7 %–8,3 %. Die Nachweis- und Bestimmungsgrenze für Zonulin wurden vom Hersteller vor Anwendung des Probenverdünnungsfaktors angegeben.

Die LPS-Konzentrationen wurden in EU/mL angegeben, und die Konzentrationen von Trimethylamin-N-Oxid im Plasma wurden in µmol/L angegeben. Beide Messungen wurden als explorative Biomarker-Ergebnisse behandelt.

12. Sammlung von Fäkalproben und 16S-rRNA-Sequenzierung

Stuhlproben wurden zum Zeitpunkt der Grundlinie und am Tag 28 in sterilen Röhrchen gesammelt, und Zeitpunkte von Defäkation und Einfrieren wurden dokumentiert. Wenn ein Teilnehmer innerhalb des geplanten Sammelfensters nicht defäkieren konnte, wurde der nächste spontane Stuhl so schnell wie klinisch vertretbar gesammelt. Letztlich lieferten alle randomisierten Teilnehmer Stuhlproben, die für Analysen des Mikrobioms und der kurzkettigen Fettsäuren geeignet waren; verzögerte Sammelverfahren führten nicht zu fehlenden Stuhlproben für die geplanten stuhlbasierenden Analysen. Verzögerungen bei der Probensammlung und der Status einer Verstopfung wurden dokumentiert, und Abführmittel wurden ausschließlich zu Forschungszwecken nicht verabreicht.

Frischer Stuhl wurde innerhalb von 2 Stunden transportiert. Wenn ein sofortiger Transport nicht möglich war, wurden die Proben vor der Lagerung bei −80 °C maximal 6 Stunden bei 4 °C aufbewahrt. Wiederholte Gefrier-Tau-Zyklen wurden vermieden. Die DNA wurde mit dem angegebenen Kit zur DNA-Gewinnung aus Stuhlproben extrahiert. Der V3–V4-Bereich wurde mit den Primern 338F und 806R amplifiziert, und eine paired-end-Sequenzierung mit 300 bp wurde durchgeführt. In QIIME 2 Version 2024.10.1 (RRID: SCR_021258) wurden die Reads demultiplexed und die Primer entfernt. DADA2 wurde zur Qualitätskontrolle, Entfernung von Rauschen, Zusammenführung von Paired-End-Reads, Eliminierung von Chimären sowie zur Ableitung von Amplikon-Sequenzvarianten verwendet. Die taxonomische Zuordnung erfolgte anhand von SILVA Release 138.1 (RRID: SCR_006423).

Für die Alpha-Diversität wurden die Shannon- und Chao1-Indizes berechnet. Für die Beta-Diversität wurden Bray-Curtis-Distanzen und eine Hauptkoordinatenanalyse verwendet, und eine permutationsbasierte multivariate Varianzanalyse (PERMANOVA) wurde zur Beurteilung der Unterschiede in der Beta-Diversität herangezogen¹⁸.

13. Quantifizierung kurzkettiger Fettsäuren im Stuhl

Etwa 100 mg aufgetautes Stuhlmaterial wurden mit 1,0 mL 0,5%iger Phosphorsäure vermischt, 60 s lang vortexiert und bei 4 °C 10 min lang mit 14.000 × g zentrifugiert. Der Überstand wurde mit Ethylacetat, das 4-Methylvaleriansäure als internen Standard enthielt, extrahiert.

Ein 1 µL-Aliquot wurde mittels Gaschromatographie gekoppelt mit massenselektiver Detektion unter Verwendung einer DB-FFAP-Säule mit den Maßen 30 m × 0,25 mm × 0,25 µm analysiert. Helium wurde mit einer Flussrate von 1,0 mL/min und einem Split-Verhältnis von 10:1 sowie Elektronenionisation bei 70 eV verwendet.

Acetat, Propionat, Butyrat, Isobutyrat, Valerat und Isovalerat wurden quantifiziert, und die Gesamtheit der kurzkettigen Fettsäuren wurde als deren Summe definiert. Die Analytiker blieben hinsichtlich der Behandlungszuordnung verblindet, und die Analysen der kurzkettigen Fettsäuren wurden als explorativ behandelt.

14. Untersuchung der Biomarker-Antwort

Die explorative zusammengesetzte Antwort wurde definiert als das Vorhandensein von mindestens zwei der vier Veränderungen am Tag 28: Zunahme des Shannon-Index > 0,20, Zunahme von Butyrat im Stuhl > 20 %, Abnahme von LPS im Plasma > 15 % und Abnahme von IL-6 > 20 %. Diese pragmatischen Schwellenwerte sollten kleine analytische Schwankungen übertreffen, waren nicht klinisch validiert und dienten ausschließlich der explorativen Beschreibung. Es wurde kein Shannon-Schwellenwert von < 1,5 verwendet.

15. Berechnung der Stichprobengröße

Die Berechnung der Stichprobengröße ging von einer intergruppellen Differenz von 1,2 Punkten in der Änderung der NIHSS am Tag 28, einer Standardabweichung von 2,3, einem zweiseitigen Alphawert von 0,05 und einer Teststärke von 80 % aus. Diese Berechnung ergab einen Bedarf von 58 Teilnehmern pro Gruppe. Unter Berücksichtigung von 10 % unvollständigen primären Endpunkten ergab sich eine angestrebte Rekrutierung von 64 Teilnehmern pro Gruppe, insgesamt also 128 randomisierte Teilnehmer¹⁹.

16. Datenverwaltung und Qualitätskontrolle

Klinische Daten wurden mithilfe standardisierter Fall-Aufzeichnungsformulare erfasst und einer doppelten Dateneingabe unterzogen. Vor dem Abschluss der Datenbank wurden Bereichs- und Konsistenzprüfungen durchgeführt, und Unstimmigkeiten wurden anhand der Quelldokumentation geklärt. Die Beurteiler der Endpunkte wurden vor der Einschreibung geschult. Die Probensammlung, die Verarbeitungszeit, die Lagertemperatur, der Gefrier-Tau-Zyklus, die Testdurchlaufnummer sowie die Sequenzierdurchlaufnummer wurden mittels codierter Identifikatoren verfolgt.

17. Statistische Analyse

Alle 128 randomisierten Teilnehmer wurden in die primäre Intention-to-Treat-Analyse eingeschlossen. Die Per-Protokoll-Population wurde definiert durch die Durchführung der Beurteilung am Tag 28, den Erhalt von mindestens 80 % der zugewiesenen Interventionsdosis und das Fehlen einer schwerwiegenden Protokollverletzung. Alle behandelten Teilnehmer wurden in die Sicherheitsanalysen eingeschlossen. Analysen des Mikrobioms und der kurzkettigen Fettsäuren wurden anhand auswertbarer Stuhlproben durchgeführt, die zu Studienbeginn und am Tag 28 gesammelt wurden. Da alle randomisierten Teilnehmer analysierbare Stuhlproben bereitstellten, musste kein Teilnehmer ausgeschlossen werden, und für die stuhlbasierenden Analysen war keine Imputation fehlender Proben erforderlich.

