Wolbachia Bakterielle Infektion in Drosophila

Mein Name ist Voia Friedman. Ich bin assoziierter Forscher an der Princeton University. Und heute werde ich Ihnen von einigen Protokollen erzählen, die ich entwickelt habe, um Trans-Infizierte zu infizieren, um mich zunächst zu isolieren, um von infizierten Fliegen aus dem Heli zurückzukehren und später um zu helfen, das Heli-Futter an nicht betroffene Flüge zu injizieren.

Im Grunde ist dies also ein sehr einfaches Protokoll, um ihn auf die Grundlagen zu isolieren. Und Sie werden dieses Gerät verwenden, von mepo, das einen Filter enthält, der auf eine E.So geht, die Sie im Grunde brauchen, um Sie zu platzieren, wir beginnen mit etwa hundert Fliegen. Man anisiert die Fliegen, man legt sie in das Filtergerät, man kann einfach einen Trichter verwenden und das wird unsere andere Passform sehr einfach auf dieses Gerät setzen und es mit 70% Ethanol waschen.

Du nimmst einfach das, nimmst die Zukunft weg, du kannst das Ethanol wegwerfen, und dann, nach dem dreimaligen letzten Waschen, machst du es mit Molekülwasser, weil du nicht willst, dass die Bakterien von dem mit Spuren von Ethanol versehen sind. Nun, und dann gehst du einfach zu einer neuen Waffentür und, und dann drehst du dich zwei Minuten lang auf ein Mikro, echtes Mikro und später, wie du das injizieren kannst. Er füttert nur nicht betroffene Fliegen.

Nehmen Sie also im Grunde ein Doppelklebeband und normalerweise haben diese Doppelklebebänder zwei Seiten, eine Seite ist ein Aufkleber als die andere. Lassen Sie also die Aufkleberseite nach oben, denn das ist die Seite, die Sie aufkleben werden, die darauf fliegt. Und im Grunde genommen werden Sie, das Gasgerät, wenn Sie dieses Licht darauf haben, Sie werden keinen Gasfluss haben und die Fliegen, die Sie aufwecken, wenn sie oben auf der Rutsche sind.

So können Sie einfach den Fluss lenken, indem Sie eine kleine Haube, eine kleine Kammer mit Klebeband herstellen. Dann lenkt man das Gas über die Fliegen. Also dann steckst du dein, dieses Licht hier mit dem Klebeband und du, du hast deine Fliegen.

Klebe die Fliegen auf die Oberseite des Klebebandes, alle in der gleichen Ausrichtung, und richte ihren Kopf in die Richtung, aus der du die Nadel bringen wirst. Denn dann kannst du einfach über den Flügel drüber, du stellst sicher, dass du nicht fliegen willst, da sie fliegen. Wenn sie während des Eingriffs aufgewacht sind, möchten Sie nicht, dass sie verschwinden.

Achte also darauf, dass du ein wenig Spitze und Druck gegen die, die, die Flügel der Fliege auf den Schwanz nimmst. Und es ist in Ordnung, wenn ihre Flügel beschädigt werden. Und wenn man die Fliegen loswird, wenn man die Fliegen in die Injektion nimmt, werden sie höchstwahrscheinlich sowieso ihre Flügel verlieren, also werden sie überleben.

Das kann, das kann nützlich sein, weil Sie die Fliegen nicht verlieren werden, also gibt er ein Mineralöl auf das Mikrometer für die Rückseite der Nadel, dann die Nadelinjektion polar, und dann können Sie einfach den Druck einstellen, um das Material bis zur Spitze der Nadel zu bringen. Ich, ich habe irgendwo zwischen 10 und 15 Nanoliter injiziert, aber so lange, solange ich konsistent bin. Okay, ein wichtiges Detail dieses Experiments ist, dass die Fliege, sobald die Anwendung injiziert wird, wenn Sie die Nadel sehen, so weit wie möglich durch den oberen Teil des Bauches kommen muss.

