Name: Herstellung von Myogenic Engineered Tissue Konstrukte (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 43 s
Description: Erfahren Sie die Herstellung myogener Gewebekonstrukte aus Kollagen und Skelettmyoblasten für kardiovaskuläre Reparaturen. Diese Methode ermöglicht die Entwicklung von elektrischen Leitbahnen zur Behandlung von Herzblock.

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, Ein New Researcher Award vom Thrasher Research Fund, und Beiträge an die Reizleitung Fund an der Kinderklinik Boston; Diese Arbeit wird durch Forschungsmittel von den National Institutes of Health (HL088206 HL068915) unterstützt.

Teil 1: Montieren Sie bauen Gussformen <ol><li> Verwenden Sie eine Rasierklinge Silikonschlauch (VWR) zu halbieren und schneiden Sie es in 3 cm lange Stücke schneiden. </li><li> Geben Sie einen Tropfen von Implantat-grade RTV Silikonkleber (Rhodia) auf der Innenseite von jedem Ende des Schlauchs. </li><li> Schnell Ort ein kleines Stück (1 cm x 1 cm) von Polyester-Mesh (McMaster-Carr) auf dem Silikonkleber drop und richten Sie sie mit dem Ende des Schlauchs. Dies wird eine leicht erhöhte und ebene Fläche für Bau Anhang. Wiederholen Sie für das andere Ende. </li><li> Lassen Sie die Form bei Raumtemperatur für 3 Tage trocknen lassen. Es ist hilfreich, 20 bis 30 Formen in einer Zeit zu machen, da diese im Wesentlichen zu entsorgen sind. </li><li> Sobald der Kleber vollständig trocken ist, speichern diese Formen in ein Becherglas mit 70% Ethanol gefüllt, bis sie gebraucht werden. Dieser Schritt wird dazu beitragen, sterilisieren die Formen und das fertige Produkt wird in Abbildung 1 dargestellt. </li></ol> Teil 2: Vorbereitung für die Myoblasten Zellisolation <ol><li> Verdünnen Sie 1 mg Laminin (Sigma) in 250 ml 0,22 um Filter-sterilisierte Phosphat-gepufferter Salzlösung (PBS) mit 1% Penicillin / Streptomycin (Invitrogen) und 1% Fungizone (Invitrogen). </li><li> Coat 150 mm Zellkulturplatten (BD Falcon) mit 4 ml der verdünnten Laminin-Lösung aus Schritt 1,1 und bei 37 º C für mindestens 4 Stunden vor dem Ausplattieren der primären Skelettmyoblasten. </li><li> Machen Sie den Myoblasten Medium durch Mischen Hams F-10 Nutrient Mixture (Sigma) mit 20% FBS (Atlanta Biologicals), 5 ng / L basischen Fibroblasten-Wachstumsfaktor (Promega), 1% Penicillin / Streptomycin (Invitrogen) und 1% Fungizone ( Invitrogen). </li><li> Bereiten Sie die Skelettmuskulatur Verdauung durch Auflösen von 1 g ~ 295 U / mg Collagenase 2 (Worthington) in 100 ml 2,4 U / ml Dispase-2 (Roche). Add 0,037 g CaCl 2 und gut mischen. Filter sterilisieren die Verdauung Puffer durch einen 0,2 um Filter Festplatte auf eine 10 ml Spritze und speichern Aliquots bei -20 ° C eingebaut Setzen Sie den Betrag für die Gewebe-Verdau bei 37 ° C zusammen mit den Myoblasten Medien benötigt. </li></ol> Teil 3: Myoblasten isoliert von der Skelettmuskulatur <ol><li> Mit einer Pinzette und eine kleine Schere, zu entfernen paraspinalen Muskeln von toten Neugeborenen Lewis Ratten durch Aufschneiden den Rücken hinunter entlang des Rückenmarks, Abziehen der Haut und Faszie Schichten und dann Ausschneiden der Muskeln. </li><li> In einer Gewebekultur Kapuze, platzieren Sie den ausgeschnittenen Muskeln in einem 50 ml konischen Röhrchen (BD Falcon) mit 40 ml 1X Hanks Balanced Salt Solution (HBSS) (Invitrogen) auf Eis gefüllt. Lassen Sie den Muskel-Streifen auf den Boden des Röhrchens absetzen und entfernen Sie vorsichtig die meisten der Flüssigkeit und Blut Überreste von Vakuumsauger mit einer sterilen Pasteurpipette in eine Kultur Haube (Baker). </li><li> Gießen Sie die geernteten Muskel Stücke auf einer 150 mm Kulturschale und entfernen Sie so viel von der restlichen Flüssigkeit wie möglich abgesaugt. Mit 2 einseitig geschliffene Klingen zerkleinern das Gewebe zu einer dicken Paste. Gießen vorgewärmten Verdauung Lösung auf der Paste und die Masse in eine frische 50 ml Tube mit einem 10-ml-Pipette. Während der enzymatischen Verdauung, wird das Gewebe gelegentlich verrieben (ohne Blasenbildung) mit einer 10 mL Pipette auf ein schnurloses