Fehlende NIHSS-Werte am Tag 28 wurden 30-mal unter der Annahme von Zufallsverlusten mittels verketteter Bayesianischer Ridge-Modelle geschätzt, die Behandlung, NIHSS-Basislinie und -Tag 14, basislinienbezogenen Barthel-Index, Alter, Geschlecht, Reperfusions-Therapie sowie die Zeit von Symptombeginn bis zur Randomisierung enthielten. Die Schätzungen wurden mit den Rubin-Regeln zusammengeführt, und eine Analyse der vollständigen Fälle wurde als Sensitivitätsanalyse durchgeführt.

Histogramme und Q–Q-Diagramme wurden visuell überprüft, und Shapiro-Wilk-Tests wurden auf die Modellresiduen angewendet. Die Residuen der primären vollständigen Fall-ANCOVA waren vereinbar mit der Normalverteilung (P = 0,308). Stark rechtsverteilte Biomarker wurden bei Bedarf vor der linearen Modellierung transformiert. Bei der logistischen Regression war keine Normalverteilung des binären Zielkriteriums erforderlich; die Linearität stetiger Prädiktoren sowie einflussreiche Beobachtungen wurden überprüft.

Die Kovarianzanalyse (ANCOVA) wurde für das NIHSS am Tag 28 verwendet, wobei Behandlung, Basis-NIHSS, Alter, Geschlecht, Reperfusions-Therapie und Zeit von Symptombeginn bis zur Randomisierung im Modell berücksichtigt wurden²⁰. Für kontinuierliche explorative Ergebnisse am Tag 28 kamen lineare Modelle mit Anpassung an den Ausgangswert zum Einsatz. Für Anteile wurden Chi-Quadrat- oder exakte Fisher-Tests verwendet, und für Bray-Curtis-Distanzen wurde die PERMANOVA mit 9.999 Permutationen angewandt. Analysen zur Mikrobiomdiversität und -gemeinschaftsstruktur wurden nicht auf Ernährung, Schwere der Dysphagie, enterale Ernährung, Antibiotikagabe nach der Randomisierung, Protonenpumpenhemmer-Anwendung, Verstopfung oder Verweildauer im Krankenhaus adjustiert; diese Faktoren wurden als mögliche verbleibende Störvariablen betrachtet.

Die Benjamini–Hochberg-Korrektur für die falsche Entdeckungsrate wurde auf die drei dargestellten Gattungen angewandt, und sowohl nominelle P-Werte als auch q-Werte wurden angegeben. Für explorative Assoziationen auf Teilnehmerebene wurde der Spearman-Rho mit 5.000 Bootstrap-Stichproben verwendet; Korrelationskoeffizienten nach Pearson wurden nicht für inferenzstatistische Interpretationen herangezogen. Eine Mediationsanalyse war nur geplant, wenn sowohl die Assoziation zwischen Exposition und Mediator als auch die zwischen Mediator und Ergebnis unterstützt wurden. Für die primären und vorab festgelegten klinischen Endpunkte galt ein zweiseitiger P < 0,05 als signifikant.

Abbildung 1: Teilnehmerfluss und Untersuchungszeitplan. (A) CONSORT-ähnlicher Flussdiagramm mit Screening (n = 176), Ausschlüsse (n = 48), Randomisierung (64/Gruppe), intravenöse Thrombolyse (16 Kontrolle; 18 Intervention), mechanische Thrombektomie (4; 5), Verfügbarkeit der NIHSS am Tag 28 (59; 58), beobachtetes Follow-up am Tag 90 (57; 56) sowie Analysepopulationen. (B) Zeitplan der Intervention und Beurteilung. NIHSS, National Institutes of Health Stroke Scale; ITT, Intention-to-treat; mRS, modifizierte Rankin-Skala. Bitte klicken Sie hier, um eine vergrößerte Version dieser Abbildung anzusehen.

Studienverfahren	Screening	Basiswert	Tag 1–28	Tag 14	Tag 28	Tag 90
Kalenderfenster	1. März–31. Dezember 2025	Am selben Tag wie die Randomisierung	März 2025–Januar 2026	±2 Tage	±3 Tage	±7 Tage
Eignungsbeurteilung	✓
Schriftliche informierte Einwilligung	✓
CT/MRT-Bestätigung eines ischämischen Schlaganfalls	✓
Erhebung von demografischen und klinischen Daten		✓
Randomisierung		✓
Standardtherapie beim akuten ischämischen Schlaganfall		✓	✓	✓	✓	✓
Standardisierte manuelle Akupunktur			✓
Modifizierte Xiaoxuming-Decoction			✓
NIHSS-Beurteilung		✓		✓	✓	✓
Barthel-Index-Beurteilung		✓			✓	✓
Beurteilung mit der modifizierten Rankin-Skala						✓
Entnahme von peripherem Blut		✓		✓	✓
Entnahme von Stuhlproben		✓			✓
Überwachung unerwünschter Ereignisse		✓	✓	✓	✓	✓
Abschluss der finalen klinischen Nachuntersuchung						Bis 31. März 2026
Datenbereinigung und statistische Analyse						1.–30. April 2026

Tabelle 1: Studienzeitplan, Interventionsexposition, Probensammlung und Outcome-Beurteilungen. CT, Computertomographie; MRT, magnetresonanztomographische Bildgebung; NIHSS, Stroke-Skala der National Institutes of Health.

