Zubereitung und Verwendung von Phantom Läsionen Feinnadelpunktion Biopsie Praxis
29. September 2009
Das Üben der Feinnadelpunktion Biopsie (FNP) der Auszubildenden ist relativ schwierig, aufgrund des Fehlens eines leicht verfügbar, entsprechende Läsion. Erstellung eines AV Phantomspeisung Läsion für das Üben der FNAB Verfahren und Mastering Kompetenz ist relativ einfach.
Um eine Phantomläsion herzustellen, schneiden Sie ein sechs mal sechs Zoll großes Stück Pappe als Grundplatte zurecht. Bedecken Sie die Grundplatte mit einer halb Zoll dicken Schicht Dichtmasse. Schneiden Sie dann ein zweieinhalb Zoll langes Stück Banane ab und drücken Sie es vorsichtig in die Dichtmasse.
Die Banane dient als Phantom-Läsionskern. Betten Sie den Kern vollständig in Kitt ein, ohne Luftblasen einzuschließen. Bedecken Sie den Kern mit einem Stück Frischhaltefolie und formen Sie ihn zu einem glatten Hügel. Lassen Sie die Kitt-Montage an einem warmen Ort aushärten, nachdem der Kitt fest geworden und ausgehärtet ist.
Entfernen Sie die Plastikfolie, üben Sie die Feinnadelaspirationskompetenz, um eine Probe aus dem Bananenkern zu entnehmen, und üben Sie die Vorbereitung von Ausstrichen. Ich bin Dr. Vino von der Abteilung für Zytologiepathologie an der Pathologieabteilung des Medical College of Wisconsin. Und ich bin Dr. George Varszegi, ein Facharztassistent in Zytologiepathologie in derselben Abteilung.
Heute werden wir ein Verfahren zur Herstellung einer Phantomläsion demonstrieren, um die Beherrschung der FNAV-Verfahrensdurchführung mithilfe leicht verfügbarer und einfacher Werkzeuge und Materialien zu üben. Wir verwenden diese Technik in der Regel, um Assistenzärzten in Zytologie und Pathologie die endgültige Feinnadelaspirationsbiopsie näherzubringen. Später in ihrer Ausbildung werden die Assistenzärzte ihre Fähigkeiten verfeinern, indem sie unter Aufsicht von Dozenten Feinnadelaspirationen an klinisch tastbaren Läsionen durchführen.
Beginnen wir also. Bereiten Sie die Phantomläsion ein oder zwei Tage vor der geplanten FNAB-Übungssitzung vor. Bevor Sie beginnen, legen Sie auf dem Arbeitstisch ein Stück Pappe, eine Dichtungspistole, eine ungeschälte Banane und Frischhaltefolie bereit.
Der erste Schritt bei der Herstellung einer Phantomläsion besteht darin, ein sechs mal sechs Zoll großes Stück Pappe als Grundplatte zuzuschneiden. Danach schneidet man ein etwa zwei Zoll langes Stück Banane ab, das als Kern der Phantomläsion dient. Sobald der Kern der Phantomläsion bereit ist, nimmt man eine Kartuschenpresse und verteilt etwa eine halb Zoll dicke Schicht Dichtmasse auf der Grundplatte.
Drücken Sie den Phantomläsionskern leicht in die feuchte Dichtmasse. Geben Sie nun weitere Dichtmasse über den Phantomläsionskern, um ihn vollständig einzubetten. Achten Sie darauf, beim Arbeiten mit Handschuhen keine Luftblasen in der Dichtmasse einzuschließen.
Verteilen Sie die Dichtmasse mit der Hand über den Phantomläsionskern, um sicherzustellen, dass dieser vollständig umschlossen ist. Bedecken Sie nun den Hügel mit einem sechs mal sechs Zoll großen Stück Frischhaltefolie und formen Sie den Hügel zu einer glatten, konvexen Form. Stellen Sie den Dichtmassen-Hügel an einen warmen Ort, um ihn sechs bis acht Stunden länger aushärten zu lassen, als für Ihre spezielle Marke der Dichtmasse empfohlen wird.
Die Dichtmasse härtet bei Luftkontakt aus. Sie können den Haufen bei Raumtemperatur über 60 Grad Fahrenheit stehen lassen oder bei 37 Grad Celsius inkubieren, um die Aushärtung zu beschleunigen. Nach der Aushärtung ist die Dichtmasse fest, und Sie können die Plastikfolie leicht ablösen.
