Name: Wolbachia Bakterielle Infektion in Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Erfahren Sie ein effizientes Protokoll zur Isolierung von Wolbachia aus infizierten Drosophila-Fliegen und deren Injektion in nicht infizierte Fliegen. Diese Methode erleichtert die Erforschung von Infektionsdynamiken.

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wolbachia bakterielle infektion in drosophila

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia Bakterielle Infektion in Drosophila

Mein Name ist Voia Friedman. Ich bin assoziierte Forscherin an der Princeton University. Heute werde ich Ihnen einige Protokolle vorstellen, die ich entwickelt habe, um eine Transinfektion durchzuführen, ursprünglich zur Isolierung und Rückgewinnung von Helicobacter aus infizierten Fliegen, und später auch zur Injektion des Helicobacter-Präparats in nicht infizierte Fliegen.Im Grunde handelt es sich hierbei um ein sehr einfaches Protokoll, um ihn für Grundlagenzwecke zu isolieren. Sie verwenden dabei ein Gerät von mepo, das einen Filter enthält, der auf ein E. passt. Man beginnt im Grunde genommen mit etwa hundert Fliegen. Sie betäuben die Fliegen, geben sie in die Filtervorrichtung, können einfach ein Trichter verwenden, der sich sehr leicht auf dieses Gerät aufsetzen lässt, und spülen sie mit 70 % Ethanol ab.Sie nehmen einfach die zukünftige weg, können Sie das Ethanol wegwerfen, und danach, nach dreimaligem Waschen, waschen Sie zum Schluss mit Molekularwasser, da Sie keine Bakterien mit Ethanolrückständen haben möchten. Nun gehen Sie einfach zu einer neuen Probendose und zentrifugieren zwei Minuten lang in einem echten Mikro. Später können Sie dann injizieren. Er füttert nur unb

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Forschung

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Biologie

Parasitoiden (parasitäre) Wespen stellen eine große Klasse von natürlichen Feinde vieler Insekten...

Eine Einführung in die parasitischen Wespen<em&gt; Drosophila</em&gt; Und die antiparasitäre Immune Response

Quelle: Siva-Jothy, J. A., et al. Orale bakterielle Infektion und Ausscheidung bei Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)Das Video zeigt die orale Infektion von Drosophila melanogaster mit pathogenen Bakterien. Dazu gehört die Herstellung von Infektionsfläschchen und der Transfer ausgehungerter Fliegen, um die Bakterienaufnahme zu ermöglichen. Das Verfahren erfasst die Darmbesiedlung, gefolgt von Oberflächensterilisation und Homogenisierung der Fliegen. Schließlich zeigt es die...

Orale Infektion von Drosophila melanogaster mit pathogenen Bakterien

Quelle: Hiroyasu, A., D et al., Extraktion von Hämozyten aus Drosophila melanogaster-Larven zur mikrobiellen Infektion und Analyse. J. Vis. Exp. (2018)Dieses Video zeigt das Verfahren, um eine bakterielle Infektion bei Drosophila-Larven zu etablieren, indem sie in einen bakteriellen Tropfen gesetzt und mit einer Wolframnadel gesticht werden. Die Larven werden dann auf einer gerillten, nährstoffreichen Agarplatte inkubiert, um die Interaktionen zwischen Wirt und Pathogen zu untersuchen.

Etablierung einer bakteriellen Infektion bei Drosophila-Larven

Drosophila melanogaster ist ein hervorragender Modellorganismus für die Untersuchung des angeborenen Immunsystems und der physiologischen Folgen von Infektionen und Krankheiten. Dieses Protokoll beschreibt, wie robuste und quantitativ wiederholbare bakterielle Infektionen an D. melanogaster verabreicht werden können und wie der Schweregrad der Infektion anschließend gemessen und die Immunantwort des Wirts quantifiziert werden kann.

