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Quelle: Kay Stewart, RVT, RLATG, Anus; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN
Viele Tierversuche Vertrauen auf letzte Zeit Datenannahmestellen, die von der Ernte und Erprobung von Organen und Geweben gesammelt werden. Die Qualität der Proben und die Analyse der Daten, die für die Prüfung der Gewebe entnommen werden, kann die Verwendung von geeigneten Methoden für die Sammlung von Organen und Geweben auswirken. Die Methode der Euthanasie des Tieres kann auch Auswirkungen auf die Qualität der Proben. Dieses Manuskript wird richtige Autopsie Techniken für Ratten darlegen.
1. externe Prüfung
Eine grobe externe Prüfung des Körpers, die visuelle Inspektion des Körpers für Läsionen und Massen umfasst, sollte als erster Schritt in eine Autopsie durchgeführt werden. Das Fell sollte für Bereiche von Haarausfall untersucht werden. Die Zähne und die Nägel werden auf übermäßiges Wachstum oder Verschleiß ausgewertet. Verfärbung des Fells am Mund, Nasenlöcher, Augen, anal, und genitale Öffnungen sollte beachtet werden. Tests mit Klebeband, Kratzen der Haut und Fell Prüfungen durchgeführt werden, um externe Parasiten zu erkennen (siehe die folgenden Verfahren).
2. interne grobe Untersuchung des Bauchraums
(3) der Bauchorgane
4. die Brusthöhle
(5) Kopf
Autopsie-das heißt Postmortem Untersuchung der Organe- und Gewebe-Ernte sind integrale Bestandteile vieler Labor Experimente, die verlassen sich auf die letzte Datenerhebung Zeitpunkten gesammelt aus den Analysen der geernteten Organe. Daher ist es wichtig, die richtige Diagnose Sektions- und Erntetechnik, Gewebe zu lernen, wie das Verfahren erheblich die Qualität der gesammelten Proben auswirken kann. Diese Präsentation wird die Methode der Dissektion und Gewinnung von Bauch-, reproduktive und thorakalen Organe von Labortieren überprüfen.
Bevor Sie mit der Prozedur sollte eine Form eingeleitet werden, die eine komplette Geschichte des Tieres enthält: Tierkennzeichnung Zahl, Geschlecht, Gehäuse, Bedingungen, Geburtsdatum, Datum des Todes, Studie/Protokoll-Nummer und der Name des Prinzips Ermittler.
Als nächstes bereiten Sie die Dissektion Bereich. Legen Sie eine Sitzbank-Verkleidung, Dissektion Tablett, Instrumente für die Autopsie, die Schere, Pinzette, sterilen Skalpellklinge, Knochen Messer, stumpfe Sonde, kleinen Spatel und nicht resorbierbarem Nahtmaterial enthält. Organ- und Ernte für histologische Untersuchung erfordern, dass das Gewebe in einem Fixativ Lösung aufbewahrt werden. Sofern nicht anders angegeben, ist die am häufigsten verwendeten Fixativ 10 % neutral gepuffertem Formalin. Beachten Sie, dass die Gewebeproben sollte 0,5-1 cm dicke, die Fixativ Lösung ausreichend eindringen. Fixierung verhindert Fäulnis, Autolyse und Fäulnis; stoppt alle ablaufenden biochemischen Reaktionen; und erhöht die mechanische Festigkeit und Stabilität des behandelten Gewebes.
Die Methode der Euthanasie des Tieres kann auch Auswirkungen auf die Qualität der Proben. Die am häufigsten verwendeten Euthanasie-Methode für Mäuse und Ratten ist eine Überdosierung von Kohlendioxid-Gas. Die Tiere bleiben in ihrer Heimat-Käfig, der in eine Kammer gelegt wird und CO2 wird schrittweise in die Kammer mit einer Verschiebung-Rate von 10-30 % von der Kammer Volumen/min eingeführt. Dies bewirkt, dass die Tiere Bewusstsein vor der Wahrnehmung von Schmerz zu verlieren, das Nociceptor Aktivierung durch Kohlensäure zugeordnet ist. Der Fluss ist dann in der Kammer aufrechterhalten, bis Atemstillstand eingetreten ist und das Tier tot ist.
Nach Euthanasie zunächst durchführen Sie eine erste externe Prüfung durch visuelle Inspektion der Karkasse Läsionen und Massen, übermäßige Zahn Wachstum oder jede Färbung des Fells am Mund, Nasenlöcher, Ohren, Augen und die analen- und Genitalbereich Öffnungen. Falls berechtigt, einen Band-Test durchführen, Kratzen der Haut und Fell Prüfungen, äußere Parasiten zu erkennen. Sobald die externe Prüfung abgeschlossen ist, ist es Zeit, die Autopsie, beginnend mit der Bauchhöhle zu starten. Vor dem Entfernen jedes Gewebe ist es Proben wichtig, die Orgel in Situzu beobachten.