Akupunkturpunkt	Lagekategorie	Seitigkeit	Nadeleinführungstiefe	Stimulationsmethode	Haltezeit	Behandlungshäufigkeit	Sicherheitsvorkehrungen
Baihui (GV20)	Skalpenpunkt	Einseitig	10–15 mm	Schräge Einführung mit leichter manueller Stimulation	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Übermäßige Stimulation bei Patienten mit instabilen Vitalzeichen vermeiden
Shuigou (GV26)	Gesichtspunkt	Einseitig	5–10 mm	Schräge Einführung mit leichter manueller Stimulation	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Nadelung bei Patienten mit lokalen Hautverletzungen, Infektionen oder mangelnder Kooperation vermeiden
Fengchi (GB20)	Kopf- und Halspunkt	Beidseitig	15–25 mm	Schräge Einführung; tiefe mediale Nadelung wurde vermieden	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Tiefe Einführung in Richtung des Spinalkanals oder des Bereichs der Arteria vertebralis vermeiden
Quchi (LI11)	Obergliedmaßenpunkt	Beidseitig	15–25 mm	Manuelle Hebe- und Stoßtechnik sowie Drehung	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Nadelung durch blutunterlaufene, ödematöse oder infizierte Haut vermeiden
Hegu (LI4)	Obergliedmaßenpunkt	Beidseitig	10–20 mm	Manuelle Hebe- und Stoßtechnik sowie Drehung	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Übermäßige Manipulation bei schwachen Patienten oder Patienten mit Schmerzunverträglichkeit vermeiden
Zusanli (ST36)	Untergliedmaßenpunkt	Beidseitig	20–25 mm	Manuelle Hebe- und Stoßtechnik sowie Drehung	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Nadelung in Bereichen mit Ödemen, Infektionen oder lokalen Traumata vermeiden
Yanglingquan (GB34)	Untergliedmaßenpunkt	Beidseitig	20–25 mm	Manuelle Hebe- und Stoßtechnik sowie Drehung	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Nadelung bei Patienten mit starken Gliederschmerzen, Trauma oder Unruhe vermeiden
Sanyinjiao (SP6)	Untergliedmaßenpunkt	Beidseitig	15–25 mm	Manuelle Hebe- und Stoßtechnik sowie Drehung	30 min	5 Sitzungen/Woche für 4 Wochen	Während der Schwangerschaft sowie bei Patienten mit lokalen Hautläsionen vermeiden

Tabelle 2: Standardisierte Akupunkturverschreibung und Operationsprotokoll. Durchführungsanmerkungen: Es wurden sterile Einweg-Nadeln aus Edelstahl mit einer Größe von 0,25 mm × 40 mm verwendet. Eine manuelle Stimulierung erfolgte, bis eine Deqi-Sensation berichtet wurde oder eine lokale Nadelreaktion beobachtet wurde. Die Nadeln wurden 30 min lang belassen, und die manuelle Stimulierung wurde während dieser Zeit alle 10 min wiederholt.

Komponente	Pharmazeutischer lateinischer Name	Tagesdosis	Funktionelle Rolle in der Rezeptur	Qualitätskontroll- und Sicherheitshinweise
Ephedra	Ephedrae Herba	6 g	Komponente zur Windverdrängung und Kanalöffnung	Blutdruck, Herzklopfen, Brustenge und Schlaflosigkeit wurden während der Behandlung überwacht
Zimtast	Cinnamomi Ramulus	9 g	Wärmende und durchblutungsfördernde Komponente	Vorsichtige Anwendung bei Patienten mit übermäßiger Schweißbildung oder hitzebedingten Symptomen
Weiße Pfingstrosenwurzel	Paeoniae Radix Alba	12 g	Harmonisierende und krampflösende Komponente	Pharmazeutische Authentifizierung und Chargendokumentation waren erforderlich
Saposhnikovia-Wurzel	Saposhnikoviae Radix	9 g	Komponente zur Windverdrängung	Pharmazeutische Authentifizierung und Chargendokumentation waren erforderlich
Frischer Ingwer	Zingiberis Rhizoma Recens	6 g	Komponente zur Harmonisierung des Magen-Darm-Trakts	Die Verabreichung wurde bei anhaltendem Erbrechen unterlassen
Süßholzwurzel	Glycyrrhizae Radix et Rhizoma	6 g	Formel-harmonisierende Komponente	Elektrolytstörungen und Ödeme wurden bei risikobehafteten Patienten überwacht
Angelikawurzel	Angelicae Sinensis Radix	10 g	Blut-nährende und durchblutungsfördernde Komponente	Gleichzeitige Anwendung von Thrombozytenaggregationshemmern oder Antikoagulanzien wurde dokumentiert
Chuanxiong-Rhizom	Chuanxiong Rhizoma	10 g	Blut-aktivierende Komponente	Blutungsbedingte Nebenwirkungen wurden überwacht und dokumentiert
Astragaluswurzel	Astragali Radix	20 g	Qi-stärkende Komponente	Konnte bei ausgeprägtem spontanem Schwitzen auf 30 g erhöht werden, sofern dies als protokolldefinierte Modifikation erfasst wurde
Poria	Poria	15 g	Schwäche des Milzsystems unterstützende und Feuchtigkeit auflösende Komponente	Konnte bei weichem Stuhl auf 20 g erhöht werden, sofern dies als protokolldefinierte Modifikation erfasst wurde
Rote Pfingstrosenwurzel	Paeoniae Radix Rubra	12 g	Blut-aktivierende und entzündungshemmende Komponente	Pharmazeutische Authentifizierung und Chargendokumentation waren erforderlich
Hanfsamen	Cannabis Fructus	10 g, falls erforderlich	Ausschließlich zur Behandlung von Verstopfung	Wurde nur bei Verstopfung hinzugefügt und als protokolldefinierte Modifikation dokumentiert

Tabelle 3: Zusammensetzung und Verabreichungsprotokoll der modifizierten Xiaoxuming-Decoction. Verabreichungsprotokoll: Eine tägliche Dosis wurde von der Krankenhausapotheke als Dekokt hergestellt und auf 400 mL konzentriert. Das Dekokt wurde in zwei Portionen zu je 200 mL aufgeteilt und nach dem Frühstück und Abendessen oral über 28 aufeinanderfolgende Tage verabreicht. Die Verabreichung wurde bei Patienten mit unsicherem Schlucken, anhaltendem Erbrechen, vermuteter allergischer Reaktion, Alaninaminotransferase oder Aspartataminotransferase über dem Dreifachen der oberen Normgrenze, einer geschätzten glomerulären Filtrationsrate unter 45 mL/min/1,73 m², nicht kontrolliertem Blutdruck nach Standardtherapie, klinisch signifikanter Tachyarrhythmie, neu aufgetretenen Brustschmerzen oder einem vom Untersucher festgestellten Sicherheitsanliegen ausgesetzt.

