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Forschungsartikel

Amygdalin reguliert die FOXO3a-Signalisierung, um oxidativen Stress zu hemmen und Alopecia areata bei Mäusen zu verbessern

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DOI:

10.3791/73759

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29. September 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Dermatology, Sichuan Provincial People's Hospital, University of Electronic Science and Technology of China, 2Neurosurgery, Institute of Sichuan Cancer Hospital, 3Department of Dermatology, The Affiliated Hospital, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Diese Studie zielt darauf ab, die potenziellen molekularen Mechanismen zu untersuchen, die den antioxidativen und entzündungshemmenden Wirkungen von Amygdalin im Alopecia-areata-Modell an C3H/HeJ-Mäusen sowie in einem Modell menschlicher primärer epidermaler Melanozytenverletzungen, das durch H2O2 induziert wurde, zugrunde liegen.

Zusammenfassung

Diese Arbeit zielt darauf ab, den Wirkmechanismus der therapeutischen Wirkung von Amygdalin (AMG) bei der Alopecia areata (AA) zu untersuchen. Die Hämatoxylin-Eosin-Färbung wurde verwendet, um die hepatorenale Toxizität von AMG zu untersuchen. Nach der Erstellung des AA-Modells bei C3H/HeJ-Mäusen und H2O2– beschädigte humane primäre epidermale Melanozyten (HPEMs), und nach AMG-Intervention wurden der Gehalt an reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) sowie die Spiegel des Forkhead-Box-O3A-(FOXO3a)-Proteins und -Gens überwacht. Biochemische Kits oder ‌ELISA‌ wurden verwendet, um die Gehalte an Superoxiddismutase (SOD), Katalase (CAT), Glutathionperoxidase 4 (GPX-4), Malondialdehyd (MDA), Interleukin-15 (IL-15), Interferon-gamma (IFN-γ) und Interleukin-6‌ (IL-6). Eine Western Blot-Analyse wurde durchgeführt, um die Spiegel von MHC I, IL-15, FOXO3a, SOD, CAT, GPX-4 und IFN-γ, IL-6 und IL-15. ChIP-PCR wurde durchgeführt, um die Anreicherung von AMG an den Promotoren von SOD, CAT und GPX-4 in FOXO3a zu bewerten. Gleichzeitig wurden ROS, Apoptose sowie die Proteinebenen und Genexpression von FOXO3a, SOD, CAT und GPX-4 in HPEMs mit niedriger FOXO3a-Expression untersucht. AMG weist keine potenzielle Leber- oder Nierentoxizität auf und kann die Expression der Proteine MHC I und IL-15 in der Haut sowie die Serumkonzentration von IL-15 reduzieren. AMG kann die Expression des Proteins und Gens von FOXO3a in der Haut sowie die Spiegel von SOD, CAT und GPX-4 erhöhen, während es die Konzentrationen von ROS und MDA senkt. AMG kann MHC I und IFN-γ, IL-6 und IL-15, MDA, Apoptose und ROS-Produktion in HPEMs sowie erhöhte Gehalte an SOD, CAT und GPX-4. Bedeutsamerweise kann AMG die Expression der Gene und Proteine FOXO3a, SOD, CAT und GPX-4 hochregulieren und FOXO3a an den Promotoren von SOD, CAT und GPX-4 anreichern. Diese Daten legen nahe, dass AMG die Expression von FOXO3a fördern und oxidativen Stress sowie entzündliche Reaktionen hemmen kann, wodurch die AA bei C3H/HeJ-Mäusen verbessert wird.