Um zu beginnen, die Haut besteuert, legen Sie einen kleinen Schnitt nur anterior das Becken bei Frauen und über die Vorhaut bei Männern. Dann, lockern Sie mit Hilfe der stumpfe Dissektion-Technik, die Haut von der Faszie und Muskulatur. Stumpfe Dissektion ist eine Technik in der anatomischen Präparation in welche Gewebe getrennt sind und die zugrunde liegenden Strukturen spanlos ausgesetzt. Bei dieser Technik werden die Schere Gewebe auseinander zu verbreiten, anstatt, sie auseinander zu schneiden verwendet. Die geschlossenen Spitzen sind in Gewebe geschoben und dann geöffnet, um Gewebe entlang natürlicher Ebenen aufgeteilt. Dieser Prozess erfordert Geduld und Fingerspitzengefühl, da die Dehnung des Gewebes zu Schäden an angrenzenden Organe und Blutgefäße führen kann. Erweitern Sie dann den Schnitt bis zum Kinn. Als nächstes machen Sie, Quere Schnitten anterior der hinteren Gliedmaßen und Posterior, die Vorderbeine und verwenden Sie stumpfe Dissektion, setzen die zervikalen Bereich und Brust.
Bei Frauen mit der Haut exzidiert, beobachten Sie das Milch-Gewebe von der Spitze des Brustbeins an das Manubrium der Geschlechtsöffnung auf der ventralen Oberfläche; erweitern seitlich auf beiden Seiten. Schwangere oder stillende Frauen erhöht haben Mamma Gewebevolumens und Milch vorhanden sein. Verbrauchsteuern die Milchdrüsen, Rande Gewebe mit der Zange fassen und stumpfe Dissektion, um Anhänge auf der Haut zu lösen. Sobald die Drüse getrennt hat, kann es in einem Fixativ Lösung für nachfolgende histologische Analyse platziert werden.
In diesem Stadium beobachten Sie mandibulären Speicheldrüsen, die gepaart sind und am Unterkiefer--entlang den Hals, um das Manubrium Sternum erstreckt. Entfernung dieser Drüsen erfordert stumpfe Dissektion und zusätzliche Pflege bei der Arbeit in der zervikalen Region, Ruptur von Blutgefäßen zu verhindern. Sobald die darunter liegenden Muskeln befreit, heben Sie die Drüsen und trennen Sie alle verbleibenden Anlagen zu. Die Drüsen benötigen mindestens ein Schnitt auf das Fixiermittel eindringen.
Darüber hinaus sehen Sie die Luftröhre, die von der Kehldeckel erstreckt sich auf die Bifurkation der Bronchien. Es ist eine geriffelte, knorpelige Röhre, die flexibel ist. Während normalerweise klar, kann Sterbehilfe mit CO2 Flüssigkeitsansammlung in der Lunge und Luftröhre, die aussieht wie eine schaumige klare Flüssigkeit. Subkutanes Fett werden auch in diesem Bereich. Werten sie für Menge und Ablagerung. Eine übergewichtige Tier möglicherweise eine große Menge an Fett mit der Haut verdickt.
Vor dem Öffnen der Körperhöhle, beobachten Sie die Bauch-, Intercostalneuralgie und exponierten Hals Muskeln und Glieder für Verdickung, Massen oder Verfärbungen. Um die Körperhöhle zu öffnen, stellen Sie zunächst eine kleine quer geschnitten an den kaudalen Punkt der exponierten Bauchmuskel. Dann heben Sie den Muskel Weg von den Organen, und schneiden Sie entlang der Linea Alba , dem Xiphoid. Als nächstes sezieren Sie die Muskeln seitlich von der Mittellinie bis knapp über den hinteren Gliedmaßen auf beiden Seiten. Zu guter Letzt schneiden Sie entlang der Kurve der Rippen auf beiden Seiten. Nach dem Öffnen der Körperhöhle bewerten Sie die Menge und die Ansammlung von Bauchfett. Ein gesundes Tier haben abdominale Fettpolster und etwas Fett entlang der dorsalen Oberfläche in den Hohlraum. Beobachten Sie die Farbe dieses Gewebes zu und notieren Sie alle mögliche Abweichungen.
Jetzt sind wir bereit, die Ernte der Bauchorgane zu beginnen. Zunächst suchen die Milz, die ist dunkelrot und befindet sich entlang der unteren Krümmung des Magens. Es sollte regelmäßig in Form und mit einer leicht matten Oberfläche. Um die Milz zu entfernen, heben Sie das Organ und schnippeln Sie die Anlagen in den Magen.
Der Magen befindet sich am distalen Ende der Speiseröhre. Es scheint zweifarbig, muskulösen und Drüsengewebe Portionen zu unterscheiden sein. Vorhandensein von Nahrung fühlen Sie es. Nüchternen Magen sollte hingewiesen, da es Krankheit hindeuten kann. Tun nicht schneiden den Magen, da der Inhalt der Organe in der Bauchhöhle verunreinigen werden.