Pipette-Aid (Drummond) ausgestattet. Auch hier ermöglichen das Gewebe ansiedeln und entfernen Sie die überschüssige Flüssigkeit. </li><li> Das Röhrchen auf einem Schaukelstuhl Plattform und verdauen bei 37 º C für ca. 30 min. </li><li> Sobald der Muskel wird verflüssigt, übergeben Sie die Lösung durch einen 70 um Zellsieb (BD Falcon) und Zentrifuge bei Raumtemperatur für 10 min bei 600 xg (Beckman GP). Mit einer Pasteurpipette und Absaugung, entfernen Sie so viel von der Flüssigkeit wie möglich und das Pellet mit 10 ml warmem Myoblasten Medium. </li><li> Pre-Platte die Zellen auf einer unbeschichteten 150 mm Gewebekulturplatte für 15 Minuten zur Beseitigung von Fibroblasten. </li><li> Übertragen Sie die Zellen, die noch nicht auf die Laminin-beschichtete cultureware befestigt und verdünnen, so dass es eine Platte für jede von 1 bis 2 Rattenbabys. Die Platte wird in einem befeuchteten Inkubator eingestellt bei 37 ° C mit 5% CO 2. </li></ol> Teil 4: Casting gezüchteten Gewebe-Konstrukten (5 mL) <ol><li> Nach 1 bis 2 Tagen, entfernen 10 der 150 mm Myoblasten Zellkulturplatten aus dem Inkubator, spülen Sie sie zweimal mit 37 ° C 1X PBS, und fügen Sie 4 ml warmes 0,05% Trypsin-EDTA auf jeder Platte. Bringen Sie die Platten in den Inkubator für 5 min. </li><li> Ernte der abgelösten Myoblasten aus den Platten in der Kultur Kapuze und sammeln die Flüssigkeit in einer 50 ml Tube (BD Falcon). Verwenden Sie 10 ml Myoblasten mittel-bis alle Platten Spül-und kombinieren diese mit den Zellen in die Zentrifugenröhrchen. Pellet die Zellen bei Raumtemperatur für 10 min bei 600 xg (Beckman GP) und entfernen Sie überschüssige Flüssigkeit wie in Schritt 3.5 beschrieben. </li><li> Resuspendieren Myoblasten Zellen in 1,6 ml Myoblasten Medium und auf Eis stellen. </li><li> Mit einer Pinzette vorsichtig Entfernen 4 konstruieren Formen aus Schritt 1.5 und spülen Sie sie zweimal mit 1X PBS. Vakuum-Sauggreifer aus alle Spuren von PBS mit einer Pasteurpipette, bevor jeder Form in einer 6-well Gewebe culture Platte (BD Falcon). </li><li> Sammeln Sie die anderen Reagenzien für Bau Vorbereitung nötig (10X Hams F10, Antibiotika, Typ-1-Kollagen [3,9 mg / mL] [6] und Matrigel ™) auf Eis und halten Myoblasten bei 37 º C. Kombinieren Sie 500 ul 10x Ham F10, 100 ul Penicillin / Streptomycin, 100 ul Fungizone, 1,6 mL Kollagen, und 750 ul Matrigel ™ in ein konisches 15 ml Tube. Mischen Sie die Lösung für 10 sec mit einem Mini-Vortexer (VWR) auf 10 und auf Eis stellen. </li><li> Anschließend fügen Sie 80 ul von NaHCO 3 und die Myoblasten Suspension aus Schritt 3,3 bis die Mischung aus Schritt 3.5. Vortex die gesamte Mischung für 10 sec und kehren der Röhre in den Eiskübel für ein paar Minuten, um die Lösung von Bläschen klar. </li><li> Vorsichtig warf das Gemisch in die Formen, bevor sie sich verfestigen mit einer 10 ml Pipette beginnt. Jede Form hält ca. 1 mL der viskosen Flüssigkeit. Versuchen Sie zu vermeiden Einführung von Luftblasen während dieses Vorgangs. </li><li> Sorgfältig Übertragung der Teller mit der cast Konstrukte in den Inkubator. Nach ca. 30 min, entfernen Sie die erstarrten Konstrukte aus dem Inkubator und vorsichtig Myoblasten Medium in jede Vertiefung zur Deckung des Gewebes zu konstruieren. Bringen Sie die Platte in den Inkubator (Abbildung 2). </li></ol> Teil 5: Repräsentative Ergebnisse Wenn dieses Protokoll korrekt ausgeführt wird, wird die Myoblasten-haltigen Gewebe konstruieren bereit für in vivo-Implantation (dh, wenn aus der Form entfernt) oder für weitere in vitro-Analysen nach 2 Tagen. <img src="/files/ftp_upload/1137/Figure1.jpg" alt="" /> Abbildung 1. Beispiele für abgeschlossen zu konstruieren Formen (siehe Schritt 1.5). <img src="/files/ftp_upload/1137/Figure2.jpg" alt="" width="400" height="321" /> Abbildung 2. A verfestigt Myoblasten-haltigen Gewebe konstruieren [1]. <img src="/files/ftp_upload/1137/Figure3.jpg" alt="" /> Abbildung 3. H &amp; E gefärbten Schnitten eines Myoblasten-haltigen Gewebe zu konstruieren. &quot;A&quot; zeigt einen Längsschnitt und &quot;B&quot; zeigt einen Querschnitt.