Einleitung

Als autoimmune Erkrankung, die sich durch plötzlichen, narbenlosen Haarausfall auszeichnet, hat die alopecia areata (AA) eine weltweite Prävalenz von etwa 2–3 %, wobei es in China über 30 Millionen Betroffene gibt1. Epidemiologische Daten zeigen, dass die Erkrankung alle Altersgruppen betreffen kann, jedoch eine höhere Prävalenz bei jungen Erwachsenen aufweist, wobei etwa 60 % der Patienten erstmals vor dem 20. Lebensjahr erkranken, mit einem nahezu gleichen Verhältnis zwischen Männern und Frauen1,2. Weltweit beträgt die jährliche Inzidenz von AA etwa 0,2–0,3 %, wobei 40 % Einzelherd-AA, 35 % Mehrherd-AA, 5 % totale Alopezie und 2 % universelle Alopezie ausmachen3,4,5. Hinsichtlich Komplikationen weisen etwa 30 % der Patienten Nageldepressionen, Längsrillen und andere Schäden auf, und die Komorbiditätsrate mit Autoimmunerkrankungen wie Schilddrüsenerkrankungen und Vitiligo liegt über den Werten der Allgemeinbevölkerung6,7. Aus schädlicher Sicht beeinträchtigt AA nicht nur das Erscheinungsbild, sondern begünstigt auch psychische Probleme wie Depressionen und Angstzustände, wobei etwa 70 % der Neuerkrankten innerhalb von drei Monaten vor dem Ausbruch belastende Lebensereignisse erlebt haben8,9. Bleibt die Erkrankung über einen längeren Zeitraum unbehandelt, können die Patienten eine totale Alopezie oder universelle Alopezie entwickeln, was ihre soziale Funktion und Lebensqualität erheblich beeinträchtigt10.

Derzeit verwendet die westliche Medizin hauptsächlich eine Kombination aus lokalen Arzneimitteln, oralen Medikamenten, physikalischer Therapie und Haartransplantation zur Behandlung von AA11,12. Die lokale Behandlung umfasst vor allem Minoxidil-Lösung und Kortikosteroide (wie Fluticason-Propionat-Creme), die Haarfollikel stimulieren und lokale Immunreaktionen hemmen, um das Haarwachstum zu fördern; langfristige Anwendung kann jedoch zu unerwünschten Wirkungen wie Hautatrophie führen13,14. Bei Patienten mit progredientem Verlauf können orale Immunsuppressiva (wie Prednison und Cyclosporin) die systemische Immunantwort effektiv regulieren, erfordern jedoch eine regelmäßige Überwachung der Leber- und Nierenfunktion12,15. Bei der physikalischen Therapie verbessern Bestrahlung mit engbandigem mittlerem UV-Licht und Low-Level-Lasertherapie die Mikrozirkulation, um das Haarwachstum zu unterstützen; mehrere Behandlungen sind jedoch erforderlich, und die Wirkung variiert von Person zu Person16,17. Bei therapieresistenten Fällen kann eine Haartransplantation gesunde Haarfollikel in die kahlen Bereiche verpflanzen, birgt jedoch das Risiko eines Transplantatversagens und erfordert eine medikamentöse Nachbehandlung18. Die Vorteile der westlichen medikamentösen Therapie liegen in ihrer schnellen Wirkungseintrittszeit und hohen Standardisierung, insbesondere bei lokalisiertem AA im Frühstadium19. Zu den Nachteilen zählen jedoch die Neigung zu Rebound-Effekten bei Hormonpräparaten, erhebliche Nebenwirkungen bei Immunsuppressiva sowie deren begrenzte Wirksamkeit bei Patienten mit totaler Glatzenbildung oder universeller Alopezie20,21. Zudem ist der Behandlungszyklus lang (in der Regel 3–6 Monate), und die Kosten sind hoch (beispielsweise jährliche Kosten für JAK-Inhibitoren, biologische Wirkstoffe, über 100.000 Yuan), was ihre breite Anwendung ebenfalls einschränkt19,22. Aufgrund der zahlreichen oben genannten Gründe müssen die Autoren dringend neue gezielte Arzneimittel erforschen.

