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Arbeiten mit Zentrifugen
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JoVE Science Education Lab Safety
Working with Centrifuges

6.4: Arbeiten mit Zentrifugen

101,485 Views
07:07 min
July 14, 2017
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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

Quelle: Robert M. Rioux & Suprita Jharimune, Pennsylvania State University, University Park, PA

Erdanziehungskraft ist in der Lage, heterogene Mischungen zu trennen. Viele Systeme verhindern jedoch diese Art der Trennung aufgrund der Länge der Zeitaufwand in der Regel in solchen Fällen. Zentrifugation ist eines der mächtigsten Werkzeuge für die Trennung von heterogene Mischungen 1. Es umfasst die Anwendung von zentripetale Kraft für Sedimentation der schwerere Phase führt zur Trennung der beiden Phasen und eine häufig verwendete Technik in Industrie und Labor Einstellungen ist.

in einem typischen Zentrifugation Prozess drehte sich die Partikel in einer Flüssigkeit suspendiert über die Zentrifuge Drehachse, verursacht eine Kraft von der Achse entfernt. Diese Kraft treibt die Partikel auf den Boden der Zentrifuge Probenhalter mit einer Rate ist abhängig von der Größe und Dichte der Partikel. Zentrifugation ist daher eine Technik, um den Prozess der Sedimentation beschleunigen.

zur Gewährleistung der Sicherheit im Umgang mit einer Zentrifuge der Benutzer sollte richtig geschult und sensibilisiert die Gefahren, die aus deren Nutzung ergeben könnten. In den folgenden Abschnitten präsentieren eine Diskussion über Handhabung und Sicherheit beim Arbeiten mit Zentrifugen.

Procedure

1. Allgemeines Protokoll für sichere Nutzung der Zentrifuge

  1. Labor Supervisor oder Labor Sicherheitsbeauftragter sollten dafür sorgen, dass alle Benutzer sind geschult in der Auswahl des Rotors, Probenröhrchen und ordnungsgemäßen Betrieb der die Zentrifuge.
  2. Jeder neue Benutzer sollte eng von einem ausgebildeten Benutzer überwacht werden, bis er/Sie selbstbewusst auf, wie man das Instrument richtig zu nutzen ist.
  3. Vor dem Einsatz des Instruments, jeder Benutzer sollte sorgfältig gelesen und verstanden die Sicherheitshinweise für die spezifische Zentrifuge.
  4. Je nach Probe, kompatibel Rotoren verwendet werden sollten.
  5. Rotor, Rohr und Spindel sollte sauber, trocken und frei von Rissen oder Missbildungen.
  6. Die O-Ringe sollten überprüft werden, denn alle tragen oder Risse.
  7. Es ist wichtig, um sicherzustellen, dass die Rohre zur Zentrifugation mit der Probe und die Rotationsgeschwindigkeit (Low, High oder Ultra) vereinbar sind.
  8. Der Zentrifuge Rohre sollte nicht mehr als drei Viertel ihrer maximalen Füllstand gefüllt werden.
  9. Die Rohre sollten eng begrenzt werden.
  10. Ist es extrem wichtig, die Röhren entgegengesetzt zueinander auszugleichen. Tun so, unvollständige Trennung und in extremen Fällen führen kann kann fehlschlägt Streuung der Röhre Inhalte in das Gehäuse der Zentrifuge.
  11. Vor dem Einschalten der Zentrifuge, Rotor überprüft werden, um sicherzustellen, es sitzt richtig auf dem Laufwerk und der Deckel richtig geschlossen ist.
  12. Des Deckels sollte zu allen Zeiten wenn die Zentrifuge in Betrieb ist, und nie offen sein sollte, bis der Rotor vollständig stoppt geschlossen zu halten.
  13. Sollte der Betreiber in der Nähe der Zentrifuge bleiben, bis es sicher Betrieb Zielgeschwindigkeit erreicht hat. Im Falle der ungewöhnliche Geräusche oder Vibrationen sollte das Gerät sofort ausgeschaltet werden. Die Höchstgeschwindigkeit des Geräts darf niemals überschritten werden. Lassen Sie nach dem Ausschalten genügend Zeit für den Rotor zu einer Endlage zu verlangsamen. Modernen Zentrifugen sind Indikatoren, die bedeutet, dass es sicher um die Zentrifuge zu öffnen.
  14. Nach der Zentrifugation ist vorbei, Proben entfernt werden sollte und das Instrument für Überläufe oder Undichtigkeiten überprüft werden. Wenn nötig, der Rotor gründlich gereinigt werden sollten.