Systemische bakterielle Infektion und Immunabwehr Phänotypen in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Verfahren zur Aufzucht von Drosophila melanogaster unter axenic und gnotobiotischer Bedingungen vorgestellt. Fly Embryonen werden in Natriumhypochlorit, aseptisch in sterile Ernährung dechorionated und aufgezogen in geschlossenen Behältern. Impfen Ernährung und Embryonen mit Bakterien führt zu gnotobiotischer Verbänden und bakterielle Präsenz wird durch Plattierung Ganzkörper- Drosophila Homogenate bestätigt.

Aufzucht der Fruit Fly<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Unter Axenic und gnotobiotische Bedingungen

Aedes Aegypti Moskitos mit Wolbachia infiziert werden in natürlichen Populationen zu unterdrücken, die Übertragung von Arboviren freigesetzt. Wir beschreiben Methoden nach hinten Ae. Aegypti mit Wolbachia Infektionen im Labor für Experimente und Feld Freigabe, Vorsichtsmaßnahmen zum Labor Anpassung und Auswahl zu minimieren.

Pflege, Aedes Aegypti Moskitos mit Wolbachia infizierte

Dieses Protokoll beschreibt Methoden zur Oral verfügbar zu machen und die Fruchtfliege Drosophila MelanogasteR mit bakteriellen Krankheitserregern zu infizieren und die Anzahl der infektiöse Bakterien Schuppen nach Darm-Infektion zu messen. Wir beschreiben weiter die Wirkung des Immunsystems Mutanten auf Fliege Überleben nach oraler bakterieller Infektion.

Mündliche bakterielle Infektion und Shedding in Drosophila melanogaster

Dieses Protokoll beschreibt die Virusinfektion in Vivo in Drosophila Melanogaster mit dem Nano-Injektionsverfahren und Grundtechniken zu Virus-Wirt Interaktionen analysieren zu etablieren.

Gründung der Virusinfektion und Analyse von Host-Virus-Wechselwirkung in Drosophila Melanogaster

Drosophila melanogaster erwachsene Fliegen wurden ausgiebig als Modellorganismen verwendet, um die molekularen Mechanismen zu untersuchen, die antimikrobiellen angeborenen Immunantworten des Wirts und mikrobiellen Infektionsstrategien zugrunde liegen. Um das Larvenstadium von D. melanogaster als zusätzliches oder alternatives Modellsystem zu fördern, wird eine Larveninjektionstechnik beschrieben.

Drosophila melanogaster Larven-Injektionsprotokoll

Vier Methoden wurden verwendet, um intrazelluläre Wolbachia nachzuweisen, die sich gegenseitig ergänzten und die Nachweisgenauigkeit der Wolbachia-Infektion von Aedes albopictus-abgeleiteten Aa23 und Aa23-T, die von nativer Wolbachia-Infektion mit Antibiotika geheilt wurden, verbesserten.

Nachweis des Wolbachia-Stammes wAlbB in Aedes albopictus-Zelllinien

Zelllinien sind nützlich für Studien an intrazellulären Organismen, die nicht außerhalb ihrer Wirtszellen kultiviert werden können. Obwohl Wolbachia-infizierte Linien viele Entdeckungen ermöglicht haben, kann die Heterogenität innerhalb dieser Linien zu unterschiedlichen experimentellen Ergebnissen führen. Wir stellen ein Protokoll zur Generierung von Einzelzellklonen und kontinuierlichen Kulturen aus Wolbachia-infizierten JW18-Zellen vor.

Generierung monoklonaler Kulturen aus Wolbachia-infizierten Drosophila melanogaster JW18-Zelllinien

Erfahren Sie ein effizientes Protokoll zur Isolierung von Wolbachia aus infizierten Drosophila-Fliegen und deren Injektion in nicht infizierte Fliegen. Diese Methode erleichtert die Erforschung von Infektionsdynamiken.

Wolbachia Bakterielle Infektion in Drosophila

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