What are the advantages of facial and submandibular vein blood collection in mice?

Facial and submandibular vein collection methods do not require anesthesia, making them suitable when anesthetics may confound blood results or other data. These less invasive procedures are methods-of-choice for studies where anesthetic interference is a concern. Both techniques allow researchers to collect blood while minimizing experimental variables.

How do you properly restrain a mouse for facial vein blood collection?

Use the scruffing technique to restrain the animal, minimizing side-to-side head movement for accurate venipuncture. Avoid gripping too tightly, as excessive pressure restricts blood flow and reduces collection volume. Proper restraint ensures safe and efficient blood collection from the facial vein running across the cheek.

What is the correct needle insertion depth for submandibular vein puncture?

Do not insert the needle beyond the bevel tip, as deeper insertion may cause trauma to muscles, nerves, and other vessels in the head, neck, and oral cavity. Proper depth control prevents complications while allowing successful blood collection from the submandibular vein.

How does the saphenous vein collection method differ from femoral vein collection?

Saphenous vein collection yields 10-150 microliters and may contain tissue products, with variable sample quality. Femoral vein collection produces larger volumes more easily and requires two people for conscious animals. Femoral vein puncture should occur near the knee to allow future anterior sampling, whereas saphenous sampling is limited to four samples per leg in 24 hours.

What equipment is needed for saphenous vein blood collection?

Required equipment includes a restraining device, tourniquet made from a syringe and suture, triple antibiotic ointment, hair clipper, 22-gauge needle, and hematocrit tube. The tourniquet is applied cranially to engorge the saphenous vessel, making it visible and accessible for safe venipuncture and blood collection.

Why is positioning the animal's head lower than the heart important during blood collection?

Positioning the head lower than the heart assists blood flow by using gravity to facilitate collection. This positioning helps ensure adequate blood volume is obtained and reduces collection time. After collection, apply pressure to the puncture site to achieve hemostasis and prevent excessive blood loss.

How frequently can the same facial vein site be used for serial blood collection?

Serial samples can be taken by alternating sides of the face, with neither side used more often than every 5-7 days. This interval allows the puncture site to heal and prevents tissue damage. Researchers must also adhere to maximum survival blood collection volumes outlined in Blood Withdrawal I guidelines.

Blutentnahme II

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(1) Vena facialis bluten bei Mäusen

Ausrüstung
1. Ansammlung von Blut ist aus einen freien Haken in ein Röhrchen Blut oder eine Eppendorf Tube. In einigen Fällen ist es wünschenswert, das Blut direkt in Hämatokrit Röhren zu sammeln.
2. Goldrute Lanzetten werden basierend auf die passende Größe für das Tier je nach Alter und Geschlecht ausgewählt werden.
  1. Lanzetten sind je nach Alter/Größe von Mäusen wie folgt ausgewählt:
    4mm Lancet: 3-4-Wochen alten Mäusen (unter 15 Gramm Körpergewicht)
    5mm Lancet: weibliche Mäuse unter 10 Wochen (unter ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    5mm Lancet: männliche Mäuse jünger als 6 Wochen (unter ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    5mm Lancet: für Single-Drop Proben (für Blut Abstriche)
    5,5 mm Lancet: weibliche Mäuse über 10 Wochen (mehr als ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    5,5 mm Lancet: männliche Mäuse mehr als 6 Wochen (mehr als ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    5,5 mm Lancet: große Proben
Zurückhaltung
1. Mäuse sind zurückhaltend mit der scruffen Technik.
2. Es ist wichtig, dass-seitliche Bewegung des Kopfes minimiert werden. Dies sorgt für präzise und sichere Venenpunktion mit der Lanzette.
Blutentnahme
1. Die richtige Größe-Lanzette ist senkrecht zur Oberfläche der Haut statt.
2. Die Lanzette Punkt ist leicht angewinkelt, mit der Spitze in Richtung der Nasenerkers.
3. Die Lanzette Klinge eignet sich besonders in einer senkrechten Position.
4. Während der Ruhigstellung der Maus, suchen Sie die ungefähre Fläche von der Vena facialis durch die Messung der Länge des Auges unterhalb der seitlichen Augenwinkel und die Breite des Auges kaudal.
5. Fühlen Sie mit der Spitze der Lanzette vorsichtig für den Punkt, an dem der Kieferknochen endet.
6. Positionieren Sie für bessere Genauigkeit bei der Punktion des Schiffes den Mauszeiger im seitlichen liegen.
7. Durchstechen der Haut an der Schulter der Lanzette an diesem Punkt. Dies geschieht mit einem festen Stoß und nicht als einen Dart zu werfen.
8. Nach dem Entfernen der Lanzette wird Blut zu fließen beginnen.
9. Um die Durchblutung zu unterstützen, positionieren Sie den Mauszeiger mit dem Kopf tiefer als das Herz.
10. Sammeln Sie das Blut in die gewünschten Sammelbehälter.
11. Tupfen Sie die Punktion Website und Release Druck auf das Genick zur Blutstillung.