Die FNA-Phantomläsion ist nun bereit, um die FNA-Prozedur zu üben. Nachdem Sie nun Ihre Phantomläsion vorbereitet und aushärten lassen haben, können Sie sie zur Übung des FNAB-Verfahrens verwenden. Hier verwenden wir den Gewebeentnehmer mit funktionellem Ventil, aber grundsätzlich kann jedes FNA-System verwendet werden.
Die THFB besteht aus einer Nadel zum Durchstechen der Probe, einer Nadelhalterung zum Sammeln des aspirierten Materials, einer Spritze zur Steuerung des Drucks innerhalb des Geräts und einem Ventil zum Verbinden und Trennen der Nadelhalterung von der Spritze. Beginnen Sie damit, die FNA-Baugruppe vorzubereiten, wobei das Ventil, das die Nadelhalterung mit der Spritze verbindet, geschlossen ist. Ziehen Sie nun den Spritzenkolben heraus, um ein Vakuum im Spritzenzylinder zu erzeugen.
Danach die Nadelspitze in die Läsion einführen. Das Ventil öffnen, um die Nadelhülse mit dem Vakuum im Spritzenkörper zu verbinden. Das Vakuum saugt Material aus der Läsion in die Nadel und in die Nadelhülse.
Bewegen Sie die Nadel hin und her in der Läsion, um eine repräsentative Probe zellulärer Bestandteile zu aspirieren. Halten Sie das Vakuum aufrecht und proben Sie verschiedene Bereiche der Läsion, indem Sie die Nadel in unterschiedlichen Richtungen in die Läsion einführen. Wenn die Probenahme abgeschlossen ist, drehen Sie das Ventil, um das Vakuum im Spritzenkörper zu unterbrechen und den Druck durch Öffnen des Ventils mit den äußeren Bedingungen auszugleichen.
Drehen Sie als Nächstes das Ventil, um die Verbindung zur Außenwelt und zum Spritzenzylinder zu trennen. Entfernen Sie die Nadel bei geschlossenem Ventil von der Läsion. Wenn das Ventil geschlossen bleibt, wird ein leichter Unterdruck am Hubschraubenende aufrechterhalten und verhindert, dass die Probe durch Kapillarwirkung zurück in die Läsion abfließt.
Ähnlich wie beim Pipettieren ist Ihre Gewebeprobe nun sicher in der Nadelspitze. Sobald Sie die Nadel aus dem Präparat entfernt haben, bringen Sie den aspirierten Inhalt auf einen Objektträger, um einen Direktausstrich herzustellen. Nachdem Sie einen Tropfen der Aspiratprobe auf den Objektträger gebracht haben, können Sie diesen auf verschiedene Arten ausstreichen, abhängig von der Beschaffenheit des Aspirats. Üblicherweise verteilen wir die Probe zwischen zwei Objektträgern mit der hier gezeigten Methode.
Falls eine tatsächliche Probe mit Blut verdünnt wurde, überschüssiges Blut ablaufen lassen, indem man die Objektträger vor dem Auflegen des zweiten Glasobjektträgers neigt. Wenn das Aspirat hauptsächlich eine Suspension ohne mikroskopische Fragmente ist, wie beispielsweise bei lymphoproliferativen Läsionen, kann es mit der Rippenmethode verteilt werden, bei der die Kante eines Objektträgers verwendet wird, um auf einem anderen Objektträger eine rippenartige Reihe von Ausstrichen zu erzeugen, oder es kann die Ausstrichmethode angewendet werden, bei der ein Objektträger verwendet wird, um auf einem zweiten Objektträger einen Film zu erzeugen. Sobald die Ausstriche vorbereitet sind, können sie auf verschiedene Weise bearbeitet und fixiert werden.
Für verschiedene Färbemethoden ist es am besten, alle Ausstriche innerhalb von ein bis zwei Minuten schnell an der Luft zu trocknen. Das Trocknen der dickeren und feuchteren Ausstriche kann beschleunigt werden, indem man die Objektträger seitlich durch die Luft bewegt oder vorzugsweise einen Föhn oder einen handgehaltenen, batteriebetriebenen tragbaren Ventilator verwendet. Bei Verwendung eines Ventilators ist Vorsicht geboten, um eine Aerosolbildung zu verhindern, insbesondere bei Läsionen, von denen erwartet wird, dass sie infiziert sind. Nach dem Trocknen sollten die Ausstriche entsprechend den Anforderungen Ihres Experiments gefärbt werden.
Hier demonstrieren wir die Färbung eines luftgetrockneten Ausstrichs mit D-Schnellfärbung, einer der Romanowski-Färbungen, bezüglich der Inkubationszeiten. Befolgen Sie die Herstelleranweisungen. Wir stellen fest, dass die Lufttrocknung die Färbeklarheit erheblich verbessert, wie in diesem Beispiel von mit Pap gefärbten Ausstrichen gezeigt.
