Entfernung von verzweigten und zyklischen Verbindungen durch Harnstoff-Adduktion für die U^k'₃₇-Paläothermometrie

1. Setup und Vorbereitung der Materialien

1. Erhalten Sie eine totale Lipid Extrakt (TLE) Lösemittelextraktion Verfahren (Ultraschall, Soxhlet oder beschleunigte Lösungsmittel Extraktion (ASE)).
2. Die folgenden Materialien bei jedem chemischen Händler erwerben: verbrannt Borosilikat Glas, Pipetten und Birnen; reines Wasser; Hexan; Dichlormethan (DCM); Methanol; Harnstoff.
   1. Die Reagenzien sollte rein und frei von Kohlenwasserstoffen. Alternativ kann reines Wasser in einem Labor mit einer Wasseraufbereitungsanlage erfolgen.
3. Erhalten Sie Borosilikatglas 4 mL Fläschchen mit PTFE-ausgekleidet Kappen.

(2) Methoden

1. Machen Sie eine Mischung von 2:1 DCM:Hexane (V: V).
   1. Mischen Sie in einem Erlenmeyerkolben 200 mL von DCM und 100 mL Hexan.
2. Machen Sie eine Mischung von Harnstoff in Methanol (100 mg/mL).
   1. Ein Erlenmeyerkolben Gießen Sie 300 mL Methanol.
   2. Fügen Sie 300 mg Harnstoff.
   3. Unter Rühren auf eine automatische Platte Rühren der Harnstoff vollständig gelöst ist.
3. Beginnen Sie mit der trockenen Probe in einem 4-mL-Fläschchen.
4. Unterbrechen Sie die Probe in 1,5 mL einer 2:1-Mischung aus DCM:Hexane (V: V).
   1. Wenn die Probe nicht vollständig löst, für 5 min beschallen.
5. Diese Mischung fügen Sie 1,5 mL von Harnstoff in Methanol hinzu.
   1. Achten Sie nach dieser Zusatz auf einen weißen Niederschlag zu bilden. Dies signalisiert die Schaffung von Harnstoff Kristalle.
6. Trocknen Sie schonend die Kristalle unter Stickstoff, mit sanfter Wärme. Stellen Sie sicher, alle Lösungsmittel verdunstet ist, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren.
7. Spülen Sie die Kristalle 3 X mit ca. 1 mL Hexan. Entfernen Sie das Hexan zwischen jedem Spülen mit einer Glaspipette übertragen in ein Fläschchen mit der Bezeichnung "nicht-Addukt."
8. Lösen sich die Kristalle in 2 mL reines Wasser. Schütteln Sie, um vollständige Auflösung zu gewährleisten.
9. Extrahieren die wässrige Phase mit Hexan durch Hinzufügen von 1 mL und sanft schütteln für 5 s.
10. Ermöglichen Sie das Hexan und Wasser, völlig getrennt vor dem Entfernen von etwa 75 % der das Hexan mit einer Glaspipette und übertragen sie in ein Fläschchen mit der Aufschrift "Addukt."
11. Wiederholen Sie Schritt 2.10 zweimal.
12. Die Wasser und Harnstoff Lösung in einen geeigneten Abfallbehälter entsorgen.