Abbildung 1. Vena facialis bluten bei Mäusen.

(2) mandibulären bluten bei Mäusen: Obwohl sehr ähnlich, die Technik für die Vena facialis bluten, gibt es Unterschiede in Ausstattung und feinen Unterschiede in diesem blutende Verfahren.

Ausrüstung
1. Sammlung des Blutes ist von einen freien Haken in ein Röhrchen Blut oder eine Eppendorf Tube. In einigen Fällen ist es wünschenswert, die direkt in Hämatokrit Röhren sammeln.
2. 18-22-g-Nadeln werden anhand der entsprechenden Größe für das Tier je nach Alter und Geschlecht ausgewählt.
  1. Nadeln sind nach Alter/Größe der Mäuse wie folgt ausgewählt:
    22 Gauge: 3-4 Wochen alten Mäusen (unter 15 Gramm Körpergewicht)
    20 Gauge: weibliche Mäuse unter 10 Wochen (unter ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    20 Gauge: männliche Mäuse jünger als 6 Wochen (unter ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    20 Gauge: für Single-Drop Proben (für Blut Abstriche)
    18-Gauge: weibliche Mäuse über 10 Wochen (mehr als ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    18-Gauge: männliche Mäuse mehr als 6 Wochen (mehr als ~ 20 Gramm Körpergewicht)
    18-Gauge: große Proben
Zurückhaltung
1. Mäuse sind zurückhaltend mit der scruffen Technik.
2. Es ist wichtig, dass-seitliche Bewegung des Kopfes minimiert werden. Dies sorgt für präzise und sichere Venenpunktion mit der Nadel.
Blutentnahme
1. Die Nadel wird senkrecht zur Oberfläche der Haut gehalten.
2. Während der Ruhigstellung der Maus, suchen Sie die ungefähre Fläche der mandibulären Ader durch den Schnittpunkt eine Zeile aus dem Mundwinkel eine Zeile aus der seitlichen Augenwinkel des Auges. Dies deckt sich mit eine kleine, haarlose Grübchen kaudalen in die Ecke des Mundes und leicht unter der Kiefer-Linie zu finden.
3. Positionieren Sie für bessere Genauigkeit bei der Punktion des Schiffes den Mauszeiger im seitlichen liegen.
4. An dieser Stelle stechen Sie die Haut mit der Spitze der Nadel. Dies geschieht mit einem festen Stoß und nicht als einen Dart zu werfen.
5. Die Nadel wird nicht über die Spitze der Abschrägung eingefügt.
6. Nach dem Entfernen der Nadel wird Blut zu fließen beginnen.
7. Um die Durchblutung zu unterstützen, positionieren Sie den Mauszeiger mit dem Kopf tiefer als das Herz.
8. Sammeln Sie das Blut in die gewünschten Sammelbehälter.
9. Tupfen Sie die Einstichstelle, und Druck auf das Genick zur Blutstillung.

Abbildung 2. Mandibulären Ader bluten bei Mäusen.