Die Analyse dieser ersten Färbungen bestimmt weitere Untersuchungen, die Sie möglicherweise durchführen möchten, wie beispielsweise eine gezielte Zellblock-Elektronenmikroskopie, mikrobiologische Kulturen oder andere. Die erfolgreiche Durchführung der Phantombiopsie ermöglicht eine korrekte Aspiration von Läsionsmaterial, in diesem Fall pastösem pflanzlichen Material aus Banane. Dieses Material kann auf Objektträgern verteilt werden, um das Ausstrichen und Färben zu üben.
Wir haben Ihnen soeben gezeigt, wie man eine Phantomläsion zur Übung der Feinnadelaspirationsbiopsie (FNAB) vorbereitet. Während Sie dieses Experiment durchführen, ist es wichtig, daran zu denken, dass die Phantomläsion mindestens 36 Stunden vor der Eignungsprüfung vorbereitet werden sollte, da das Dichtungsgel Zeit zur Aushärtung benötigt. Ein weiterer wichtiger Punkt ist die Anwendung und Freigabe des Vakuums in der richtigen Reihenfolge, um während des FNAV-Verfahrens optimales Aspiratmaterial zu erhalten.
Das war's. Vielen Dank fürs Zuschauen und viel Erfolg beim Üben. Und nochmals herzlichen Dank.
Übersicht
In diesem Artikel wird die Herstellung einer Phantomesion zur Übung von Feinnadelaspirationsbiopsien (FNAB) beschrieben, was für Auszubildende von wesentlicher Bedeutung ist. Die beschriebene Methode ist einfach und verwendet leicht verfügbare Materialien.
Wesentliche Studienkomponenten
Bereich der Wissenschaft
- Feingewebepathologie
- Medizinische Ausbildung
- Biopsietechniken
Hintergrund
- Feinnadelaspirationsbiopsien (FNAB) sind für Auszubildende herausfordernd.
- Der Zugang zu geeigneten Läsionen zum Üben ist oft begrenzt.
- Die Erstellung einer Phantomläsion ermöglicht eine effektive Schulung.
- Diese Technik wird verwendet, um Auszubildende in FNAB-Verfahren einzuführen.
Zweck der Studie
- Eine einfache Methode zur Herstellung einer Phantomesion demonstrieren.
- Die Beherrschung der FNAB-Techniken durch Auszubildende verbessern.
- Ein praktisches Schulungsinstrument für Assistenzärzte und Fachärzte in der Zytologie bereitstellen.
Verwendete Methoden
- Ausschneiden von Pappe, um eine Grundplatte herzustellen.
- Verwenden von Dichtmasse, um eine Banane als Phantomläsionskern einzubetten.
- Aushärten der Dichtmasse, um eine stabile Struktur zu bilden.
- Üben von FNAB-Techniken unter Verwendung des vorbereiteten Phantomläsionsmodells.
Hauptergebnisse
- Die Phantomläsion kann mit minimalem Materialaufwand leicht hergestellt werden.
- Auszubildende können die FNAB-Techniken effektiv am Phantom üben.
- Die Methode ermöglicht den Erwerb von Fähigkeiten, bevor mit echten Läsionen gearbeitet wird.
- Trocknung an der Luft und Färbetechniken verbessern die Qualität der Ausstriche.
Schlussfolgerungen
- Die Herstellung einer Phantomläsion ist ein wertvolles Schulungswerkzeug für die FNAB.
- Diese Methode kann das Lernerlebnis für Pathologie-Auszubildende verbessern.
- Einfache Materialien können zur Erstellung wirksamer Schulungshilfen verwendet werden.
Häufig gestellte Fragen
Ausschlaggebende Bedeutung für die Industrie
Diese Methode bietet ein kostengünstiges, reproduzierbares Phantommuster für das Training der Feinnadelaspirationsbiopsie (FNAB) und schließt damit eine entscheidende Lücke bei der präklinischen Fertigkeitsentwicklung für angehende Pathologen. Durch die Möglichkeit, Gewebeaspiration, Ausstrichpräparation und Färbeprotokolle wiederholt zu üben, fördert sie den frühen Aufbau von Kompetenzen in der diagnostischen Zytologie. Das Modell verbessert die Vorbereitung für das Training, bevor die Auszubildenden klinischen Läsionen ausgesetzt werden, verringert die Variabilität der Leistungen der Trainees und unterstützt eine standardisierte Bewertung der Fähigkeiten über verschiedene Einrichtungen hinweg.