Oxidativer Stress trägt maßgeblich zum pathogenen Mechanismus der alopecia areata (AA) bei. Während des Prozesses der Melanozyten-Pigmentierung wird eine große Menge Wasserstoffperoxid (H2O2) produziert23,24. Unter normalen Bedingungen kann dieses durch antioxidative Enzyme (wie Superoxiddismutase (SOD) und Katalase (CAT)) abgebaut werden25. Bei Personen mit AA ist die Aktivität dieser antioxidativen Enzyme jedoch häufig vermindert, was zur Anreicherung oxidativer Produkte führt und DNA-Schäden sowie Zellapoptose verursacht26,27. Dieser Zustand oxidativen Stresses aktiviert zudem die Entzündungsreaktion, wodurch proinflammatorische Mediatoren (wie TNF-α und IFN-γ) freigesetzt werden und ein Teufelskreis aus oxidativem Stress und Entzündung entsteht28. Die entzündliche Reaktion greift die Haarfollikel über T-Lymphozyten an, wodurch diese in eine Ruhephase eintreten und ausfallen29. Klinische Studien haben gezeigt, dass AA-Patienten häufig an weiteren Autoimmunerkrankungen (wie Schilddrüsenerkrankungen) leiden30, was darauf hindeutet, dass eine systemische Immunregulationsstörung einen entscheidenden auslösenden Faktor darstellt. Außerdem fördern oxidativer Stress und Entzündung gemeinsam die Apoptose von Haarfollikelzellen, und die Störung apoptotischer Signale schädigt weiterhin die Regenerationsfähigkeit der Haarfollikel, sodass ein Nachwachsen der Haare verhindert wird31. Daher muss die Behandlung der AA antioxidative, entzündungshemmende sowie die Regulation apoptotischer Signalwege berücksichtigen, um diesen Teufelskreis zu durchbrechen.

Amygdalin (AMG) ist eine natürlich vorkommende cyanogene Glykosidverbindung, die hauptsächlich in Pflanzensamen der Familie der Rosaceae (wie Aprikose, Mandel, Pfirsichkerne und Mizpe) enthalten ist32,33,34. Frühere Studien haben gezeigt, dass AMG Psoriasis verbessern kann, indem es die Barrierefunktion der Haut stärkt35. Gleichzeitig ermöglichen die antiapoptotischen und antioxidativen Stresswirkungen von AMG dessen Einsatz bei der Behandlung von AA36,37. Frühere Befunde bestätigten zudem, dass AMG die entzündliche Reaktion hemmen kann, wodurch die AA-Symptome bei C3H/HeJ-Mäusen gelindert werden38. Der molekulare Wirkmechanismus, durch den AMG die Entzündung hemmt und oxidativen Stress lindert, um AA abzuschwächen, wurde jedoch bisher nicht ausreichend beschrieben. Diese Studie demonstrierte hauptsächlich die durch AMG vermittelten, auf dem Forkhead-Box-O3A-(FOXO3a)-Signalweg beruhenden oxidative Stressereignisse bei der Behandlung des AA-Modells an C3H/HeJ-Mäusen sowie des Verletzungsmodells humaner primärer epidermaler Melanozyten (HPEMs), das durch H2O2 induziert wurde.

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Protokoll

Ethics approval and consent to participate
The experimental protocols involving animals were authorized by the Ethics Committee of Scientist Biotechnology Co., Ltd. (Ethical Approval Number: SYST-2024-014), following the ARRIVE 2.0, NIH Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. And the Ethics Committee of Sichuan Provincial People’s Hospital granted approval for the ethical use of human clinical samples for in vitro experiments (Ethical Approval Number: 2024103). Informed consent was obtained from all tissue donors. All commercial details of the reagents and the equipment used in this study are provided in the Table of Materials.