2. Zusätzliche Vorsichtsmaßnahmen während Umgang mit gefährlichen Chemikalien oder infektiösem Material

  1. bei Verwendung von gefährlichen Chemikalien oder biologischen Proben, die infektiös sein können, ist es wichtig, das Instrument während in Nutzung, warnen andere Arbeitnehmer zu beschriften das Gefahr.
  2. Geeignete Handschuhe 1 sollte getragen werden, um gefährliche Proben zu behandeln.
  3. Sealed Sicherheit Röhren sollten verwendet werden. Es ist vorzuziehen, sekundäre Wochenbett, falls vorhanden, für die Zentrifuge Rohre verwenden. Diese sind in der Regel in Form von Kunststoff oder Glas-Einsätze, die direkt in die Probe Eimer der Zentrifuge gestellt werden.
  4. Nach der Zentrifugation vorbei ist, sollten die Röhren entfernt vom Rotor und geöffnet nur im Dunst Haube oder biologischen Sicherheitsschrank, soweit anwendbar.
  5. Reinigung, bei Bedarf mit äußerster Vorsicht, um nicht aussetzen der Bediener gefährlichen Chemikalien oder infektiösen Materialien erfolgt. Im Falle von Leckagen solcher Proben, Schritt 3, Notsituationen, siehe unten.
  6. Für bestimmte Arten von gefährlichen Proben, ist es möglicherweise vorzuziehen, Standardverfahren und Reinigung Protokolle im Labor zu erhalten. Diese sollten überprüft und bei Bedarf entsprechend aktualisiert.

3. Notfall-Situationen und ihre Sicherheitsmaßnahmen

eine Notsituation kann entstehen, wenn der Rotor Störungen oder gibt es ein Überlauf in der Zentrifuge durch Rohr Bruch oder unsachgemäße Handhabung. In einer solchen Situation die folgenden Schritte sollten unternommen werden.

  1. Der Zentrifuge muss sofort abgeschaltet werden und der Deckel sollte geschlossen gehalten werden, bis andere benachrichtigt werden und die Lage zu evakuieren. Die Leistung sollte an die Power-Taste am Gerät eingestellt werden. Die Schaltfläche wird entweder auf der Vorderseite, Seite oder Rückseite des Geräts befinden. Der Benutzer sollte sich mit seiner Lage vertraut machen. Die Ein-/Ausschalttaste ist fehlerhaft, wenn der Benutzer sollte die wichtigsten Netzstecker aus der Steckdose entfernen.
  2. Um das Risiko von Aerosolen zu reduzieren, ist es manchmal besser die Zentrifuge mit der Zentrifuge technisches Dokument für mindestens 0,5 h Consult unberührt zu lassen.
  3. Für Reinigung von verschütteten Flüssigkeiten, der Bediener sollte gut vertraut sein mit der Probe verwendet werden und sollte tragen richtige Bekleidung einschließlich Kittel, Handschuhe, Gesichts Schild und Schutzbrille.
    1. Einmal gereinigt, verschüttete Material ordnungsgemäß entsorgt werden und die kontaminierte Schutzkleidung entsorgt oder richtig gereinigt werden sollte. Alle exponierten Haut und Hände sollten gründlich gewaschen werden.
  4. Wenn offenkundig höchst gefährlichen Stoffen ausgesetzt, 911 aufgerufen werden soll oder sofortig ärztliche Behandlung sollte die betroffene Person verabreicht werden.

4. Wartung der Zentrifuge

Hinweis: die Körper der Zentrifuge ist in der Regel aus Metallen, die in Gegenwart von Feuchtigkeit, Chemikalien oder starke Reinigungsmittel korrodieren können. Für die ordnungsgemäße Instandhaltung der Zentrifuge, es wird empfohlen, den Hersteller befolgen ' s Anweisungen zur Reinigung und Wartung. Other than, die, sind ein paar allgemeine Maßnahmen für die Instandhaltung im Auge behalten werden wie folgt.