Ergebniskategorie	Variable	Zeitpunkt der Bewertung	Definition oder Messung	Analyseklassifizierung
Neurologische Defizite	NIHSS-Score	Grundlinie, Tag 14, Tag 28, Tag 90	National Institutes of Health Stroke Scale, bewertet durch verblindete Neurologen	Primäres klinisches Ergebnis am Tag 28; sekundär am Tag 14/Tag 90
Funktion im täglichen Leben	Barthel-Index	Grundlinie, Tag 28, Tag 90	Bewertung der Aktivitäten des täglichen Lebens durch geschulte, verblindete Prüfer	Sekundäres klinisches Ergebnis
Globale Behinderung	Modifizierter Rankin-Skala	Tag 90	Funktionelle Behinderungsskala 0–6	Sekundäres klinisches Ergebnis; beobachtete Verteilung und separat gekennzeichnete ITT-Dichotomie
Günstiges funktionelles Ergebnis	mRS 0–2	Tag 90	Teilnehmer mit mRS 0, 1 oder 2	Sekundäres klinisches Ergebnis
Schlaganfallrezidiv	Rezidivierender ischämischer Schlaganfall	Bis Tag 90	Neurologische Diagnose mit Bildgebung, wenn verfügbar	Sicherheitsbezogenes Ergebnis
Mortalität	Tod aus allen Ursachen	Bis Tag 90	Tod aus beliebiger Ursache	Sicherheitsergebnis
Systemische Entzündung	hs-CRP, IL-6, TNF-alpha	Grundlinie, Tag 14, Tag 28	Serum-/Plasmakonzentrationen	Exploratives Biomarker-Ergebnis
Endotoxin-/Barrierekennzeichen	LPS, Zonulin	Grundlinie, Tag 14, Tag 28	Konzentrationen im Blut	Exploratives Biomarker-Ergebnis
Mikrobieller Metabolit	TMAO	Grundlinie, Tag 28	Plasmakonzentration	Exploratives Biomarker-Ergebnis
Diversität der Darmmikrobiota	Shannon, Chao1, Bray–Curtis	Grundlinie, Tag 28	Diversität aus 16S rRNA-Daten	Exploratives Biomarker-Ergebnis
Mikrobielle Zusammensetzung	Ausgewählte Gattungen	Tag 28	Relativer Anteil auf Gattungsebene	Explorativ; nominelles P und BH-FDR q über drei angegebene Gattungen
Kurzkettige Fettsäuren	Acetat, Propionat, Butyrat, Gesamt-SCFAs	Tag 28	Fäkale Konzentrationen mittels GC-MS	Exploratives Biomarker-Ergebnis
Exploratorische Reaktion	Zusammengesetzte Reaktion	Tag 28	Mindestens zwei: Shannon >0,20; Butyrat >20 %; LPS-Abnahme >15 %; IL-6-Abnahme >20 %	Explorativ; Schwellenwerte nicht klinisch validiert
Sicherheit der Intervention	Unerwünschte Ereignisse und schwere unerwünschte Ereignisse	Tag 1–90	Vom Prüfer dokumentierte Ereignisse und deren Zuordnung	Sicherheitsergebnis

Tabelle 4: Klinische und biologische Endpunkte, Untersuchungszeitpunkte, Definitionen und Analyseklassifizierung. Diese Tabelle fasst die vorab festgelegten klinischen und biologischen Endpunkte, die Zeitpunkte ihrer Bewertung, die operationellen Definitionen sowie die Analyseklassifizierungen zusammen. FDR, falsche Entdeckungsrate; hs-CRP, hochsensitives C-reaktives Protein; IL-6, Interleukin-6; LPS, Lipopolysaccharid; mRS, modifizierte Rankin-Skala; NIHSS, Stroke-Skala der National Institutes of Health; SCFA, kurzkettige Fettsäure; TMAO, Trimethylamin-N-oxid.

Ergebnisse

Teilnehmerfluss und Analysepopulationen

Von 176 Patienten, die zur Studie zugelassen wurden, wurden 48 vor der Randomisierung ausgeschlossen, und 128 wurden randomisiert (64/Gruppe; Abbildung 1). Alle randomisierten Teilnehmer wurden in die Intention-to-treat- und Sicherheitspopulation eingeschlossen. Der NIHSS am Tag 28 wurde bei 59 Teilnehmern in der Kontrollgruppe und 58 Teilnehmern in der Interventionsgruppe erfasst; der Follow-up am Tag 90 wurde von jeweils 57 und 56 Teilnehmern abgeschlossen. Die per-Protokoll-Populationen umfassten 58 und 57 Teilnehmer (Abbildung 2).

Grundlegende Merkmale

Die Basischarakteristika waren zwischen den Gruppen vergleichbar (Tabelle 5). Das mittlere Alter betrug 65,1 ± 8,7 gegenüber 64,7 ± 9,1 Jahre, der Basis-NIHSS 8,6 ± 2,6 gegenüber 8,4 ± 2,9 und der basislineare Barthel-Index 43,5 ± 13,2 gegenüber 44,8 ± 12,7. Eine intravenöse Thrombolyse wurde 16/64 (25,0 %) der Kontrollpersonen und 18/64 (28,1 %) der Interventionspersonen verabreicht; eine mechanische Thrombektomie wurde jeweils bei 4/64 (6,3 %) und 5/64 (7,8 %) durchgeführt.

Einhaltung der Intervention

In der Interventionsgruppe betrug die mediane Anzahl der Akupunktursitzungen 18 (interquartiler Bereich: 17–20); 57 Teilnehmer absolvierten ≥ 16 Sitzungen und 58 nahmen ≥ 80 % der Dekoktion ein. Die nicht vorgesehene Einnahme von Probiotika/Präbiotika trat bei zwei Teilnehmern der Kontrollgruppe und einem Teilnehmer der Interventionsgruppe auf; diese Teilnehmer wurden in die Intention-to-treat-Analyse eingeschlossen, jedoch von der Per-Protokoll-Analyse ausgeschlossen (Ergänzende Tabelle 1).

Klinische Ergebnisse

Der beobachtete NIHSS-Wert sank in der Kontrollgruppe von 8,6 ± 2,6 auf 5,5 ± 3,1 (n = 59 am Tag 28) und in der Interventionsgruppe von 8,4 ± 2,9 auf 4,1 ± 2,9 (n = 58; Abbildung 3A). Die beobachteten mittleren Veränderungen betrugen jeweils −3,34 ± 4,14 und −3,97 ± 4,03 Punkte (Abbildung 3B). In der vorab festgelegten ANCOVA-Analyse mit 30 Imputationen war der adjustierte NIHSS-Wert am Tag 28 in der Interventionsgruppe um 1,30 Punkte niedriger (95-%-Konfidenzintervall [KI], −2,36 bis −0,24; P = 0.017).

Der NIHSS am Tag 14 betrug 5,49 ± 2.45 gegenüber 4.61 ± 2,23 (basalwertbereinigter P = 0,041) und der beobachtete NIHSS am Tag 90 betrug 3,68 ± 2,68 (n = 57) gegenüber 2.88 ± 2,36 (n = 56; P = 0,091; Abbildung 3A).