Die kleinen Därme sind distal verbunden und schlechter als der Magen. Es gibt drei unterschiedliche Abschnitte des Dünndarms. Zuerst wird der Zwölffingerdarm - eine kürzere Abschnitt aus der hinteren Bauch Schließmuskel zu Jahresbeginn das Jejunum. Der Gallengang tritt hier und die Bauchspeicheldrüse-Gewebe ist stärker an diesen Teil des Dünndarms. Das Jejunum ist der mittlere Teil. Peyer Patches, die kleine ovale Bereiche bestehend aus Lymphgewebe sind, können auf der Oberfläche des Jejunum und Ileum beobachtet werden. Ileum ist der längste Teil des Dünndarms, die bei der Blinddarm - befindet sich an der Kreuzung des dünn- und Dickdarms beendet. Der Blinddarm erscheint grünliche Farbe und ist sehr weich.
Der Dickdarm weiter aus der Blinddarm bis zum Anus. Es ist leicht erkennbar, wie fäkale Pellets in das Lumen dieser Struktur visualisiert werden können. Die kleinen und großen Darm verankert sind für den Körper durch das Mesenterium, einer Membran, enthält Blutgefäße, Fett und Lymphknoten. Dies sollte für vergrößerte Lymphknoten und Massen vor dem Entfernen des Darmtraktes untersucht werden. Die Bauchspeicheldrüse ist eine diffuse Orgel Posterior in den Magen. Es ist hellbraun bis grau und setzt sich aus mehreren kleinen Lappen mit unregelmäßigen Kanten. Um die Bauchspeicheldrüse zu ernten, die Orgel zu erfassen und sanft aus dem umgebenden mesenterialen Gewebe zu necken. Dies muss vor dem Entfernen des Darmtraktes.
Um den gesamten Trakt als Einteiler mit dem Magen angefangen bis hin zu den Anus zu entfernen, zuerst eine Ligatur an den Mastdarm und dann machen Sie einen Schnitt durch den Dickdarm nur anterior des Afters. Legen Sie als nächstes eine Ligatur an der Kreuzung von der Speiseröhre und des Magens, Anschluss an die gesamte Darmtrakt angehoben werden kann und alle häutigen Anhänge durchtrennt. Das ganze kann dann von dem Mesenterium getrennt, in Teile geschnitten und fixiert.
Die Nieren sind gekoppelte Organe gegen die Muskeln des Rückens befindet. Sie sollten die Größe und Farbe des dunklen Kidney-Bohnen und haben eine glatte Oberfläche. Anterior die Niere ist sofort der Nebenniere erscheinen als kleine helle Rosa Knötchen.
Um eine Niere zu entfernen, isolieren Sie es mit einer Pinzette zu und schneiden Sie zwischen Orgel und den Harnleiter. Die harte äußere Schicht kann dann um zu prüfen, die Oberfläche abgeschält. Halbieren Sie eine Niere entlang der Längsachse und der andere quer. Jedes Korn innerhalb deutet auf das Vorhandensein von Kristallen oder mineralische Ablagerungen. Schließlich, die Leber, die ein dunkles Rot in der Farbe ist zu entfernen und die Margen sollte glatt mit eine scharfe Kante. Vorsicht beim Umgang mit der Leber, als es eine lockere Gewebe ist. Jede Störung der Integrität des Organs führt zu Blut Austritt in die Körperhöhle und andere Organe zu verschleiern.
Um die Leber zu entfernen, zuerst sanft reflektieren Sie die Lappen weg von der Membran und machen Sie einen Schnitt durch die Blutgefäße anterior der Struktur. Als nächstes reflektieren der Leber zurück in Richtung des Zwerchfells und den faserigen Knoten, der die Lappen zentral verbindet zu erfassen. Schließlich heben Sie die Orgel beim Abbruch aller Anhänge auf den Darm und Magen.
Das weibliche Fortpflanzungssystem besteht aus der Gebärmutter und der Eierstöcke. Die Gebärmutter ist eine kurze y-förmigen Struktur mit Hörnern in beide Richtungen erweitern. Die Hörner münden in die Eileiter und die Eierstöcke--knapp unterhalb der Nieren. Die Eierstöcke haben eine raue Oberfläche aufgrund unterschiedlicher Reifung Stadien der Follikel.
Die Eierstöcke, schneiden die arteriellen Anlagen anterior und der Eileiter nach hinten entfernen. Um die Gebärmutter zu entfernen, leicht fassen und unterhalb der Zervix. Heben Sie nach dem Schnitt den Körper und die Hörner der Gebärmutter brechen alle Anhänge in die Körperhöhle.
Bei Männern können Sie auch die preputialen Drüsen nur anterior der Vorhaut entfernt beobachten.
Die Prostata – in der Regel hellbraun in der Farbe--befindet sich rund um die Harnblase an der Basis. Um die Hoden zu visualisieren, die Abdominal-Fettpolster befindet sich im Unterbauch zu erfassen und Körpertiefe ziehen. Dies zieht die Hoden aus dem Hodensack zur Untersuchung zu ermöglichen. Die Oberfläche sollte glatt mit feinen Vaskularisierung offensichtlich an der Oberfläche sein.