<ol><li>Choi, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+conduction+through+engineered+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Cardiac conduction through engineered tissue.</a> Am J Pathol. 169 (1), 72-85 (2006).</li>
<li>Rando, T. A., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+mouse+myoblast+purification%2C+characterization%2C+and+transplantation+for+cell-mediated+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Primary mouse myoblast purification, characterization, and transplantation for cell-mediated gene therapy.</a> J Cell Biol. 125 (6), 1275-1287 (1994).</li>
<li>Blau, H. M., Webster, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+human+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of human muscle cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 78 (9), 5623-5627 (1981).</li>
<li>Powell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+human+bioartificial+muscles+expressing+a+foreign+recombinant+protein+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered human bioartificial muscles expressing a foreign recombinant protein for gene therapy.</a> Hum Gene Ther. 10 (4), 565-577 (1999).</li>
<li>Vandenburgh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+skeletal+muscle+organoids+for+reversible+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered skeletal muscle organoids for reversible gene therapy.</a> Hum Gene Ther. 7 (17), 2195-2200 (1996).</li>
<li>Gallop, P. M., Seifter, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+Properties+of+Soluble+Collagens%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Enzymology%22%5BJournal%5D)">Preparation and Properties of Soluble Collagens.</a> Methods in Enzymology. 6, 635-641 (1963).</li>
</ol>

Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her durch die Institutional Animal Care und Verwenden Ausschusses im Kinderkrankenhaus Boston gesetzt durchgeführt.

