Soxhlet-Extraktion von Lipid-Biomarkern aus Sediment

1. Setup und Vorbereitung der Materialien

1. Sammeln Sie eine Probe des gefrorenen, gefriergetrocknete, zerkleinert und homogenisiert Meeresablagerungen. Eine Probe davon enthält viele der Verbindungen für Standards erforderlich.
   1. Normen bestehen oft aus Sedimenten, die nach einem coring Expedition oder Analyse übrig sind. Zum Beispiel wird in diesem Experiment, Sediment, das aus dem "Schlamm-Pflaster" liegt südlich von Cape Cod abgerufen wurde extrahiert. Dieses Sediment wurde als Teil einer coring Expedition genommen aber wird nicht verwendet werden, um wissenschaftliche Fragen zu beantworten. Wir können es daher, um einen Standard zu machen.
   2. Legen Sie ein ~ 100 g Stück des Sediments in der Tiefkühltruhe über Nacht, so dass es durch friert.
   3. Sobald das Sediment vollständig gefroren ist, schalten Sie das Einfrieren Trockner (erhältlich von vielen wissenschaftlichen Geräten Einzelhändler wie Fisher) und warten Sie, bis der Kondensator Sollwert erreicht (oft ~-30 ° C).
   4. Laden Sie die Sedimentprobe in den Gefriertrockner und schließen Sie die Säuberung zu beginnen, zieht ein Vakuum auf die Probe.
   5. Je nach der Menge des Wassers im Sediment, und die Größe der Stichprobe dauert es mehrere Tage Probe zu trocknen.
   6. Sobald die Probe trocken ist, schalten Sie den Trockner, Einfrieren-Vent es, und entfernen Sie die Probe.
   7. Legen Sie die Probe in einem Lösungsmittel gespült Mörser mahlen zu einem Pulver mit einem Stößel. Tun Sie dies auf die gesamte Stichprobe und Shop in einem Glas in der Tiefkühltruhe bis bereit zu extrahieren.
2. Abhängig von der Größe der Probe mit einem Volumen von 4-60 mL Fläschchen verwendet werden. Verwenden Sie für dieses Experiment Borosilikat Glasvials (40 mL) und Lösungsmittel sicher Kappen. Verbrennen die Vials, Borosilikatglas Pipetten und mit einem Gewicht von Dosen bei 550 ° C 6 h vor dem Entfernen der möglichen organischen Verunreinigungen zu gewährleisten.
3. Zu erhalten, Dichlormethan und Methanol (beide sind gemeinsam in den meisten organischen Geochemie Laboratorien), dann benutzen sie individuell Lab Tools und Glaswaren vor Gebrauch abspülen. Eine Mischung von Dichlormethan (DCM) in Methanol (MeOH; 9:1) ist in vielen Labors verwendet, um effizient Biomarker mit einer breiten Palette von Polaritäten zu extrahieren. Lösungsmittel sollte frei von organischen Verunreinigungen sein.
4. Erwerben einer Soxhlet-Apparatur zu verwenden in diesem Experiment (diese können von Fisher Scientific oder Wissenschaft Einzelhändler gekauft werden), dann waschen und verbrennen es bei 550 ° C für 6 h vor der Verwendung.
5. Glas-Faser-Fingerhüte (kann von Whatman erworben werden) und verbrennen erhalten Sie bei 550 ° C für 6 h vor der Verwendung.

2. Vorbereitung der Probe

1. Legen Sie ein mit einem Gewicht von Zinn auf den Labormaßstab und dann Tara verbrannt.
2. Spülen Sie die Labor-Spachtel mit Lösungsmittel, dann verwenden Sie, um eine entsprechende Masse der Probe in das mit einem Gewicht von Zinn zu übertragen, und zeichnen Sie die Masse.
   1. Die Masse der Probe variiert je nach seinen Gehalt an organischer Substanz. Schlanke Material relativ organischer Substanz (marine Schlamm) erfordern mehrere Gramm, während organische Substanz Reiches Material (Blattgewebe) viel weniger erfordern.
3. Übertragen Sie das gesamte Material in der Waage Dose in einen verbrannt Glasfaser Fingerhut.

3. Gewinnung

1. ~ 400 mL der DCM:MeOH (9:1) Mischung in die Runde-die Talsohle Kolben übertragen (Kolben mehr als halb voll sein sollte) und legte in der Heizungstechnik Mantel. Fügen Sie mehrere (5-10) Lösungsmittel gespült kochendem Chips.
2. Legen Sie die Probe Fingerhut, Open-End, in das Herzstück der Soxhlet-Apparat.
3. Legen Sie das Herzstück auf der Runde Talsohle Kolben und sichern mit einer Glas-Klammer.
4. Installieren Sie den Kondensator auf das Herzstück-die Soxhlet und sichern Sie mit einer Klammer Glaswaren.
5. Anhängen eines kalten Wasserleitungen aus dem Kondensator an die Kaltwasserleitung in die Haube mit einer Schlauchklemme. Verlegen Sie den anderen in den Abfluss.
6. Schalten Sie das Wasser um richtige Zirkulation und Entwässerung zu gewährleisten.
7. Schalten Sie den Heizpilz und stellen Sie die Temperatur, bis das Lösungsmittel in die Runde-die Talsohle Kolben leicht kocht.
8. Überwachen Sie die Extraktion ein paar Mal im Laufe der nächsten Stunde.
   1. Überprüfen Sie, ob die Temperatur ist richtig eingestellt, um ein Sieden, das Lösungsmittel wird im Kondensator kondensiert und tropft in das Herzstück, das Herzstück ist, befüllen und entleeren richtig und das Wasser ist richtig in die Haube Abfluss entleeren.
9. Überwachen Sie die Extraktion über die nächsten 36 h.
   1. Sorgen für die Temperatur ist richtig eingestellt, um ein Sieden, das Lösungsmittel wird im Kondensator kondensiert und tropft in das Herzstück, das Mittelstück füllt und ordnungsgemäß entleeren, das Wasser ist richtig in die Haube Abfluss entleeren und das Lösungsmittel in die Runde-die Talsohle Kolben ist noch ca. halb voll.
10. Stoppen Sie nach 36 h die Extraktion durch das Ausschalten der Heizpilz.
11. Beschriften Sie die Flasche "TLE".