Der Nebenhoden ist am unteren Rand der Hoden und verjüngt sich nach oben. Der Samenleiter wird bis zum Ende des Nebenhodens befestigt und führt zurück auf die Prostata. Um die Hoden zu entfernen, die Anlage auf den Hodensack und schneiden Sie der Samenleiter. Um die Prostata und Samenbläschen zu entfernen, fassen Sie die Basis der Harnblase und Aufzug beim Abbruch der Anlagen unter der Prostata.
Weiter zu der Organe in der Brusthöhle. Um die lebenswichtigen Strukturen aufzudecken, entnehmen Sie Membran aus dem Anhang zu den Rippen. Als Nächstes schneiden durch den Brustkorb seitlich auf beiden Seiten bis an die Spitze des Brustbeins, Manubrium und dann reflektieren die Knochen cranially um die thorakalen Organe sichtbar zu machen.
Die Lungen sind in der Regel eine leuchtend rosa Farbe, schwammigen Textur mit glatter Oberfläche. Aber Blutungen Euthanasie mit CO2 Lunge verursachen kann, wodurch dunkle rote Flecken, die die gesamte Lunge Oberflächen abdecken kann.
Das Herz ist dunkelrot und die Ventrikel sind muskulös, die fühlen sich fest im Griff. Die Vorhöfe sind dunkler in der Farbe rot und sitzen an der Spitze der Ventrikel. Sie sind viel weniger muskulös und schlaff erscheinen. Eine dünne transluzente Membran genannt Herzbeutel Sac umgibt das Herz.
Die Thymusdrüse liegt anterior Herzen und sitzt über der Luftröhre. Es sollte weich in der Textur. Kann man die Luftröhre, wie zuvor beschrieben, und die Speiseröhre ist ein sehr dünnes Rohr, das liegt direkt hinter der Luftröhre und hinter dem Herzen und geht durch das Diaphragma hindurch in den Magen.
Um die Organe in der Brusthöhle zu entfernen, zunächst greifen die Luftröhre knapp oberhalb der Thymus und machen Sie einen senkrechten Schnitt nur anterior der Zange. Heben Sie unter Beibehaltung den Griff die Luftröhre kaudal an und schnippeln Sie Anhänge der Lunge an die Wirbelsäule Oberfläche in den Brustkorb. Die Speiseröhre müssen geschnitten werden, um das Herz und die Lunge frei von der Brusthöhle heben können
Nachdem das Herz für den Körper entfernt ist, spülen Sie es mit Kochsalzlösung, verbleibende Blut und Klumpen zu entfernen, oder füllen Sie ihn mit dem Fixativ durch die Aorta. Sobald die Lungen herausgeschnitten werden, eine lose Ligatur um die Luftröhre platziert. Anschließend fädeln Sie eine Nadel befestigt, eine Spritze mit dem Fixativ in das Lumen der Trachea, und ziehen Sie die Ligatur. Dann injizieren Sie das Fixiermittel, bis die Lungen aufgeblasen werden. Schließlich ziehen Sie die Nadel und ziehen Sie die Ligatur weiterentwickeln, um auslaufen zu verhindern.
Mit diesem Hauch von Wissen in Bezug auf die Nager Sektions- und Gewebe Ernte betrachten wir einige der aktuellen Laborexperimente mit diesen Verfahren.
Diagnostischen Autopsie ist einen gemeinsamen Endpunkt in Krebs Metastasen Experimente. In diesem Beispiel die Ermittler Krebszellen injiziert das Nagetier Milz dann dreißig bis sechzig Tage später führte sie Autopsie, die erhebliche Lebermetastasen offenbart.
Gewebe-Extraktion folgt oft histologische Analyse, die in der Studie der mikroskopischen Anatomie der Probe hilft. Anhand des Protokolls der Fixierung, einbetten, sind schneiden und Färben von Geweben, Forscher in der Lage, die mikroskopischen Strukturen in diesen Organen zu studieren, und entdecken Sie die Wirkung von genetischen oder pharmakologische Interventionen auf atomarer Ebene.
Manchmal entfernen Forscher Gewebe um physiologische Prozesse wie Angiogenese zu studieren. Die Experimentatoren verwirklicht hier, eine Ratte in den mesenterialen Gewebe um Gefäßwachstum anregen. Dann, ein paar Abschnitte geerntet und behandelte sie mit den Markierungen, die die Zellen Blutgefäße, die zelluläre Dynamik vaskuläre Netzwerk Wachstum beteiligt zu beflecken.
Sie haben nur Jupiters Video detailliert die Schritte der Diagnose Sektions- und Gewebe Ernte bei Labortieren beobachtet. Es ist wichtig, richtige Techniken für die Organentnahme und Konservierung, verwenden, so dass die Extraktionsverfahren keinen Einfluss auf die Interpretation der erhobenen Daten hat. Wie immer vielen Dank für das ansehen!