Die Formen, in denen das Gewebe konstruieren gegossen werden kann in jeder Form und Größe hergestellt werden, allerdings muss es mindestens zwei Befestigungspunkte werden. Ansonsten bilden die Matrix und Zellen eine kugelförmige Struktur und die Zellen sterben. In der vorliegenden Protokoll, beschreiben wir die Verwendung eines Polyester-Mesh für diesen Zweck, aber wir haben auch erfolgreich Edelstahlgewebe verwendet. Offensichtlich werden größere Formen erfordern mehr Zellen und ein größeres Volumen der sonstigen Besta...

<table><tbody><tr><td>Silikon-Schlauch</td><td>VWR international</td><td>60985-724</td><td></td></tr><tr><td>Silikon-Klebstoff</td><td>Rhodia Silicones</td><td>MED ADH 4300 RTV</td><td></td></tr><tr><td>Polyester-Netz</td><td>McMaster-Carr</td><td>93185T17</td><td></td></tr><tr><td>Laminin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L2020</td><td></td></tr><tr><td>Nährstoffgemisch F-10 HAM</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>N6908</td><td></td></tr><tr><td>Fetales Rinderserum</td><td>Atlanta Biologicals</td><td>S11550</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin</td><td>Invitrogen</td><td>15140</td><td></td></tr><tr><td>Fungizone</td><td>Invitrogen</td><td>15290-018</td><td></td></tr><tr><td>Dispase-2</td><td>Roche Group</td><td>10295825001</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenase 2</td><td>Worthington Biochemical</td><td>46H8863</td><td></td></tr><tr><td>Grundlegender Fibroblasten-Wachstumsfaktor</td><td>Promega Corp.</td><td>G5071</td><td></td></tr><tr><td>150-mm-Zellkulturschalen</td><td>BD Biosciences</td><td>353025</td><td></td></tr><tr><td>0,05 % (1X) Trypsin-EDTA</td><td>GIBCO, by Life Technologies</td><td>25300</td><td></td></tr><tr><td>1X Hanks‘ Balanced Salt Solution</td><td>Invitrogen</td><td>14170-112</td><td></td></tr><tr><td>7,5 % NaHCO&lt;sub&gt;3&lt;/sub&gt;</td><td>GIBCO, by Life Technologies</td><td>25080-094</td><td></td></tr><tr><td>70 &amp;mu;m-Zellsieb</td><td>BD Biosciences</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>6-Loch-Platten</td><td>BD Biosciences</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>50-mL-Konivialflasche</td><td>BD Biosciences</td><td>352098</td><td></td></tr><tr><td>15-mL-Konivialflasche</td><td>BD Biosciences</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>0,2 &amp;mu;m-Filter</td><td>Nalge Nunc international</td><td>194-2520</td><td></td></tr></tbody></table>