  1. Die Zentrifuge sollte immer sauber und trocken gehalten werden.
  2. Jede Art von Leckagen sofort gereinigt werden.
  3. Sollte der Rotor nach Gebrauch mit biologischen und radioaktiven Stoffen dekontaminiert werden. Es wird empfohlen, 10 % Bleichmittel verwenden für 30 min, gefolgt von 70 % Ethanol, der Rotor an der Luft trocknen zu lassen.
  4. Schleifmittel Bürstendrähte sollte nie verwendet werden, um den Rotor zu reinigen und verbundenen Teile.
  5. Des Rotors sollte nach jedem Gebrauch überprüft werden, durch den Betreiber und mindestens einmal jährlich vom Hersteller Inspektor.
  6. A-Log-Buch sollte für jede Zentrifuge für Aufzeichnungen von Benutzern, Proben und Service-Historie beibehalten werden. Darüber hinaus können Kopien von Garantie-bezogenen Materialien in diesem Logbuch aufgenommen werden.

Transcript

Die Zentrifugation ist eines der leistungsfähigsten Werkzeuge, die in Labors zur Trennung heterogener Gemische eingesetzt werden, aber sie kann gefährlich sein, weshalb Sicherheitsvorkehrungen getroffen werden sollten.

Eine Zentrifuge dreht Proben schnell, um heterogene Materialien zu trennen, was zu extremen Zentrifugalkräften auf die Proben und das Instrument führt. Aufgrund der hohen Geschwindigkeit, mit der eine Zentrifuge arbeitet, kann sie bei falscher Handhabung zu schweren Verletzungen des Benutzers führen. Daher ist bei der Verwendung einer Zentrifuge besondere Vorsicht geboten, um Verschüttungen und Schäden am Gerät zu vermeiden.

Dieses Video veranschaulicht den Mechanismus einer Zentrifuge und wie man sie sicher bedient und wartet.

Bevor wir auf die Details der Sicherheitsmaßnahmen eingehen, lassen Sie uns kurz die Grundlagen der Zentrifugation überprüfen. Zentrifugen enthalten einen Rotor, der auf einer Spindel untergebracht ist. Rotoren unterschiedlicher Größe können in der Regel auf einer einzigen Spindel montiert werden, um unterschiedliche Probenflaschen, Röhrchen oder Beutel aufzunehmen. Ein Motor dreht den Rotor mit einer bestimmten Drehzahl oder Umdrehungen pro Minute. Dies wiederum überträgt die Zentrifugalkraft auf das heterogene Gemisch, das von der Rotationsachse weg gerichtet ist und Partikel unterschiedlicher Dichte trennt.

Verschiedene Arten von Zentrifugen arbeiten mit unterschiedlichen Drehzahlen: Zentrifugen mit niedriger Drehzahl arbeiten mit weniger als 10.000 U/min, Zentrifugen mit hoher Drehzahl bis zu 21.000 und Ultrazentrifugen mit bis zu 30.000 U/min. Jeder Typ verfügt über unterschiedliche Rotoren, die damit kompatibel sind. Nach der Fahrt bremst in der Regel ein Bremssystem den Rotor ab. In jeder Zentrifuge verformt die hohe Drehzahl den Rotor.

Bei normalem Gebrauch kehrt es zu seiner vorherigen Größe zurück. Überschreitet die Kraft durch das Schleudern jedoch die maximale Kraft, die der Rotor aufnehmen kann, kann er sich dauerhaft verformen. Dies kann zu Rissen führen, die wiederum zu einem schwerwiegenden Ausfall führen können. Zentrifugenausfälle hingegen können zu einem Auslaufen der Probe führen, was gefährlich sein kann, wenn gefährliche Materialien im Spiel sind und mit Vorsicht behandelt werden sollten. Jetzt zeigen wir Ihnen, wie Sie Proben vorbereiten und sicher in der Zentrifuge verwenden können.

Wählen Sie zunächst geeignete Zentrifugenröhrchen aus, die mit den Drehzahlen kompatibel sind, die Sie verwenden möchten. Schauen Sie in der Dokumentation nach, um die Grenzen der Röhre herauszufinden. Die Rohre sollten intakt und frei von Rissen sein. Füllen Sie jedes Stück zu maximal 3/4 voll, um ein Verschütten zu vermeiden. Stellen Sie dann sicher, dass die Röhren ausbalanciert sind und verschließen Sie sie fest.