Construction of the AA model in C3H/HeJ mice and AMG administration
Based on the previous literature, the AA model of C3H/HeJ mice was induced and treated with AMG38,39. In brief, thirty female C3H/HeJ mice (6–8 weeks old) underwent a one-week acclimatization period before being randomly assigned to five distinct groups: Control, AA, AMG-L, AMG-M, and AMG-H. Except for the control group, the AA model in the remaining four groups was established by applying 0.05 g imiquimod cream to the murine dorsal skin. This application was performed three times weekly, accumulating to a total of nine doses. The area of the skin that was applied was 1.5 cm × 1.5 cm. Mice in both the control and AA cohorts received 0.02 mL/g of normal saline by gavage daily. While the mice in AMG groups were given intragastric injections of 60, 90, and 120 mg/kg daily. The administration period is 21 days. For the general observation and assessment of the AA model, a well-defined circular alopecia patch ≥ 1 cm in diameter, with no scarring or severe inflammation, and with broken hair shafts, is required. If mice show diffuse whole-body depilation, severe skin ulceration, or spontaneous rapid hair regrowth, they are excluded.

HPEMs
Following the previous method40, healthy skin tissues from patients who underwent circumcision in the hospital were selected and immersed in 75% alcohol for 5 min. The skin tissues were then repeatedly washed with PBS containing ampicillin (100 U/mL) and streptomycin sulfate (100mg/mL), and incubated in dispase II solution at 4°C overnight for digestion. The separated and isolated epidermal layers were minced and filtered via a sterile membrane to yield the cell suspension. After centrifugation, the sedimentary lower-layer cells were harvested and subsequently resuspended in melanocyte 254 medium without serum and reseeded at a density of approximately 5 × 105 in culture flasks and cultured in a CO2 incubator. After three passages, pure melanocytes were employed for subsequent experiments.

Establishment of H2O2-induced human melanocyte oxidative stress injury model and AMG intervention
Human melanocytes with a fusion degree of 60% to 80% were divided into a control group and groups with different concentrations of H2O2 (200, 400, 600, 800, and 1000 µM). After a 24-h incubation, cell viability was ‌assessed‌ by the CCK-8 method. Subsequently, the optimal concentration of H2O2 was used to establish the melanocyte oxidative stress model, and different concentrations of AMG (0.1, 0.25, 0.5, 1, 2.5, 5, and 10 mg/mL) were added for a 24-hour culture. Cell viability was then chosen to assess and screen the concentration of AMG.

HE examination
Mouse liver and kidney tissues were fixed in 4% paraformaldehyde for 24 h and embedded with paraffin, followed by a dehydration process in the following steps: 70% ethanol for 4 h, 80% ethanol for 2 h, 90% ethanol for 2 h, 95% ethanol for 2 h, anhydrous ethanol, twice, 1 h each time; xylene, twice, 30 min each time38,39,41. Then, 4-µm paraffin sections underwent H&E staining, were dehydrated, cleared, and mounted with neutral gum. A 3D HISTECH scanner was employed to digitize the tissue sections, and images at 20× and 40× magnifications were captured.

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and biochemical detection
Skin tissues were homogenized in a buffer solution at a 1:9 (w/v) ratio, then centrifuged at 1006–1789 × g for 10 min. After protein quantification in serum, skin tissue extracts, and cell supernatants using BCA, the levels of MDA, IL-6, IL-15, and IFN-γ were assessed using the corresponding ELISA kits. And the enzyme activities of SOD, CAT, and GPX-4 were detected according to the instructions of the respective biochemical kits.

Flow cytometry for detecting reactive oxygen species (ROS)
Serum-free culture medium was used to dilute 10µM DCFH-DA at a 1:1000 ratio. And then, mouse skin tissues or human melanocytes were prepared into cell suspensions of 1–20×106 cells/mL using 10µM DCFH-DA. Cells were incubated at 37°C for 20 min. During this period, cells were shaken and mixed every 3–5 min. Following three washes with serum-free medium, intracellular ROS levels were quantified via flow cytometry, setting the excitation and emission wavelengths at 488nm and 525nm, respectively42,43.