herstellung von myogenic engineered tissue konstrukte

Fabrication of Myogenic Engineered Tissue Constructs

Trotz der Tatsache, dass die elektronische Herzschrittmacher sind lebensrettende medizinische Geräte, deren langfristige Performance bei pädiatrischen Patienten kann problematisch wegen der Einschränkungen durch ein Kind seiner geringen Größe und ihrer unvermeidlichen Wachstum auferlegt werden. Folglich gibt es einen echten Bedarf an innovativen Therapien speziell für pädiatrische Patienten mit Herzrhythmusstörungen entwickelt. Wir schlagen vor, dass eine leitende biologische Alternative, bestehend aus einer Kollagen-basierten Matrix mit autologen-abgeleiteten Zellen könnte besser zum Wachstum anzupassen, reduzieren die Notwendigkeit für wiederkehrende Operationen, und verbessern Sie die Qualität des Lebens für diese Patienten. In der vorliegenden Studie beschreiben wir ein Verfahren zur Einbindung primären Skelett Myoblasten Zellkulturen in einem Hydrogel-Matrix der Mode eine chirurgisch-implantierbaren Gewebe zu konstruieren, das als elektrische Leitung zwischen dem oberen und unteren Kammern des Herzens dienen. Letztlich erwarten wir mit dieser Art von gezüchteten Gewebe zu atrioventrikulären elektrische Leitfähigkeit bei Kindern mit komplettem Herzblock wiederherzustellen. In Anbetracht dieser, isolieren wir Myoblasten aus der Skelettmuskulatur von neonatalen Lewis Ratten und Platte sie auf Laminin-beschichtete Gewebe Kulturschalen mit einer modifizierten Version des etablierten Protokollen<sup&gt; [2, 3]</sup&gt;. Nach 1-2 Tagen werden kultivierten Zellen gesammelt und mit Antibiotika versetzt, Typ-1-Kollagen, Matrigel ™ und NaHCO<sub&gt; 3</sub&gt;. Das Ergebnis ist eine zähflüssige, einheitliche Lösung, die in eine Form von nahezu beliebiger Größe und Form gegossen werden kann<sup&gt; [1, 4, 5]</sup&gt;. Für unsere Gewebe Konstrukte beschäftigen wir Typ-1-Kollagen aus fetalen Lamm Haut unter Verwendung von Standardverfahren isoliert<sup&gt; [6]</sup&gt;. Sobald das Gewebe bei 37 ° C verfestigt, Kulturmedien ist sorgfältig auf die Platte gegeben, bis das Konstrukt ist untergetaucht. Die gezüchteten Gewebe wird dann weiter zu verdichten durch Dehydratisierung für 2 weitere Tage erlaubt, an welcher Stelle es reif ist<em&gt; In-vitro-</em&gt; Beurteilung oder chirurgische Implantation.

Hier zeigen wir die Herstellung von Kollagen-basierten, baut Gewebe mit Skelettmyoblasten. Diese 3-D konstruiert Konstrukte verwendet zu ersetzen oder zu reparieren Gewebe werden<em&gt; In vivo</em&gt;. Für unsere Zwecke haben wir diese als AV-elektrische Leitung für die Reparatur von kompletten AV-Block entwickelt<sup&gt; [1]</sup&gt;.

Herstellung von Myogenic Engineered Tissue Konstrukte

Obwohl elektronische Herzschrittmacher lebensrettende Medizinprodukte sind, kann ihre langfristige Leistungsfähigkeit bei pädiatrischen Patienten aufgrund von ... problematisch sein.

Dieses Verfahren beginnt mit der Gewinnung von Skelettmuskelgewebe aus neonatalen Lewis-Ratten. Aus diesem Gewebe isolieren wir Myoblastenzellen. Diese Myoblasten werden zwei Tage lang in Zellkulturschalen kultiviert und anschließend geerntet und in eine kollagenbasierte Gewebekonstrukt-Mischung eingearbeitet.Diese Mischung wird vorsichtig in eine Form pipettiert, die in Kulturmedium eingetaucht ist, und bei 37 Grad Celsius inkubiert. Hallo, ich bin Christina Pesach aus dem Labor von Douglas Cowan an der Abteilung für Anästhesiologie im Children's Hospital, Boston, und der Harvard Medical School. Heute zeigen wir Ihnen ein Verfahren zur Herstellung myogener, gewebetechnisch konstruierter Strukturen.Wir verwenden dieses Verfahren, um ein konstruiertes Gewebe zur Implantation im Herzen herzustellen. Unser Ziel ist es, eine elektrische Verbindung zwischen den oberen und unteren Herzkammern herzustellen, als alternative Therapie zur Implantation eines Herzschrittmachers bei Kindern mit komplettem Herzblock. Beginnen wir also.Bei der Konstruktion wird eine Gussform verwendet, um eine Form für den chirurgisch implantierbaren, kollagenbasierten Gewebekonstrukt bereitzustellen. In diesem V

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren Matrix-Gel aus dezellularisierte Gewebe und Injektion in...