Der Barthel-Index am Tag 28 betrug 61,39 ± 18,80 gegenüber 68,82 ± 19,36 (p = 0,040 nach Anpassung an den Ausgangswert); die beobachteten Werte am Tag 90 lagen bei 75,56 ± 19,22 gegenüber 81,49 ± 17,67 (p = 0,098; Abbildung 3C). Bei den Teilnehmern, die in die beobachtete-Fall-Analyse des mRS am Tag 90 eingeschlossen wurden, trat ein günstiger Outcome bei 32/57 Kontrollpersonen (56,1 %) und bei 38/56 Teilnehmern der Interventionsgruppe (67,9 %; p = 0,200) auf. Die vollständige Verteilung der mRS-Kategorien für die beobachteten Fälle ist in Abbildung 3D und Zusatz-Tabelle 1 dargestellt. ITT-Schätzungen für das dichotomisierte mRS-Ergebnis mittels multipler Imputation (36/64 gegenüber 44/64; p = 0,144) werden separat berichtet.

Biomarker im Zusammenhang mit der Darm-Hirn-Achse

Stuhlproben standen für alle randomisierten Teilnehmer (64 pro Gruppe) zum geplanten Analysezeitpunkt zur Verfügung und wurden erfolgreich analysiert. Die Shannon-Diversität am Tag 28 betrug 3,08 ± 0,52 im Vergleich zu 3,31 ± 0,57 (basal-adjustiertes P = 0,019; Abbildung 4A), und die Konzentration an Butyrat im Stuhl betrug 10,21 ± 4,27 im Vergleich zu 12,91 ± 5,08 µmol/g (P = 0,002; Abbildung 4B).

IL-6 betrug 18,23 ± 9,44 im Vergleich zu 15,62 ± 8,06 pg/mL am Tag 14 (nomineller P = 0,095) und 14,61 ± 8,18 im Vergleich zu 11,84 ± 6,83 pg/mL am Tag 28 (basislinienadjustierter P = 0,041; Abbildung 4C). LPS betrug 0,85 ± 0,32 im Vergleich zu 0,78 ± 0,30 EU/mL am Tag 14 (P = 0,204) und 0,78 ± 0,31 im Vergleich zu 0,66 ± 0,28 EU/mL am Tag 28 (basislinienadjustierter P = 0,023; Abbildung 4D).

Am Tag 28 waren Faecalibacterium und Roseburia in der Interventionsgruppe stärker vertreten (nominaler P-Wert = 0,006 bzw. 0,009; beide q = 0,013), während Bifidobacterium die nominelle Signifikanz nicht erreichte (P = q = 0,056; Abbildung 4E). Die Korrektur nach Benjamini–Hochberg wurde für die drei dargestellten Gattungen angewandt.

Die explorative zusammengesetzte Reaktion trat bei 21/64 Kontrollpersonen (32,8 %) und bei 34/64 Teilnehmern der Interventionsgruppe (53,1 %; P = 0,020) auf. Die Ergebnisse der Einzelkomponenten sind in Abbildung 4F und Zusatztabelle 2 dargestellt; die Schwellenwerte sind explorativ und nicht klinisch validiert.

Explorative Einzelanalysen auf Teilnehmerebene

Die explorativen assoziativen Analysen auf Teilnehmerebene wurden mittels Spearman-Rho mit 5.000 Bootstrap-Stichproben durchgeführt. Veränderungen in fetalem Butyrat, IL-6, LPS und der Shannon-Diversität waren nicht signifikant mit den entsprechenden neurologischen oder Biomarker-Veränderungen assoziiert (Abbildung 5).

Änderungen der Butyrat-Konzentration im Stuhl waren nicht signifikant mit Änderungen des NIHSS assoziiert (Spearman-Rangkorrelationskoeffizient rho = −0,05; 95 % Bootstrap-Konfidenzintervall [KI], −0,23 bis 0,13; P = 0,601; n = 117). Die Änderung von IL-6 war nicht mit der Änderung des NIHSS assoziiert (rho = −0,01; 95 % Bootstrap-KI, −0,18 bis 0,15; P = 0,887; n = 117), und die Änderung von LPS war nicht mit der IL-6-Änderung assoziiert (rho = −0,14; 95 % Bootstrap-KI, −0,29 bis 0,03; P = 0,125; n = 128).

Die Veränderung der Shannon-Diversität war nicht signifikant mit der Veränderung des NIHSS assoziiert (rho = −0,15; 95 % CI, −0,34 bis 0,06; P = 0,119; n = 117). Da die vorab festgelegten Teilnehmer-ebenen-Assoziationen zwischen Exposition und Mediator sowie zwischen Mediator und Ergebnis nicht bestätigt wurden, wurde keine Mediationsanalyse durchgeführt, und es wurde kein indirekter Effekt oder kausaler Gehirn-Darm-Weg abgeleitet.

Sicherheitsaspekte

Jede Nebenwirkung trat bei 8/64 Kontrollpersonen und bei 11/64 Teilnehmern der Interventionsgruppe auf (12,5 %) gegenüber 17,2 %; P = 0,456). Eine Blutung an der Nadel-Einstichstelle trat bei 0 gegenüber 5 Teilnehmer (P = 0,023), die ohne Behandlung abklangen; bei 3 Teilnehmern trat eine leichte gastrointestinale Unwohlsein auf gegenüber 6 Teilnehmer (P = 0,300; Tabelle 6).

Schwere unerwünschte Ereignisse traten bei 3 Kontrollpersonen und 2 Teilnehmern der Interventionsgruppe auf (P = 0,648). In jeder Gruppe ereignete sich ein Todesfall; kein schweres unerwünschtes Ereignis wurde eindeutig mit Akupunktur oder der modifizierten Xiaoxuming-Decoction in Verbindung gebracht.

Zusammenfassend war die kombinierte Intervention mit einer geringfügigen Verbesserung des NIHSS am Tag 28 und ausgewählter Biomarker am Tag 28 verbunden. Die klinischen Unterschiede am Tag 90 waren statistisch nicht signifikant, und die individuenspezifischen Daten stützten keine Vermittlung über die gemessenen Biomarker.

Abbildung 2: Klinischer und biologischer Probennahmeablauf. Blut- und Stuhlproben wurden zur Analyse des Mikrobioms, der kurzkettigen Fettsäuren (SCFA), entzündlicher Parameter und der Darmbarrierefunktion entnommen. Der Ablauf dient der Untersuchung explorativer Assoziationen und behauptet keinen kausalen Gehirn-Darm-Mechanismus. Bitte klicken Sie hier, um eine vergrößerte Version dieser Abbildung anzusehen.