Immunofluorescence measurement
FOXO3a (1:1000) primary antibody was incubated with 4-µm skin tissue sections or fixed HPEMs overnight at 4°C. And then, the specimens were treated with secondary antibodies labeled with Alexa Fluor fluorophores and counterstained with DAPI solution. Finally, the sections were observed and captured through fluorescence microscopy. For fluorescence imaging with ROS, a 4-µm frozen section of skin tissue or HPEMs slides were rewarmed at room temperature and dried. A circle was drawn around the tissue with a histochemical pen. The slides were treated with an autofluorescence quencher for 5 min and then rinsed under running water for 10 min. ROS staining solution was dropped and incubated in the dark at 37°C for 30 min. The sections underwent three 5-minute washes in PBS using a decolorization shaker. Then, DAPI staining solution was dropped and incubated ‌for a duration of 10 min under dark conditions at room temperature. The slides were sealed with an anti-fluorescence quencher medium. The specimens were then observed, and images were collected via a fluorescence microscope. The excitation/emission profiles are 330–380/420 nm for DAPI and 510–560/590 nm for Cy3.

Western blot
For mouse skin tissue or human melanocytes, 50 mg of the skin tissue or 2 × 105 cells and 1 mL of RIPA lysis buffer, enriched with protease inhibitors, were dispensed into a 1.5-mL microcentrifuge tube. After an ice bath for 30 min, a 5-min centrifugation was performed at 12,000 g to collect the supernatant fraction. After protein concentration was determined by the BCA method, the protein solution and 5× SDS loading buffer were mixed in a volume ratio of 4:1, and then boiled in a metal bath at 95 °C for 5 min. After the sample was subjected to 10% SDS-PAGE electrophoresis at 80 V or 120 V, proteins were electrotransferred onto a 0.22-µm PVDF membrane at a constant current of 200 mA for 1 h44,45. The membranes were then blocked at room temperature on a centrifuge shaker for 1 h using 5% skimmed milk (prepared with TBST buffer). The membranes were then exposed to primary antibodies specific to ‌major histocompatibility complex class I‌ (MHC I) (1:1000), IFN-γ (1:1000), IL-6 (1:1000), IL-15 (1:1000), β-Actin (1:1000), SOD (1:1000), CAT (1:1000), glutathione peroxidase 4 (GPX-4) (1:1000), and FOXO3a (1:1000) at 4 °C overnight. And the membranes were probed with the secondary antibody (1:10000) for 1 h at room temperature. ECL chemiluminescent reagent was employed to develop and capture images using ChemiScope 6100.

Quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR)
Firstly, the sample RNA from mouse skin tissue or human melanocytes was obtained in accordance with the manufacturer’s instructions of the total RNA extraction kit. According to the operation instructions of the reverse transcription kit, the PCR instrument parameters were set as 25°C for 10 min, 42°C for 15 min, and 85°C for 5 min to obtain cDNA samples. Similarly, the parameters for setting up the PCR instrument were as follows to obtain sufficient DNA copy numbers: Pre-denaturation: 95°C for 5 min, 1 cycle; Denaturation: 95°C for 10 s, 40 cycles; Annealing and extension: 60°C for 30 s, 40 cycles. ‌The normalized expression of the gene of interest is calculated using the following formula: 2‑ΔΔCq (ΔΔCq = Cqtarget‑Cqβ‑Actin)46,47. The information on the gene primer sequences for qRT-PCR is shown in Table 1.

ChIP-PCR analysis
ChIP-PCR analysis was carried out in accordance with the previous protocol48. First, the cells were cross-linked with 1% formaldehyde for 10 min, and glycine solution was added to terminate the cross-linking reaction. After washing with pre-cooled PBS containing PMSF, the cells were lysed with SDS lysis buffer containing PMSF. Subsequently, the chromatin DNA was sheared into fragments mainly ranging from 200 to 1,000 bp using an ultrasonic cell disruptor, and the fragment size was verified by agarose gel electrophoresis. The sheared chromatin samples were resuspended in ChIP dilution buffer containing PMSF, and 20µL of the sample was taken as the input control group. The remaining samples were pre-treated with Protein A+G Agarose/Salmon Sperm DNA. Then, 0.5µg of primary antibody was applied, followed by an overnight incubation at 4°C with slow shaking. The negative control group was treated with an equal amount of rabbit IgG. The next day, Protein A+G agarose beads were added to capture the antigen-antibody complexes, and the complexes were washed successively with low salt immune complex wash buffer, high salt immune complex wash buffer, LiCl immune complex wash buffer, and TE buffer. The immunoprecipitated complexes were eluted with elution buffer, and both the elution products and the samples in the input control group underwent a heat treatment of 65°C for 4h to break the cross-links. Subsequent to proteinase K-mediated protein digestion, DNA was isolated via phenol-chloroform extraction followed by ethanol precipitation. The purified DNA was dissolved in TE buffer and used for subsequent qRT-PCR analysis. And the gene sequence information for ChIP-PCR is shown in Table 2.