Herstellung von biologisch abgeleiteten Injizierbare Materialien für Myocardial Tissue Engineering

Engineered Muskelgewebe hat ein großes Potenzial in der regenerativen Medizin, als Krankheit Modell und auch als alternative Quelle für Fleisch. Hier beschreiben wir die Konstruktion von einem Muskel-Konstrukt, in diesem Fall von der Maus Myoblasten Vorläuferzellen, und die Stimulation durch elektrische Impulse.

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Die Erzeugung von ausgerichteten Myokardgewebe ist eine wesentliche Voraussetzung für die Anpassung der jüngsten Fortschritte in der Stammzellbiologie, um klinisch nützliche Zwecke. Hier beschreiben wir einen Mikrokontaktdruck Ansatz für die präzise Steuerung der Zelle Form und Funktion. Mit hoch gereinigte Populationen von embryonalen Stammzellen abgeleitete kardiale Vorläuferzellen, wir erzeugen dann anisotropen funktionale Herzmuskelgewebe.

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Dieses Modell geht von einem System myofibroblast besiedelten Fibringel, die verwendet werden, um die endogene Kollagen (Re-) Organisation in Echtzeit in einer zerstörungsfreien Weise studieren kann. Das Modell ist sehr abstimmbaren, wenn er auf verschiedene Zellquellen Medium Zusatzstoffe verwendet werden, und kann leicht an spezifische Anforderungen angepasst werden.

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Um hochorganisierte Strukturen aus komplexem Gewebe zu erzeugen, muss man mehrere Materialien und Zelltypen zu einem integrierten Komposit zusammenfügen.  Dieses kombinatorische Design umfasst organspezifische geschichtete Zellblätter mit zwei unterschiedlichen biologisch abgeleiteten Materialien, die eine starke fibröse Matrixbasis enthalten, und Endothelzellen zur Verbesserung der Bildung neuer Gefäße.

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In dieser Arbeit stellen wir eine Technik zur schnellen Herstellung von lebendem Gefäßgewebe durch direkte Kultivierung von Kollagen, glatten Muskelzellen und Endothelzellen vor. Darüber hinaus wird ein neues Protokoll zur mechanischen Charakterisierung von künstlich hergestellten Gefäßgeweben beschrieben.

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Herstellung von benutzerdefinierten Agarose Brunnen für die Aussaat von Zelle und Gewebe Ring Selbstmontage mit 3D-Druck Formen

Dieses Manuskript beschreibt ein detailliertes Protokoll zur Herstellung von Arrays von 3D-Mikrogeweben der menschlichen Skelettmuskulatur und minimalinvasiven Downstream-In-situ-Funktionsassays, einschließlich kontraktiler Kraft- und Kalziumhandhabungsanalysen.

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Dieses Protokoll stellt Methoden zur Erzeugung von 3D-konstruiertem Herz- und Skelettmuskelgewebe bereit und beschreibt deren Verwendung in präklinischen Arzneimittel-Screening-Modalitäten. Die beschriebenen Methoden verwenden ein magnetisches Sensorsystem, um die gleichzeitige Beurteilung von 24 Geweben parallel zu ermöglichen.

Präklinische Arzneimitteltests in skalierbaren 3D-Muskelgeweben

Es wird eine reproduzierbare Methode zur Erzeugung von 3D-Myokardgeweben vorgestellt, bei der MEW-Gerüste (Melt Electrospinning Writing), Polycaprolacton (PCL)-Gerüste und Fibrin-Hydrogele mit hiPSC-abgeleiteten Kardiomyozyten und Fibroblasten kombiniert werden. Diese Technik bietet eine präzise Kontrolle über die Gerüstarchitektur und kann in präklinischen Arzneimitteltests und bei der Modellierung von Herzerkrankungen eingesetzt werden.

3D-Generierung von humanem Myokardgewebe mittels Schmelzelektrospinnen, Schreiben von Polycaprolacton-Gerüsten und hiPSC-abgeleiteten Herzzellen

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