Denn hier hat man im Grunde, wenn die Nadel eindringt, ein, a, a, a, einen größeren Raum, um auf und ab zu gehen. Und im Grunde genommen ist es weniger wahrscheinlich, dass sie während des Fluges in lebenswichtige Organe eindringen, wenn sie in der Nähe der Nagelhaut sind. Es ist sehr unwahrscheinlich, dass Sie ein Loch in Ihren Bauch schlagen, zum Beispiel, wenn das den Flug tötet, den Sie bei der Operation durchführen.

Mein Name ist Voia Friedman. Ich bin Associate Researcher an der Princeton University im Labor von Eric Hels. Und heute möchte ich Ihnen von diesem Protokoll erzählen, das Sie gerade gesehen haben, die Demonstration.

Dieses Protokoll wurde erstellt, weil wir beweisen wollten, dass UBA in der Lage ist, Gewebe zu durchqueren. Damit ist das UBA einer der erfolgreichsten intrazellulären Paras auf dem Antlitz der Erde. Infiziert 20 bis 70 % der Insekten und viele Partikel

Und es ist auch sehr wichtig in Bezug auf menschliche Krankheiten, da sie auch Nematoden infizieren, die Krankheiten wie Flussblindheit oder s und ssis übertragen. Und so, und CCA ist unser obligatorisches Endo, in diesen Würmern. Und es gibt ein großes, sehr großes Interesse daran, CCA auch als Mittel zur Kontrolle von parasitären Krankheiten zu verwenden, die durch Mücken und Danny und dies und durch Mücken wie Malaria und Dengue übertragen werden.

Das, das, dieses Protokoll wurde im Grunde entwickelt, um zu zeigen, dass CCA, sobald es sich in der Bauchhöhle einer Fliege befindet, das Gewebe durchqueren und den Keim erreichen kann. Im Grunde genommen ist das, was Sie hier sehen können, das Oph des Drosophila-Eierstocks und gehen Sie zurück, sobald es im Blatt vorhanden ist, kann es ein rosa Peronial kreuzen. Sie, die um den Eierstock herum ist.

Und dann durchqueren sie eine Muskelschicht. Und tatsächlich ist einer der ersten Orte, an die sie in den Eierstock gehen, das Bild der somatischen Stammzellen. Und dann können sie die Keimbahn erreichen.

Und dieses Bakterium wird auf die gleiche Weise übertragen, wie Mitochondrien übertragen werden, durch die Mutter, durch die Muttercyop-Pflanzen, die in der Eizelle vorhanden sind. Also müssen sie natürlich in der Keimbahn vorhanden sein. Deshalb wurde dieses Protokoll entwickelt.

Und dieses Protokoll kann sehr nützlich sein, um im Grunde traditionell die Art und Weise zu erreichen, wie Menschen versuchen würden, WBAA zu infizieren, im Grunde genommen WBAA zu nehmen und eine neue Insektenart einzuführen. Es würde durch Mikroinjektionen in den Embryo geschehen. Aber diese sind viel komplizierter.

Und im Grunde machen wir uns hier nur die Biologie zunutze, da sie in der Lage sind, Gewebe zu durchqueren und in die Stammzellgewebe zu gelangen, von wo aus sie in die Keimbahn gelangen können. Das macht es einfacher, UBA von bestimmten, von bestimmten Insektenarten zu nehmen, die infiziert sind und auf nicht infizierte Arten übertragen werden können. Wahrscheinlich denke ich, es ist die Injektion selbst.

Grundsätzlich musst du darauf achten, die Fliege so gut wie möglich zu mobilisieren. Wir verwenden doppelseitiges Klebeband und Sie müssen die Nadel so nah wie möglich an der Fliege durchdringen, damit Sie nicht zu tief gehen. Und es ist weniger wahrscheinlich, dass wir die Fliege töten werden, nachdem sie die Operation durchgeführt haben.