The candidate genomic sites for ChIP-PCR were selected through in silico prediction using the JASPAR database (https://jaspar.elixir.no/). Specifically, researchers retrieved the promoter sequences spanning 2000 bp upstream of the TSS of the CAT, SOD, and GPX4 genes. These sequences were scanned for FOXO3a binding motifs using the corresponding position weight matrix. To balance sensitivity and specificity, the authors set a relative profile score threshold of >80%. Among all predicted motifs meeting this criterion, the authors selected the top two highest-scoring putative sites for each gene as candidate regions for ChIP-PCR validation. For example, in the CAT gene, the selected sites were located at -733 bp and -1259 bp relative to the TSS. The anti-FOXO3a antibody used in this study is a commercially available ChIP-grade antibody. To ensure specificity, the authors applied two independent negative controls for every ChIP-PCR assay: isotype IgG and a negative genomic locus. The isotype IgG control was performed as parallel immunoprecipitations using non-immune IgG from the same species. For the negative genomic locus, the authors designed a specific primer pair targeting a non-binding region that lacks any predicted FOXO3a consensus motif. This control region allowed the authors to exclude enrichment due to random chromatin shearing or nonspecific PCR amplification. The fold enrichment was calculated using a three-step normalization strategy.

Step 1: Input normalized ΔCt, ΔCt [normalized IP] = Ct[IP]-(Ct[Input]-log₂(DF))    (1)

ΔCt [normalized IgG] = Ct[IgG] - (Ct[Input] - log₂(DF)).     (2)

DF = Input Dilution Factor; in the experiment, DF = 10, as they used 10% input.

Step 2: ΔΔCt between IP and IgG:

ΔΔCt [IP/IgG] =ΔCt [normalized IP]-ΔCt [normalized IgG]      (3)

Step 3: Fold enrichment = 2(-ΔΔCt [IP/IgG]).       (4)

Statistical analysis
Data are expressed as mean ± standard deviation based on a minimum of three independent experiments. Statistical analyses were performed using GraphPad Prism software (version 6.0). Comparison of data among multiple groups following a normal distribution and homogeneity of variance was assessed using one-way analysis of variance (ANOVA), followed by Tukey’s post-test. Statistical significance was established at p < 0.05.

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Ergebnisse

AMG weist bei normalen C3H/HeJ-Mäusen keine hepatorenale Toxizität auf
Um die potenzielle Leber- und Nierentoxizität von AMG aus experimenteller Sicht eindeutig zu identifizieren, verabreichten Forscher die zuvor in normalen C3H/HeJ-Mäusen untersuchten drei Dosen (60, 90 und 120 mg/kg) mittels Magensonde 38. Wie in Abbildung 1 dargestellt, war nach 21-tägiger intragastraler Verabreichung von AMG in drei Dosen die Architektur der Leberläppchen deutlich erkennbar, wobei ...

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Diskussion

AMG selbst weist keine direkte Toxizität auf. Es wird durch intestinale mikrobielle Enzyme oder Magensäure hydrolysiert, wodurch hochgiftiges Wasserstoffcyanid49 gebildet und freigesetzt wird. Anschließend wird Wasserstoffcyanid rasch über den Verdauungstrakt in den Blutkreislauf aufgenommen und im gesamten Körpergewebe verteilt, wodurch eine Hypoxie in den Geweben des Nervensystems, des Herz-Kreislauf-Systems und des Atmungssystems verursacht wird50. Hinsichtlich des Wirkm...