Die Autopsie, d. h. die postmortale Untersuchung von Organen, und die Gewebeentnahme sind integrale Bestandteile vieler Laborexperimente, die sich auf die endgültigen Zeitpunkte der Datenerfassung stützen, die aus den Analysen der entnommenen Organe gewonnen werden. Daher ist es wichtig, die richtige diagnostische Autopsie und Gewebeentnahmetechnik zu erlernen, da das Verfahren die Qualität der entnommenen Proben erheblich beeinträchtigen kann. In dieser Präsentation wird die Methode der Dissektion und Extraktion von Bauch-, Fortpflanzungs- und Thoraxorganen von Labortieren überprüft.
Bevor mit dem Verfahren begonnen wird, sollte ein Formular erstellt werden, das eine vollständige Anamnese des Tieres enthält: Tieridentifikationsnummer, Geschlecht, Haltungsbedingungen, Geburtsdatum, Sterbedatum, Studien-/Protokollnummer und den Namen des Hauptprüfers.
Bereiten Sie als Nächstes den Sezierbereich vor. Legen Sie eine Tischabdeckung, ein Seziertablett und für die Autopsie vorgesehene Instrumente wie Schere, Pinzette, sterile Skalpellklinge, Knochenschneider, stumpfe Sonde, kleinen Spatel und nicht resorbierbares Nahtmaterial aus. Bei der Organ- und Gewebeentnahme für die histologische Untersuchung muss das Gewebe in einer Fixierlösung konserviert werden. Sofern nicht anders angegeben, ist das am häufigsten verwendete Fixiermittel 10% neutral gepuffertes Formalin. Beachten Sie, dass die Gewebeproben 0,5 bis 1 cm dick sein sollten, um ein ausreichendes Eindringen der Fixierlösung zu ermöglichen. Die Fixierung verhindert Zerfall, Autolyse und Fäulnis; stoppt alle laufenden biochemischen Reaktionen; und kann die mechanische Festigkeit und Stabilität des behandelten Gewebes erhöhen.
Auch die Methode der Euthanasie des Tieres kann sich auf die Qualität der Proben auswirken. Die am häufigsten angewandte Euthanasiemethode bei Mäusen und Ratten ist eine Überdosierung von Kohlendioxidgas. Die Tiere werden in ihrem Heimatkäfig belassen, der in eine Kammer gesetzt wird, und das CO2 wird nach und nach mit einer Verdrängungsrate von 10-30 % des Kammervolumens/min in die Kammer eingebracht. Dies führt dazu, dass die Tiere vor der Schmerzwahrnehmung das Bewusstsein verlieren, was mit der Aktivierung von Nozizeptoren durch Kohlensäure verbunden ist. Der Fluss wird dann in der Kammer aufrechterhalten, bis ein Atemstillstand eingetreten ist und das Tier tot ist.
Nach der Sterbehilfe ist zunächst eine erste äußere Untersuchung durchzuführen, indem der Kadaver visuell auf Läsionen und Massen, übermäßiges Zahnwachstum oder Verfärbungen des Fells an Mund, Nasenlöchern, Ohren, Augen sowie den Anal- und Genitalöffnungen untersucht wird. Falls gerechtfertigt, führen Sie einen Klebebandtest, Hautabschürfungen und Felluntersuchungen durch, um äußere Parasiten zu erkennen. Sobald die äußere Untersuchung abgeschlossen ist, ist es an der Zeit, mit der Autopsie zu beginnen, beginnend mit der Bauchhöhle. Beachten Sie, dass es wichtig ist, das Organ vor der Entnahme von Gewebeproben in situ zu beobachten.
Um mit der Entfernung der Haut zu beginnen, platzieren Sie einen kleinen Schnitt direkt vor dem Becken bei Frauen und oberhalb der Vorhaut bei Männern. Lösen Sie dann mit der stumpfen Dissektionstechnik die Haut von den Faszien und Muskeln. Die stumpfe Dissektion ist eine Technik der anatomischen Dissektion, bei der Gewebe getrennt und die darunter liegenden Strukturen ohne Schnitt freigelegt werden. Bei dieser Technik wird die Schere verwendet, um das Gewebe auseinander zu spreizen, anstatt es auseinanderzuschneiden. Die geschlossenen Spitzen werden in das Gewebe geschoben und dann geöffnet, um das Gewebe entlang der natürlichen Ebenen zu spalten. Dieser Prozess erfordert Geduld und Fingerspitzengefühl, da die Dehnung des Gewebes zu Schäden an angrenzenden Organen und Blutgefäßen führen kann. Verlängern Sie dann den Schnitt bis zum Kinn. Als nächstes machen Sie Querschnitte vor den hinteren Gliedmaßen und hinter den Vordergliedmaßen und verwenden Sie eine stumpfe Dissektion, um den Halsbereich und die Brust freizulegen. Besondere Vorsicht ist geboten, um einen Riss der Halsschlagadern und Halsschlagadern zu vermeiden.