Strategische Anwendungen in der Biopharma-Forschung und -Entwicklung
Frühe Entdeckung und Zielvalidierung
- Wissenschaftlicher Wert: Ermöglicht die hypothesengeleitete Anwendung von Läsionsentnahmetechniken, um die Prozedurkonsistenz bei der Bewertung präklinischer Modelle zu verbessern.
- Operativer Wert: Standardisiert die Schulung von Personal, das an präklinischen Biopsieabläufen beteiligt ist, und verringert die vom Verfahren abhängige Variabilität der Probenqualität.
Screening und Assay-Entwicklung
- Wissenschaftlicher Wert: Erzeugt aspiriertes Material, das für die zytologische Analyse auf Objektträgern geeignet ist, und unterstützt die Bereitschaft für Biomarker-Assays an präklinischen Proben.
- Operativer Wert: Ermöglicht die reproduzierbare Herstellung und Färbung von Ausstrichen und verbessert so die Konsistenz der nachgeschalteten analytischen Ergebnisse.
Translationale und präklinische Forschung
- Wissenschaftlicher Wert: Verbindet Entdeckung und präklinische Validierung, indem Personal in Aspirationstechniken für Läsionen geschult wird, die auf die Probennahme bei Tumoren oder Krankheitsmodellen anwendbar sind.
- Operativer Wert: Unterstützt die Kontinuität von in-vitro-Modellen zur in-vivo-Läsionsbeurteilung, indem die Schulung standardisierter Biopsietechniken gewährleistet wird.
Pipeline- und Workflow-Integration
Die Methode integriert sich in den frühen Entdeckungsworkflow, indem das Personal vor der Arbeit mit präklinischen Krankheitsmodellen in Techniken zur Läsionsentnahme geschult wird, um eine zuverlässige Probenentnahme für nachgeschaltete Analysen sicherzustellen.
- Entdeckungsbiologie: Unterstützt die Hypothesenprüfung, indem konsistente Aspiration von Läsionssurrogaten zur zytologischen Beurteilung in präklinischen Modellen ermöglicht wird.
- Screening: Verbessert die Assay-Bereitschaft, indem Personal geschult wird, hochwertige Ausstriche für biomarker- oder pathologiebasierte Screening-Assays herzustellen.
- Analytik: Ermöglicht quantitative und qualitative zytologische Analysen durch geübte Techniken der Ausstrichherstellung und Färbung.
- Translationale Forschung: Knüpft an die präklinische Validierung an, indem die Schulung standardisierter Biopsietechniken für die Probennahme krankheitsrelevanter Läsionen einheitlich erfolgt.
- Unternehmensweite Wiederverwendung: Bietet eine wiederverwendbare, kostengünstige Schulungsplattform, die an mehreren Schulungsstandorten und in verschiedenen präklinischen Programmen eingesetzt werden kann.
Operative und unternehmerische Auswirkungen
- Wissenschaftlicher Wert: Verbessert die Vorhersagegenauigkeit bezüglich der Qualität präklinischer Proben, indem die vom Bediener abhängige Variabilität der Aspirationstechnik verringert wird.
- Operationaler Wert: Steigert die Standardisierung und Skalierbarkeit der zytopathologischen Ausbildung in verteilten Forschungsteams.
- Strategischer Wert: Verringert biologische Risiken in fortgeschrittenen Phasen, indem sichergestellt wird, dass das Personal vor der Arbeit mit wertvollen präklinischen Modellen beherrscht, wie Läsionen korrekt entnommen werden.
- Portfolio-Implikation: Unterstützt risikoadjustierte Entscheidungsfindung, indem das Vertrauen in die Integrität der aus präklinischen Biopsien gewonnenen Daten gesteigert wird.
Durchführungsaspekte
- Erfordert grundlegende Fachkenntnisse in der Zytologie, um die korrekte Aspirations-, Ausstrich- und Färbetechnik sicherzustellen.
- Benötigt Zugang zu Dichtungspistolen, Pappe, Silikon-Dichtmasse, Banane oder Wurst, Frischhaltefolie und Standard-FNA-Biopsieausrüstung.
- Setzt eine standardisierte Vorgehensweise im Team bei der Anwendung und Freigabe des Vakuums voraus, um eine gleichbleibende Qualität des Aspirats zu gewährleisten.
- Erfordert Anpassungen bei der Modellierung unterschiedlicher Läsionstexturen oder -dichten, die über weiche biologische Ersatzmaterialien hinausgehen.
- Eingeschränkt durch die Biodegradierbarkeit organischer Kerne (Banane/Wurst), wodurch die Vorbereitung einen bis zwei Tage vor der Verwendung erfolgen muss.