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Offenlegungen

The authors have no conflicts of interest to declare.

AUTHORS’ CONTRIBUTION:
Xun He: Investigation, Methodology, Writing – original draft. Jingsong Liu, Jiawei Wang, and Zhe Dai: Data curation. Yugang Gong, Wei Lu, and Xiaowei Sha: Software, Visualization, and Validation. Xun He: Conceptualization, Writing – Review & Editing, Funding acquisition, and Supervision.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde von dem Gesundheitsausschuss für Kadermitglieder der Provinz Sichuan (2024-221) unterstützt.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
5×All-In-One-MasterMix (mit AccuRT genomischem DNA-Entfernungs-Kit)Applied Biological Materials Inc., Jiangsu, ChinaG492
β-Actin-AntikörperAffinity Biosciences Co., Ltd., Wuhan, ChinaAF7018
AmygdalinChengdu Herbpurify Co., Ltd., Chengdu, ChinaK-001-181216
Katalase-AntikörperProteintech, Wuhan, China66765-1-Ig
Katalase-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-BC-K031-M
C3H/HeJ-MäuseChengdu Yaokang Biotechnology Co., Ltd., Chengdu, ChinaN000190
ChIP-Assay-KitBeyotime Biotechnology, Shanghai, ChinaP2078
254 KulturmediumGibco, Thermo Fisher Scientific, AmericaM-254-500
DAPI-FärbereagenzServicebio, Wuhan, ChinaG1012
Dispase IIShanghai Yuanye Bio-Technology Co., Ltd., Shanghai, ChinaS25046
EvaGreen Express 2×qPCR MasterMix – ohne FarbstoffApplied Biological Materials Inc., Jiangsu, ChinaMasterMix-ES
Schnell-Schwarz HBSangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, ChinaA602008-0025
Fötales RinderserumEvery Green13011-8611
FluoreszenzmikroskopSOPTOPCX40
FOXO3a-AntikörperProteintech, Wuhan, China10849-1-AP
GefriermikrotomThermoCryotome E
Glutathionperoxidase 4-AntikörperProteintech, Wuhan, China67763-1-Ig
Glutathionperoxidase 4-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-BC-K883-M
Image-pro plus 6.0Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA——
Imiquimod-CremeSichuan Mingxin Pharmaceutical Co. Ltd., Chengdu, ChinaH20030129
Interferon-gamma-AntikörperProteintech, Wuhan, China15365-1-AP
Interferon-gamma-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-EL-H0108 und E-EL-M0048
Interleukin-6-AntikörperProteintech, Wuhan, China21865-1-AP
Interleukin-6-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-EL-H6156 und E-EL-M0044
Interleukin-15-AntikörperAffinity Biosciences Ltd., Wuhan, ChinaDF2521
Interleukin-15-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-EL-H0222 und E-EL-M0728 
Malondialdehyd-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-EL-0060
MHC-AntikörperAffinity Biosciences Ltd., Wuhan, ChinaDF8558
Optisches MikroskopZEISSPrimo Star
ParaffinschneiderThermo scientificHM325
Pathologische Scansoftware3DHISTECH (Ungarn)Slide Viewer 2.5.0
Penicillin-Synthroid-LösungBiosharp, Beijing, ChinaBL505A
Kaninchen-IgG Beyotime Biotechnology, Shanghai, ChinaA7016
ROS-Assay-KitBeyotime Biotechnology, Shanghai, ChinaS0033M
Superoxiddismutase 1-AntikörperProteintech, Wuhan, China10269-1-AP
Gewebepelletier Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd., Wuhan ChinaJB-P5
GewebetrocknerThermo scientificSTP420 ES
Gesamt-RNA-IsolationskitForegene, Chengdu, ChinaRE-03014
Gesamt-Superoxiddismutase-KitElabscience, Wuhan, ChinaE-BC-K020-M
Weißes VaselineShanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Shanghai, ChinaP434227

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