Abbildung 3: Klinische Ergebnisse. (A) NIHSS-Verlauf; Punkte zeigen Mittelwert ± SD, mit n zu jedem Zeitpunkt. (B) Beobachteter NIHSS-Unterschied von der Ausgangswerte bis zum 28. Tag, dargestellt als Mittelwert ± SD (Kontrolle n = 59; Intervention n = 58); die Anmerkung gibt das Ergebnis einer ANCOVA mit 30 Imputationen an, adjustiert für den NIHSS-Ausgangswert, Alter, Geschlecht, Reperfusion und Zeit von Symptombeginn bis zur Randomisierung. (C) Barthel-Index, dargestellt als Mittelwert ± SD, mit angegebenem n. (D) Beobachtete mRS-Kategorien am Tag 90 (Kontrolle n = 57; Intervention n = 56); die Prozentsätze basieren auf den beobachteten Fallzahlen. P-Werte sind zweiseitig. Es werden keine Signifikanzsymbole verwendet. CI, Konfidenzintervall; MI, multiple Imputation; SD, Standardabweichung. Bitte klicken Sie hier, um eine vergrößerte Version dieser Abbildung anzusehen.

Abbildung 4: Untersuchende Biomarker. Balken und Punkte zeigen Mittelwert ± SD. Von allen randomisierten Teilnehmern lagen für die entsprechenden Analysen auswertbare Proben vor; daher standen für jede Panel n = 64/Gruppe zur Verfügung. Fäkale Proben wurden von allen Teilnehmern erfolgreich gesammelt und verarbeitet, einschließlich derjenigen, bei denen die Sammlung innerhalb des vorgegebenen Sammlungszeitfensters verzögert erfolgte. (A) Shannon-Index und (B) fäkales Butyrat: linear modellierte, auf den Ausgangswert tag-28 basierende Anpassung. (C) IL-6- und (D) LPS-Verläufe: Welch-Tests am Tag 14 und modellbasierte, auf den Ausgangswert angepasste Analysen am Tag 28. (E) Ausgewählte Gattungen am Tag 28: Welch-Tests mit Benjamini–Hochberg-Korrektur über die drei dargestellten Gattungen; sowohl nominelle P- als auch q-Werte sind angegeben. (F) Antwortkomponenten: Pearson-Chi-Quadrat-Tests. Alle P-Werte sind zweiseitig; es werden keine Signifikanzsymbole verwendet. IL-6, Interleukin-6; LPS, Lipopolysaccharid; SCFA, kurzkettige Fettsäure; SD, Standardabweichung. Bitte klicken Sie hier, um eine vergrößerte Version dieser Abbildung anzusehen.

Abbildung 5: Erkundende Zusammenhänge auf Teilnehmerebene. (A) Änderung von Butyrat im Vergleich zur Änderung des NIHSS (n = 117). (B) Änderung von IL-6 im Vergleich zur Änderung des NIHSS (n = 117). (C) Änderung von LPS im Vergleich zur Änderung von IL-6 (n = 128). Die Linien dienen nur der Visualisierung und stellen keine regressionsbasierte Inferenz dar. Die statistische Inferenz basierte auf Spearmans Rho mit 5.000 Bootstrap-Stichproben. (D) Schätzungen nach Spearman mit 95 %igen Bootstrap-Konfidenzintervallen (CIs) aus 5.000 Stichproben, einschließlich der Änderung des Shannon-Indexes im Vergleich zur Änderung des NIHSS (n = 117). Kein Zusammenhang erreichte P < 0,05; daher wurde keine Mediationsanalyse durchgeführt. Es wurden keine Signifikanzsymbole verwendet. Bitte klicken Sie hier, um eine vergrößerte Version dieser Abbildung anzusehen.

Variable	Kontrollgruppe (n = 64)	Interventionsgruppe (n = 64)	P-Wert
Alter, Jahre	65,1 ± 8,7	64,6 ± 9,0	0,775
männliches Geschlecht, n (%)	40 (62,5)	39 (60,9)	0,855
Zeit von Symptombeginn bis Randomisierung, h	41,7 ± 14,9	40,9 ± 15,7	0,773
NIHSS-Baselinescore	8,6 ± 2,6	8,4 ± 2,9	0,665
Barthel-Index bei Studienbeginn	43,5 ± 13,2	44,8 ± 12,7	0,573
Arterielle Hypertonie, n (%)	42 (65,6)	41 (64,1)	0,855
Diabetes mellitus, n (%)	18 (28,1)	17 (26,6)	0,839
intravenöse Thrombolyse, n (%)	16 (25,0)	18 (28,1)	0,690
mechanische Thrombektomie, n (%)	4 (6,3)	5 (7,8)	0,732
hs-CRP, mg/L	7,21 ± 4,18	7,04 ± 4,03	0,813
IL-6, pg/mL	24,03 ± 10,14	23,62 ± 9,96	0,817
TNF-alpha, pg/mL	30,5 ± 11,2	30,0 ± 11,0	0,799
Shannon-Index	2,84 ± 0,55	2,86 ± 0,56	0,833
Fäkales Butyrat, µmol/g	8,41 ± 3,99	8,53 ± 4,04	0,859
LPS, EU/mL	0,94 ± 0,34	0,93 ± 0,35	0,870
Zonulin, ng/mL	54,50 ± 15,60	54,11 ± 15,08	0,885

Tabelle 5: Baseline-Demografie, klinische und Biomarker-Merkmale. Diese Tabelle fasst die baseline-Demografie, klinischen Merkmale, behandlungsbezogenen Angaben und Biomarker-Eigenschaften in der Kontroll- und Interventionsgruppe zusammen. Die Werte sind als Mittelwert ± Standardabweichung oder n (%) angegeben. Die intravenöse Thrombolyse und die mechanische Thrombektomie werden als getrennte Standardtherapie-Kategorien berichtet.

Sicherheitsoutcome	Kontrollgruppe (n=64)	Interventionsgruppe (n=64)	P-Wert
Beliebiges unerwünschtes Ereignis, n (%)	8 (12,5)	11 (17,2)	0,456
Verletzung an der Einstichstelle, n (%)	0	5 (7,8)	0,023
Leichte gastrointestinale Beschwerden, n (%)	3 (4,7)	6 (9,4)	0,3
Vorübergehende Schwindelgefühle, n (%)	2 (3,1)	3 (4,7)	0,648
Leichte Hautausschläge, n (%)	1 (1,6)	2 (3,1)	0,56
Abnorme Leberfunktion, n (%)	1 (1,6)	2 (3,1)	0,56
Abnorme Nierenfunktion, n (%)	1 (1,6)	1 (1,6)	1
Blutdruckschwankungen, n (%)	2 (3,1)	3 (4,7)	0,648
Herzrasen, n (%)	0	1 (1,6)	0,315
Schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis, n (%)	3 (4,7)	2 (3,1)	0,648
Schwerwiegendes, interventionsbedingtes unerwünschtes Ereignis, n (%)	0	0	--
Tod aus beliebiger Ursache, n (%)	1 (1,6)	1 (1,6)	1

Tabelle 6: Unerwünschte Ereignisse und schwere unerwünschte Ereignisse. Diese Tabelle fasst unerwünschte Ereignisse, schwere unerwünschte Ereignisse, interventionsbezogene schwere unerwünschte Ereignisse sowie Todesfälle unabhängig von der Ursache in der Kontroll- und Interventionsgruppe zusammen. Die Werte sind als n (%) angegeben.