Bei Weibchen, bei denen die Haut herausgeschnitten ist, beobachten Sie das Brustgewebe von der Oberseite des Brustbeins am Manubrium bis zur Genitalöffnung auf der Bauchfläche; seitlich auf beiden Seiten auslaufend. Stillende oder trächtige Hündinnen haben ein erhöhtes Volumen des Brustgewebes und es kann Milch vorhanden sein. Um die Brustdrüsen zu entfernen, fassen Sie den Geweberand mit einer Pinzette und lösen Sie mit stumpfer Dissektion die Anhaftungen an der Haut. Sobald die Drüse abgetrennt wurde, kann sie für die anschließende histologische Analyse in eine Fixierlösung gelegt werden.
In diesem Stadium können Sie submandibuläre Speicheldrüsen beobachten, die gepaart und am Unterkiefer angeordnet sind und sich entlang des Halses bis zum Manubrium sternum erstrecken. Die Entfernung dieser Drüsen erfordert eine stumpfe Dissektion und besondere Sorgfalt bei Arbeiten im Gebärmutterhalsbereich, um einen Bruch der Blutgefäße zu verhindern. Sobald Sie sich von den darunter liegenden Muskeln befreit haben, heben Sie die Drüsen an und durchtrennen Sie alle verbleibenden Ansätze. Die Drüsen benötigen mindestens einen Schnitt, um das Eindringen des Fixiermittels zu ermöglichen.
Außerdem sieht man die Luftröhre, die sich von der Epiglottis bis zur Bifurkation der Bronchien erstreckt. Es handelt sich um eine geriffelte, knorpelige Röhre, die flexibel ist. Obwohl die Euthanasie mit CO2 normalerweise klar ist, kann sie zu einer Flüssigkeitsansammlung in der Lunge und der Luftröhre führen, die wie eine schaumige, klare Flüssigkeit aussieht. In diesem Bereich ist auch subkutanes Fett vorhanden. Bewerten Sie es auf Menge und Ablagerung. Ein adipöses Tier kann eine große Menge Fett haben und die Haut fühlt sich verdickt an.
Beobachten Sie vor dem Öffnen der Körperhöhle die Bauch-, Interkostal- und freiliegenden Nackenmuskeln und Gliedmaßen auf Verdickungen, Massen oder Verfärbungen. Um die Körperhöhle zu öffnen, machen Sie zunächst einen kleinen Querschnitt an der kaudalsten Stelle des freiliegenden Bauchmuskels. Heben Sie dann den Muskel von den Organen weg und schneiden Sie entlang der Linea alba bis zum Xiphoid. Als nächstes präparieren Sie die Muskeln seitlich von der Mittellinie bis knapp über die hinteren Gliedmaßen auf beiden Seiten. Zum Schluss entlang der Wölbung der Rippen auf beiden Seiten einschneiden. Sobald die Körperhöhle geöffnet wurde, beurteilen Sie die Menge und Ansammlung von Bauchfett. Ein gesundes Tier hat Bauchfettpolster und etwas Fett entlang der Rückenfläche in der Höhle. Beobachten Sie die Farbe dieses Gewebes und notieren Sie eventuelle Anomalien.
Jetzt sind wir bereit, mit der Entnahme von Bauchorganen zu beginnen. Beginnen Sie damit, die Milz zu lokalisieren, die dunkelrot ist und sich entlang der unteren Krümmung des Magens befindet. Er sollte eine regelmäßige Form haben und eine leicht matte Oberfläche haben. Um die Milz zu entfernen, heben Sie das Organ an und schneiden Sie die Ansätze am Magen ab.
Der Magen befindet sich am distalen Ende der Speiseröhre. Er scheint zweifarbig zu sein, wobei er den Muskel- und den Drüsenanteil unterscheidet. Fühlen Sie es für das Vorhandensein von Lebensmitteln. Ein leerer Magen sollte beachtet werden, da er auf eine Krankheit hinweisen kann. Schneiden Sie nicht in den Magen, da der Inhalt die Organe in der Bauchhöhle kontaminiert.
Der Dünndarm ist distal und unterhalb des Magens verbunden. Es gibt drei verschiedene Abschnitte des Dünndarms. Der erste ist der Zwölffingerdarm - ein kürzerer Abschnitt vom hinteren Magenschließmuskel bis zum Anfang des Jejunums. Hier tritt der Gallengang ein und das Bauchspeicheldrüsengewebe wird fester mit diesem Teil des Dünndarms verbunden. Das Jejunum ist der mittlere Teil. Peyer-Flecken, kleine ovale Bereiche, die aus lymphatischem Gewebe bestehen, können auf der Oberfläche des Jejunums und des Ileums beobachtet werden. Das Ileum ist der längste Teil des Dünndarms, der am Blinddarm endet - der sich an der Verbindung von Dünn- und Dickdarm befindet. Der Blinddarm erscheint grünlich und ist sehr weich.