3. Saphenous bluten

Ausrüstung
1. Kunststoff transparent, flexible Zurückhaltung Zapfen können entweder die Maus oder Ratte verwendet werden. Für Mäuse können modifizierte 50 ml konische Kunststoffrohre zur Zurückhaltung verwendet werden. Für Ratten, modifiziert Plexiglasröhren Zurückhaltung-mit einem Schlitz breit genug, um die hinteren Bein-Dose verlängern verwendet werden.
2. Bei der Verwendung von Kunststoff Kegel ist es gemessen an der Körperlänge des Tieres, und ein ovales Loch geschnitten auf der Ebene des Oberschenkels.
3. Eine konische Rohr kann durch das Abschneiden am Ende des Rohres ermöglichen eine Atmung Loch für eine Maus für dieses Blut Erfassungsmethode geändert werden. Ein Slot ist vom Cap Ende des Rohres über ½ Zoll breit und 2 Zoll lang geschnitten. Die Kanten sind in Tuch Band bedeckt oder geglättet für Tiergesundheit.
4. Eine Blutsperre ist mit einer 3 cc Spritze und einer Länge von 2-0 nonabsorbable Naht hergestellt. ³
5. Dreifache antibiotische Salbe oder weiße Vaseline dient als feuchtigkeitsbeständig Barriere auf der Haut.
6. Eine 22 Gauge-Nadel ist die bevorzugte Größe für die Blutentnahme.
7. Blut wird direkt in Hämatokrit Rohre gesammelt.
Zurückhaltung
1. Flexible Kunststoff-Zapfen
  1. Die Maus oder Ratte wird Nase voran in den Trichter gelegt.
  2. Ende des Kegels wird gefaltet und mit einem kleinen Bindemittel Clip um zu verhindern, dass das Tier verlassen die Zurückhaltung Kegel geschlossen.
  3. Das Hinterbein wird sanft durch die ovale Öffnung in die Leistengegend gezogen.
2. Konische Rohr für Mäuse
  1. Die Maus befindet sich in der Röhre Nase voran.
  2. Das Hinterbein wird vorsichtig in den Steckplatz geführt.
  3. Der Mittelfinger wird über das Ende des Rohres zu verhindern, dass die Maus verlassen das Rohr gelegt.
  4. Dem Zeigefinger und dem Daumen stabilisieren die Maus Bein.
3. Plexiglas-Zurückhaltung-Rohr für Ratten
  1. Die Ratte ist in der Röhre Nase voran platziert.
  2. Das Hinterbein wird vorsichtig in den Steckplatz geführt.
  3. Das Ende der Röhre ist gesichert, um zu verhindern, dass die Ratte aus sichern und verlassen das Rohr.
  4. Dem Zeigefinger und dem Daumen stabilisieren die Ratte Bein.
Blutentnahme
1. Das Haar wird von der lateralen Seite des Beines vom Sprunggelenk, das Knie entfernt. Dies kann durch Zupfen, Rasieren oder einer Enthaarungscreme verwenden.
2. Sobald das Haar entfernt wurde, wird eine kleine Menge der Salbe aufgetragen und in einer sehr dünnen Schicht auf die haarlose Fläche verteilt.
3. Der Druckverband wird als weit cranially wie möglich und verschärfte angewendet.
4. Das saphena Schiff quer über die äußere Oberfläche des Beines vom Knie bis zum Knöchel beginnt zu füllen und werden angehoben und einfach zu visualisieren.
5. Die Nadel ist senkrecht zur Oberfläche der Haut direkt über das Blutgefäß statt. Punktion des Schiffes. Achten Sie darauf, dass Sie nicht die Nadel tief in das Bein zu vermeiden Punktierung des Muskels oder Knochen schlagen eingesetzt.
6. Das Blut wird sich auf der Oberfläche des Beines zur Abholung mit dem Hämatokrit Rohr Wulst.
7. Sobald das Blut gesammelt hat, lösen Sie die Blutsperre und Druck über die Punktion zur Blutstillung.
8. Sobald die Blutung aufgehört hat, entfernen Sie das Tier aus der Zurückhaltung und dem Hause Käfig zurück.

Abbildung 3. Stammvenen bluten bei Mäusen.

4. Femoral Ader für Ratten

Ausrüstung
1. Blut wird in einem Hämatokrit Rohr gesammelt.
2. Dreifach antibiotische Salbe ist erforderlich, um eine Barriere zwischen der Haut/Haar und das Blut Droplet erstellen.
3. Eine 22 Gauge-Nadel wird verwendet, um die Vene punktieren.
4. Ein kleines, tragbares Haarschneider mit ungefähr 1" breite Klinge wird verwendet, um das Haar aus dem Bein zu befestigen.
Zurückhaltung
1. Ratten sind zurückhaltend mit einer klaren, flexiblen Kunststoff Zurückhaltung Kegel.
2. Die Kunststoff Kegel werden an der Körperlänge und ein ovales Loch schneiden auf der Ebene des Oberschenkels gemessen. Der Kegel wird geschnitten, so dass das Hinterbein mit Zugriff auf die Vene verwirklicht werden kann.
Blutentnahme
1. Das Haar ist von der Innenfläche des Beines von der Leiste bis zum Knie rasiert.
2. Dreifach antibiotische Salbe ist in einer dünnen Schicht auf die Einstichstelle aufgetragen.
3. Die Zurückhaltung Person freien dahinterliegende haben die Vene und hält die Ratte mit der Innenfläche des Beines mit Blick auf die Phlebotomist.
4. Benutzen Sie die Nadel in die Vene punktieren. Die Nadel wird senkrecht gehalten, um die Blutgefäße und die Punktion erfolgt direkt über die Vene.
5. Die Punktion erfolgt wie in der Nähe des Knies wie möglich, für zusätzliche Probenahme anterior das erste Blut-Sammelstelle.
6. Das Schiff ist oberflächlich. Die Tiefe der Punktion sollte daher nicht tiefer als die Länge der Schräge der Nadel.
7. Um die Durchblutung zu unterstützen, positionieren Sie die Ratte mit dem Bein niedriger als das Herz.
8. Das Blut in den Hämatokrit-Röhren zu sammeln, wie es auf der Hautoberfläche Perlen.
9. Druck auf das Bein und üben Druck auf die Punktionsstelle zur Blutstillung zu erreichen.