VERFÜGBARKEIT VON DATEN:

Anonymisierte, auf Teilnehmerniveau basierende Daten, die die berichteten klinischen, Biomarker-, Mikrobiom-, Adhärenz- und Sicherheitsanalysen unterstützen, sind öffentlich zugänglich in Zenodo (https://zenodo.org/records/22725409).

Zusatz-Tabelle 1: Nachuntersuchung, Therapietreue und klinische Ergebnisse. Beobachtete und geschätzte Analysepopulationen sind separat gekennzeichnet. Die primäre Schätzung verwendet eine 30-fache multiple Imputation und eine ANCOVA, die anhand des Basislinien-NIHSS, des Alters, des Geschlechts, der Reperfusion und der Zeit von Symptombeginn bis zur Randomisierung adjustiert ist. CI, Konfidenzintervall; IQR, Interquartilsabstand; mRS, modifizierte Rankin-Skala; NIHSS, National Institutes of Health Stroke Scale.Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.

Erweiterte Tabelle 2: Ergebnisse der explorativen Biomarker-Analyse. Werte sind als Mittelwert ± SD oder n (%) angegeben. Nominale P-Werte und FDR-angepasste q-Werte sind unterschieden. Für die zusammengesetzte Antwort war das Vorliegen mindestens zweier von vier vorab festgelegten Veränderungen erforderlich; diese ist jedoch nicht klinisch validiert. Korrelationsanalysen sind explorativ; eine Mediationsanalyse wurde nicht durchgeführt, da die erforderlichen Assoziationen auf Ebene der Teilnehmer nicht signifikant waren.Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.

Zusatzdatei 1: Die Rohdaten, die zu den Abbildungen und Tabellen gehören. Bitte klicken Sie hier, um diese Datei herunterzuladen.

Diskussion

Das kombinierte Protokoll führte zu einer geringfügigen Verbesserung früher neurologischer Defizite, wobei die multiplen Imputationen mittels ANCOVA einen Unterschied von −1,30 Punkten im NIHSS am Tag 28 ergaben. Auch der Barthel-Index am Tag 28 sowie ausgewählte Biomarker am Tag 28 unterschieden sich, während die Ergebnisse am Tag 90 keine statistische Signifikanz erreichten. Diese Ergebnisse sprechen dafür, die kombinierte Intervention als Zusatztherapie – und nicht als Ersatz – für die Reperfusion, antithrombotische Therapie, Rehabilitation oder andere Standardbehandlungen zu prüfen.

Der in dieser Studie beobachtete klinische Effekt stimmt mit der zunehmenden Auffassung überein, dass Akupunktur zur Erholung nach einem Schlaganfall über eine bloße symptomatische Modulation hinaus beitragen könnte. Frühere Arbeiten legen nahe, dass Akupunktur die neurologische Funktion verbessern und die entzündliche Aktivität bei akutem ischämischem Schlaganfall verringern kann, wobei jedoch die Stärke und Dauerhaftigkeit des Nutzens zwischen den Studien variieren²¹. Die vorliegenden Ergebnisse erweitern diese Evidenzlinie, indem sie Akupunktur als Teil einer kombinierten Intervention mit einer standardisierten pflanzlichen Formulierung untersuchen und den klinischen Effekt mit vorab definierten, der Gehirn-Darm-Achse zugeordneten Biomarkern verknüpfen. Die Effektgröße war eher geringfügig als dramatisch, was für die Interpretation wichtig ist. Ein um 1 Punkt adjustierter Unterschied im NIHSS-Score kann bei leichtem bis mäßigem Schlaganfall, begleitet von funktionellen und biologischen Signalen, bedeutsam sein, sollte jedoch nicht als Beleg dafür gewertet werden, dass die Intervention allein die Genesung bestimmt. Die Schritte, die am empfindlichsten für Reproduzierbarkeit sind, umfassen eine konsistente zeitliche Festlegung der Einschlusskriterien, verdeckte Zuordnung, sicheres Nadeln, standardisierte Exposition gegenüber dem Dekokt, verblindete Outcome-Beurteilung sowie schnelle, temperaturkontrollierte Probenaufarbeitung. Zu den häufigen praktischen Problemen zählen versäumte Akupunktursitzungen, unsicheres Schlucken, verzögerte Stuhlbildung und Auftauen während des Transports. Diese Probleme wurden dadurch adressiert, dass Verschiebungen dokumentiert, orale Behandlungen bei Gefahr ausgesetzt wurden, der nächste spontane Stuhl ohne ausschließlich forschungsbedingte Abführmittel gesammelt, Verstopfung und Verzögerung bei der Probensammlung erfasst sowie die Aufarbeitung und die Auftau-Gefrier-Historie nachverfolgt wurden.

Die Unterschiede am Tag 28 bezüglich Shannon-Diversität, Butyrat, IL-6 und LPS stellten explorative Assoziationen auf Gruppenebene dar. Explorative Analysen auf Teilnehmerebene bezüglich der Assoziationen zwischen Butyrat und NIHSS, IL-6 und NIHSS, LPS und IL-6 sowie Shannon und NIHSS unterstützten nicht die erforderlichen Voraussetzungen für eine Mediationsanalyse; daher wurde keine Mediationsanalyse durchgeführt, und die Daten belegen keinen kausalen Gehirn-Darm-Mechanismus. Alternative Ansätze, einschließlich Shotgun-Metagenomik, gezielter Metabolomik mit isotopenmarkierten Standards, serieller Ernährungsaufzeichnungen und wiederholter Biomarker-Probenahmen, würden Funktion und zeitliche Abfolge direkter charakterisieren als die 16S-rRNA-Sequenzierung und zwei Stuhlprobenzeitpunkte^22,23,24.

