Kapillarelektrophorese (CE)

(1) CE Instrumentierung Setup

1. Das CE-Gerät und den Computer einschalten. Computersoftware, schalten Sie die Lichtquelle für UV-Analyse, zum Aufwärmen zu können. Einige Software hat einen Indikator, wenn die Lampe betriebsbereit ist (Lampe-Symbol dreht sich Farbe).
2. Machen Sie eine Methoden-Datei. Legen Sie die wichtigen Parameter für die Ausführung der CE. In dieser Analyse sind die Temperaturen der Patrone und Sample Speicherung 35 ° C. Die Wellenlänge für UV-Detektion ist 214 nm.
3. Schreiben Sie ein Zeitprogramm. Das Programm besteht im Allgemeinen aus Spülen Schritte (zum Reinigen der Kapillare vor der Analyse), Injektion Schritte, und dann ein Elektrophorese-Schritt. Führen Sie für den Spülgang Schritt 2 Spülungen 1 min. mit 20 Psi Druck. Die erste Spülung ist mit NaOH, die hilft, sicherzustellen, dass die Silanol-Gruppen an der Kapillare Wand deprotonierten sind. Die zweite Spülung ist mit laufen Puffer (0,025 M Borat Puffer hier) um sicherzustellen, dass die Kapillare links mit Puffer equilibriert ist.
4. Für die Injektion dient Druck Injektion bei 0,5 Bar für 5 s.
5. Die Bedingungen sind für den Schritt Elektrophorese Trennung Spannung: 20 kV, Zeit: 5 min, normale Polarität. Für jeden Schritt auch geben Sie an, welche Vial ist der Einlass und die Fläschchen der Steckdose ist. Speichern Sie die Methoden-Datei, nachdem alle Parameter eingegeben werden.

2. Vorbereitung der Standards und Soda Proben

1. 500 ppm Stammlösungen von Aspartam, Koffein und Benzoesäure im Wasser zu machen. 50 mL, mit einem volumetrischen Kolben zu machen.
2. Machen Sie eine standard-Lösung von 150 ppm Aspartam, 150 ppm Koffein und 100 ppm Benzoesäure in einem volumetrischen 10-mL-Kolben.
3. Machen Sie standard Koffein Lösungen von 50 ppm, 100 ppm und 150 ppm 200 ppm in eine volumetrische 10-mL-Fläschchen.

3. führen Sie die Proben auf die CE

1. Legen Sie die Fläschchen mit Normen oder Soda Proben in den Probe-Fläschchen-Halter. Achten Sie darauf, notieren Sie sich die Probe im Steckplatz befindet. Zwei Schlitze haben die Borat Puffer und der 0,1 M NaOH Spüllösung laufen.
2. In der Datei Methode ist Eingang, der die ersten Probenfläschchen slot.
3. Einen einzigen Lauf, und achten Sie auf die Eingabe der Dateninformationen das Programm erwerben Anfragen.
4. Weiterhin Daten, ändern der Eingabe Fläschchen für jede Probe zu erwerben. Führen Sie die Kombination Standard, 3 Konzentrationen von Koffein und eine Pepsi und Diät-Pepsi Probe.
5. Legen Sie das Ziel in das Instrument und wählen Sie das geeignete Instrument.
6. Analysieren Sie die Daten auf dem Computer. Berechnung der Peakflächen und Overlay-Standards und realen Proben, um Spitzen zu identifizieren. Machen Sie eine Eichkurve für die Koffein-Daten.