Der Dickdarm setzt sich vom Blinddarm bis zum After fort. Es ist leicht zu identifizieren, da Fäkalienpellets innerhalb des Lumens dieser Struktur sichtbar gemacht werden können. Der Dünn- und Dickdarm sind durch das Mesenterium, eine Membran, die Blutgefäße, Fett und Lymphknoten enthält, mit dem Körper verankert. Dieser sollte vor der Entnahme des Darmtraktes auf vergrößerte Lymphknoten und eventuelle Raumforderungen untersucht werden. Die Bauchspeicheldrüse ist ein diffuses Organ, das sich hinter dem Magen befindet. Es hat eine hellbraune bis graue Farbe und besteht aus mehreren kleinen Lappen mit unregelmäßigen Rändern. Um eine Bauchspeicheldrüse zu entnehmen, fassen Sie das Organ und ziehen Sie es vorsichtig aus dem umgebenden Mesenterialgewebe heraus. Dies muss vor der Entnahme des Darmtraktes erfolgen.
Um den gesamten Trakt in einem Stück zu entfernen, beginnend mit dem Magen und bis zum Anus, platzieren Sie zuerst eine Ligatur am Rektum und machen Sie dann einen Schnitt durch den Dickdarm direkt vor dem Anus. Als nächstes platzieren Sie eine Ligatur an der Verbindung von Speiseröhre und Magen, woraufhin der gesamte Darmtrakt angehoben und alle membranösen Ansätze durchtrennt werden können. Das Ganze kann dann vom Mesenterium getrennt, in Stücke geschnitten und fixiert werden.
Die Nieren sind paarige Organe, die sich an den Muskeln des Rückens befinden. Sie sollten die Größe und Farbe einer dunklen Kidneybohne haben und eine glatte Oberfläche haben. Unmittelbar vor der Niere befindet sich die Nebenniere, die als kleiner hellrosa Knoten erscheint.
Um eine Niere zu entfernen, isolieren Sie sie mit einer Pinzette und schneiden Sie zwischen dem Organ und dem Harnleiter. Anschließend kann die zähe äußere Schicht abgezogen werden, um die Oberfläche zu untersuchen. Schneiden Sie eine Niere entlang der Längsachse in zwei Hälften und die andere quer. Jeglicher Sand im Inneren kann auf das Vorhandensein von Kristallen oder mineralischen Ablagerungen hinweisen. Entfernen Sie zum Schluss die Leber, die eine dunkelrote Farbe hat und deren Ränder glatt mit einem scharfen Rand sein sollten. Beim Umgang mit der Leber ist Vorsicht geboten, da es sich um ein brüchiges Gewebe handelt. Jede Störung der Integrität des Organs führt dazu, dass Blut in die Körperhöhle eindringt und andere Organe verdeckt.
Um die Leber zu entfernen, reflektieren Sie zunächst die Lappen vorsichtig vom Zwerchfell weg und machen Sie einen Schnitt durch die Blutgefäße vor der Struktur. Reflektieren Sie dann die Leber zurück zum Zwerchfell und fassen Sie den fibrösen Knoten, der alle Lappen zentral verbindet. Heben Sie zum Schluss das Organ an, während Sie alle Ansätze zum Darmtrakt und zum Magen durchtrennen.
Das weibliche Fortpflanzungssystem besteht aus der Gebärmutter und den Eierstöcken. Die Gebärmutter ist eine kurze Y-förmige Struktur mit Hörnern, die sich in beide Richtungen erstrecken. Die Hörner enden an den Eileitern und den Eierstöcken - direkt unter den Nieren. Die Eierstöcke haben aufgrund der unterschiedlichen Reifungsstadien der Follikel eine raue Oberfläche.
Um die Eierstöcke zu entfernen, werden die arteriellen Ansätze anterior und der Eileiter posterior durchtrennt. Um die Gebärmutter zu entfernen, greifen und schneiden Sie vorsichtig unter den Gebärmutterhals. Heben Sie nach dem Schnitt den Körper und die Hörner der Gebärmutter an und brechen Sie alle Ansätze in der Körperhöhle.
Bei Männern können Sie auch die Präputialdrüsen beobachten, die sich direkt vor der Vorhaut befinden. Sie erscheinen groß und haben eine graue bis gelbliche Farbe mit einem schaumigen Aussehen. Die Entfernung und Fixierung dieser Drüsen ist ähnlich wie bei den Unterkieferdrüsen. Darüber hinaus besteht das männliche Fortpflanzungssystem aus Samenbläschen, der Prostata und den Hoden. Die Samenbläschen sind weiße, "Widderhorn-förmige" Strukturen, die sich vor der Harnblase befinden und an der Mittellinie an der Prostata befestigt sind.
Die Prostata - in der Regel hellbraun in der Farbe - befindet sich um die Harnblase an der Basis. Um die Hoden sichtbar zu machen, fassen Sie die Bauchfettpolster im Unterbauch und ziehen Sie sie nach vorne. Dadurch werden die Hoden aus dem Hodensack gezogen, um eine Untersuchung zu ermöglichen. Die Oberfläche sollte glatt sein und eine feine Vaskularisation aufweisen.