Bei der Zentrifugation gefährlicher chemischer oder biologischer Proben sind besondere Vorsichtsmaßnahmen zu treffen. Tragen Sie geeignete Schutzausrüstung und bereiten Sie die Proben in einer geeigneten Arbeitsumgebung vor, z. B. in einem Abzug oder einem Laminar-Flow-Schrank. Weitere Informationen zu diesen Sicherheitsmerkmalen finden Sie in den Videos von JoVE zu Abzügen.

Verwenden Sie bei Bedarf ein sekundäres Containment für gefährliche Materialien, wie z. B. einen Glas- oder Kunststoffeinsatz. Versiegelte Sicherheitsrohre, die eine geschlossene Umgebung bieten, können ebenfalls verwendet werden. Jeder muss geschult werden, bevor er eine Zentrifuge oder einen Rotor benutzt.

Wählen Sie einen für die Zentrifuge geeigneten Rotor. Prüfen Sie, ob der Rotor und seine Abdeckung sauber und trocken sind und keine Risse oder Verformungen aufweisen. Achten Sie besonders darauf, dass die O-Ringe am Rotor oder an der Abdeckung nicht abgenutzt sind. Überprüfen Sie auch die Zentrifugenspindel, um festzustellen, ob sie verbogen ist oder andere Verformungen aufweist. Setzen Sie dann den Rotor auf die Spindel und stellen Sie sicher, dass er richtig sitzt. Führen Sie die Proben in den Rotor ein und achten Sie darauf, dass die Röhrchen fest in den Rotor passen.

Stellen Sie symmetrische Röhren immer einander gegenüber. Decken Sie den Rotor ab und stellen Sie sicher, dass die Dichtung dicht ist. Schließen Sie den Zentrifugendeckel und starten Sie Ihr Programm. Sehen Sie sich auch hier das vorherige Zentrifugenvideo von JoVE an, um weitere Informationen zum Ausführen eines Zentrifugenprogramms zu erhalten.

Bleiben Sie an der Zentrifuge, bis sie ihre maximale Drehzahl erreicht hat. Machen Sie sich mit der Position des Netzschalters vertraut. Schalten Sie den Netzschalter aus, wenn ungewöhnliche Geräusche oder Vibrationen auftreten, um die Zentrifuge sofort zu stoppen. Evakuieren Sie dann den unmittelbaren Bereich, bis der Rotor gestoppt ist. Untersuchen Sie nach dem Anhalten die Proben auf Verschüttungen und den Rotor auf Anomalien oder Ungleichgewichte. Wenn es keine Probleme gab, warten Sie, bis die Zentrifuge ihr Programm abgeschlossen und vollständig gestoppt hat.

Warten Sie eine weitere halbe Stunde, wenn aerosolbildende Chemikalien vorhanden sind. Andernfalls können Sie

die Zentrifuge sofort öffnen. Entnehmen Sie die Proben und bringen Sie sie zurück in einen speziellen Bereich, um sie bei Bedarf zu öffnen. Im Falle einer Verschüttung reinigen Sie die Zentrifuge sofort. Verwenden Sie bei vorhandener Gefahr geeignete PSA und entsorgen Sie kontaminierte Materialien gemäß den Richtlinien. Verwenden Sie zum Reinigen keine scheuernden Bürstendrähte, da diese den Rotor beschädigen können. Alarmieren Sie das Notfallpersonal und versuchen Sie nicht, die Zentrifuge zu reinigen, wenn lebensbedrohliche Gefahren ausgetreten sind.

Dekontaminieren Sie den Rotor mit 10 % Bleiche für alle biologischen Proben, die in der Zentrifuge verwendet werden, unabhängig davon, ob sie verschüttet wurden oder nicht. Lassen Sie das Bleichmittel 30 Minuten einwirken, spülen Sie dann 70 % Ethanol ab und trocknen Sie es an der Luft. Nehmen Sie zum Schluss den Rotor heraus und untersuchen Sie ihn auf Beschädigungen und notieren Sie Ihre Nutzung im Logbuch.

Sie haben gerade die Einführung in die Zentrifugennutzung von JoVE gesehen. Sie sollten nun verstehen, wie Sie Ihre Proben vorbereiten und wie Sie das Gerät bedienen und warten.

Danke fürs Zuschauen.

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