Die Interpretation ist durch die Stichprobe aus einer einzigen Zentrum, die fehlende Verblindung der Teilnehmer, das Fehlen einer prospektiven Studienregistrierung vor der Einschreibung sowie das kombinierte Interventionsdesign ohne Gruppen mit ausschließlich Akupunktur oder ausschließlich Dekokt eingeschränkt. Daher kann das Design Effekte nicht auf eine einzelne Komponente oder auf eine Synergie zurückführen. Die gewöhnliche Ernährung, der Schweregrad der Dysphagie, die enterale Ernährung, Antibiotika nach der Randomisierung, die Verwendung von Protonenpumpenhemmern, Verstopfung, die Intensität der Rehabilitation und die Dauer des Krankenhausaufenthalts könnten die Ergebnisse bezüglich des Mikrobioms beeinflussen. Diese Faktoren wurden nicht in die adjustierten Mikrobiommodelle einbezogen und stellen daher mögliche verbleibende Störfaktoren dar. Die FDR-Korrektur für ausgewählte Gattungen beschränkte sich auf die drei dargestellten Gattungen, und die explorativen Ansprechschwellen wurden nicht extern validiert. Die Biomarker-Analysen waren explorativ; einige Konzentrationen von IL-6 und TNF-alpha lagen unterhalb der vom Hersteller angegebenen nominalen Messbereiche und sollten daher vorsichtig interpretiert werden.

Zukünftige Studien sollten eine prospektive Registrierung, eine multizentrische Rekrutierung, ein faktorielles Design, quellenverifizierte Daten zu gleichzeitigen Interventionen, eine standardisierte Erfassung der Ernährung beziehungsweise Exposition sowie unabhängig reproduzierbare Pipelines für Mikrobiom- und Metabolom-Analysen verwenden. Größere Stichproben und häufigere Probennahmen sind erforderlich, bevor Mediationsanalysen, Effekte einzelner Behandlungskomponenten oder eine mikrobiom-basierte Therapienwahl getestet werden können. Das Sicherheitsmonitoring identifizierte kein eindeutig interventionsbedingtes schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis, doch die Stichprobengröße war zu klein, um seltene Schäden auszuschließen. Besondere Aufmerksamkeit sollte weiterhin dem Blutungsrisiko, der Schlucksicherheit, gastrointestinaler Unverträglichkeit, hepatischer/renaler Funktion, dem Blutdruck und Arrhythmien gelten, wenn Akupunktur und phytotherapeutische Behandlungen in die Therapie des akuten Schlaganfalls integriert werden.

Zusammenfassend war die standardisierte Akupunktur in Kombination mit der modifizierten Xiaoxuming-Decoction mit einer geringen neurologischen Verbesserung am Tag 28 und ausgewählten Unterschieden bei Biomarkern verbunden, wenn sie der Standardtherapie hinzugefügt wurde. Die biologischen Ergebnisse sind hypothetisch und belegen keinen kausalen Gehirn-Darm-Mechanismus.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
4-Methylvaleriansäure	Sigma-Aldrich, USA	142342	GC-MS-Interner Standard
16S-rRNA-Gen-Primer (V3–V4-Bereich)	Sangon Biotech, China	Individuelle Synthese	Primer-Paar 341F/806R
Akupunkturnadeln	Hwato (Suzhou Medical Appliance Factory), China	0.25 × 40 mm	Sterile Einweg-Nadeln aus Edelstahl
Barthel-Index-Bewertung	Nicht zutreffend	Nicht zutreffend	Bewertung der Aktivitäten des täglichen Lebens
Kryoröhrchen	Corning, USA	430659	Lagerung von Stuhlproben
Essigsäureethylester (chromatographische Reinheit)	Merck, Deutschland	109623	Organisches Extraktionsmittel
Filter-Pipettenspitzen	Axygen, USA	Verschiedene	RNase-/DNase-frei
Gaschromatograph	Agilent Technologies, USA	7890B GC	GC-Trennsystem
Human IL-6 ELISA-Kit	R&D Systems, USA	D6050	Quantifizierung von serumgebundenem IL-6
Humaner Lipopolysaccharid (LPS) ELISA-Kit	Cusabio, China	CSB-E13066h	Quantifizierung von serumgebundenem LPS
Humaner TMAO-Assay-Kit	Sigma-Aldrich, USA	MAK264	Farb- und fluorometrische TMAO-Quantifizierung
Massenselektiver Detektor	Agilent Technologies, USA	5977B MSD	Quadrupol-Massenspektrometer
MassHunter Workstation Software	Agilent Technologies, USA	G1701EA	GC-MS-Datenerfassung und -analyse
Mikropipetten	Eppendorf, Deutschland	Research-plus-Serie	Flüssigkeitshandhabung im Labor
MiSeq Reagenzienkit v3 (600 Zyklen)	Illumina, USA	MS-102-3003	Pairend-Sequenzierung mit 2 × 300 bp
MiSeq-System	Illumina, USA	SY-410-1003	Pairend-Sequenzierungsplattform; Sequenzierchemie mit 2 × 300 bp
Bewertung nach modifizierter Rankin-Skala (mRS)	Nicht zutreffend	Nicht zutreffend	Funktionelle Outcome-Bewertung am Tag 90
Modifizierte Xiaoxuming-Decoktion (pflanzliche Formulierung)	Krankenhausapotheke, Krankenhaus für traditionelle chinesische und westliche Medizin in Dazhou City	Nicht zutreffend	Herstellung gemäß den pharmazeutischen Standards der Einrichtung; Identifizierung und Abgabe durch Krankenhausapotheker
NIH-Schlaganfallskala (NIHSS)-Bewertungsbogen	Nationales Institut für neurologische Erkrankungen und Schlaganfall	Nicht zutreffend	Standardisiertes klinisches Bewertungsinstrument
NumPy	NumPy-Entwickler	RRID: SCR_008633	Version 1.26.x
pandas	pandas-Entwicklungsteam	RRID: SCR_018239	Version 2.1.x
Phosphorsäure	Sigma-Aldrich, USA	79619	Reagenzienqualität, analytisch
Python	Python Software Foundation	RRID: SCR_008394	Version 3.11.x
QIAamp PowerFecal Pro DNA-Kit	Qiagen, Deutschland	51804	DNA-Extraktion aus Stuhl für Mikrobiom-Analysen
QIIME 2	QIIME 2-Entwicklungsteam	RRID: SCR_008249	Version 2024.5
Qubit dsDNA HS Assay-Kit	Thermo Fisher Scientific, USA	Q32851	Fluoreszenzbasierte DNA-Quantifizierung
scikit-learn	scikit-learn-Entwickler	RRID: SCR_002577	Version 1.4.x
SciPy	SciPy-Entwickler	RRID: SCR_008058	Version 1.11.x
SILVA-rRNA-Datenbank	SILVA-Projekt	RRID: SCR_006423	Version 138.1
Ultra-tiefkühlschrank	Thermo Fisher Scientific	TSX60086A	−80 °C-Lagerung