Der Nebenhoden verläuft am unteren Rand des Hodens und verjüngt sich nach oben. Der Samenleiter wird am Ende des Nebenhodens befestigt und führt zurück in die Prostata. Um die Hoden zu entfernen, schneiden Sie den Ansatz am Hodensack ab und durchtrennen Sie die Samenleiter. Um die Prostata und die Samenbläschen zu entfernen, fassen Sie die Basis der Harnblase und heben Sie sie an, während Sie die Ansätze unter der Prostata durchtrennen.
Weiter geht es zu den Organen in der Brusthöhle. Um die lebenswichtigen Strukturen freizulegen, entfernen Sie das Zwerchfell aus dem Ansatz an den Rippen. Schneiden Sie dann den Brustkorb seitlich auf beiden Seiten bis zur Spitze des Manubrium sternum durch und reflektieren Sie dann die Knochen kranial, um die Thoraxorgane sichtbar zu machen.
Die Lunge hat normalerweise eine leuchtend rosa Farbe, eine schwammige Textur mit einer glatten Oberfläche. Die Euthanasie mit CO2 kann jedoch Lungenblutungen verursachen, die zu dunkelroten Flecken führen, die die gesamte Lungenoberfläche bedecken können.
Das Herz ist dunkelrot und die Ventrikel sind muskulös, die sich fest anfühlen. Die Vorhöfe sind dunkler rot gefärbt und sitzen am oberen Rand der Herzkammern. Sie sind viel weniger muskulös und wirken schlaff. Eine dünne durchscheinende Membran, die als Perikardsack bezeichnet wird, umgibt das Herz.
Der Thymus befindet sich vor dem Herzen und sitzt über der Luftröhre. Es sollte eine glatte Textur haben. Man kann die Luftröhre so sehen, wie sie zuvor beschrieben wurde, und die Speiseröhre ist eine sehr dünne Röhre, die direkt hinter der Luftröhre und hinter dem Herzen liegt und durch das Zwerchfell in den Magen gelangt.
Um die Organe in der Brusthöhle zu entfernen, beginnen Sie damit, die Luftröhre direkt über dem Thymus zu fassen und einen senkrechten Schnitt direkt vor der Pinzette zu machen. Heben Sie die Luftröhre bei Beibehaltung des Griffs kaudal an und schneiden Sie alle Ansätze der Lunge an der Wirbelsäulenoberfläche im Brustkorb ab. Die Speiseröhre muss möglicherweise durchtrennt werden, um das Herz und die Lunge aus der Brusthöhle befreien zu können
Nachdem das Herz für den Körper entfernt wurde, spülen Sie es mit Kochsalzlösung, um Blutreste und Gerinnsel zu entfernen, oder füllen Sie es mit dem Fixiermittel durch die Aorta. Sobald die Lunge herausgeschnitten ist, legen Sie eine lose Ligatur um die Luftröhre. Fädeln Sie dann eine Nadel, die an einer Spritze mit dem Fixiermittel befestigt ist, in das Lumen der Luftröhre ein und ziehen Sie die Ligatur fest. Injizieren Sie dann das Fixiermittel, bis die Lunge aufgebläht ist. Entfernen Sie abschließend die Nadel und ziehen Sie die Ligatur weiter fest, um ein Auslaufen zu verhindern.
Mit diesem Hauch von Wissen über die Nagetier-Autopsie und die Gewebeentnahme schauen wir uns einige der aktuellen Laborexperimente an, bei denen diese Verfahren zum Einsatz kommen.
Die diagnostische Autopsie ist ein häufiger Endpunkt in Experimenten zur Krebsmetastasierung. In diesem Beispiel injizierten die Forscher Krebszellen in die Milz des Nagetiers Dreißig bis sechzig Tage später führten sie eine Autopsie durch, bei der erhebliche Lebermetastasen festgestellt wurden.
Auf die Gewebeentnahme folgt oft eine histologische Analyse, die bei der Untersuchung der mikroskopischen Anatomie der Probe hilft. Durch die Befolgung des Protokolls der Fixierung, Einbettung, Teilung und Färbung von Geweben sind die Forscher in der Lage, die mikroskopischen Strukturen in diesen Organen zu untersuchen und die Auswirkungen genetischer oder pharmakologischer Eingriffe auf atomarer Ebene aufzudecken.
Manchmal entnehmen Forscher Gewebe, um physiologische Prozesse wie die Angiogenese zu untersuchen. Hier exteriorisierten die Experimentatoren das Mesenterialgewebe einer Ratte, um das Gefäßwachstum zu stimulieren. Dann entnahmen sie einige Schnitte und behandelten sie mit den Markern, die die Zellen eines Blutgefäßes färben, um die zelluläre Dynamik zu untersuchen, die am Wachstum des Gefäßnetzwerks beteiligt ist.
Sie haben sich gerade das Video von JoVE angesehen, in dem die Schritte der diagnostischen Autopsie und der Gewebeentnahme bei Labortieren beschrieben werden. Es ist wichtig, geeignete Techniken für die Organentnahme und -konservierung zu verwenden, damit das Extraktionsverfahren keinen Einfluss auf die Interpretation der gesammelten Daten hat. Wie immer vielen Dank fürs Zuschauen!
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