Name: Proboscis Erweiterung Response (PER) Assay in Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00.000+00:00
Duration: 28 min 40 s
Description: Lernen Sie den Proboscis Extension Response Assay in Drosophila für Verhaltensbiologie und Neurowissenschaft. Diese Methode untersucht Geschmackspräferenzen und Fütterungsverhalten von Insekten mit Zuckerlösungen.

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Wir bedanken uns bei Paul Graham für ihre Tätigkeit als Kameramann in der Video-Präsentation.

Hunger <ol><li> Zunächst verhungern the fly. </li><li> Ein kleines Stück von Kim-wischen mit Wasser in ein leeres Fläschchen getränkt. </li><li> Transfer 20-30 wohlgenährt fliegt in die leere Flasche. </li><li> Prüfen Sie alle 12 -24 Stunden, um sicherzustellen, dass die Papier ist feucht. </li><li> Hungern the fly für 36-72 Stunden. </li></ol> Fix the fly <ol><li> Nehmen Sie eine in einem Aspirator fliegen. </li><li> Legen Sie eine 200 ul gelber Spitze über die Öffnung. Gleichzeitig spiegeln und bläst, können Sie Squeeze-the-fly in die gelbe Spitze. </li><li> Sanft gelten etwas Luft, die Fliege Push-up bis zu einem Punkt, wo sie sich nicht bewegen kann. </li><li> Durch die Verwendung einer Rasierklinge, setzen Sie ein Zeichen in etwa auf die Fliege ins Auge, dann saugen die fliegen zurück und schneiden Sie die Spitze. </li><li> Pusten Sie leicht die Fliege wieder in Position, aber kurz vor Erreichen der ganz am Ende, eine Schräge an der Stelle, wo der Rüssel werde lokalisiert werden geschnitten wird. Sie können ohne diese schräg geschnitten, aber es würde auf jeden Fall die folgenden Prozess zu vereinfachen. </li></ol> Bereiten Saccharose Dochte <ol><li> Twist einem 6 mm breiten Streifen Kimwipes ®-Papier in ein Gewinde und auseinander ziehen in kleine Stücke von Kegel-geformten Docht (&lt;1 cm). </li><li> Diese kleinen Dochte wurden in Saccharose-Lösungen oder Wasser getaucht und präsentiert dem Rüssel durch die Kontaktaufnahme. </li></ol> Bereiten Kontrollen und Versuchstieren <ol><li> Vor der Prüfung keine Geschmacksstoffe, geben 4% Saccharose-Lösung, die Fliege. Dies wirkt wie eine positive Kontrolle. Entsorgen Sie alle fliegen, die nicht geantwortet haben. </li><li> Als nächstes testen dH 2 0 on the fly. Diese wirken als negative Kontrolle. Entsorgen Sie die fliegen, wenn sie zu reagieren haben. </li><li> Testen Sie diese Kontrollen nach dem Testen Sie Ihre Geschmacksstoffe. </li></ol>

<ol><li>Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).</li>
</ol>

In dieser Präsentation haben wir alle Schritte für Proboscis Extension Response Test gegangen. Die Methode klingt ziemlich einfach, aber wie in vielen anderen Verhalten Assays, viele kleine Dinge können den Test von der Arbeit abzuhalten. Wir haben durch viele solche Schritte, die Aufmerksamkeit brauchen gegangen. Hier noch einmal hervorzuheben, habe ich einige der wichtigsten Faktoren. Ein solcher Faktor ist die Form der Docht. Ich habe einige der sehr guten Beispielen gezeigt wird, aber natürlich in Wirklichkeit alles wäre ein kon...

<table><tbody><tr><td>HDR-HC1</td><td>Kamera</td><td>Sony Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SMZ800</td><td>Mikroskop</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P-IBSS</td><td>Kameraadapter</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x DC10LN</td><td>Kameraadapter</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>257010</td><td>Kameraadapter</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TREKKER Mk2</td><td>Stativ</td><td>BENBO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gorillapod SLR</td><td>Stativ</td><td>Joby</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMac G5</td><td>Computer</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Power Mac G5</td><td>Computer</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMovie</td><td>Software</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MPEG Streamclip</td><td>Software</td><td>SQUARED 5</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

proboscis erweiterung response (per) assay in drosophila

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Proboscis Extension Response (PER) ist ein Geschmack Verhalten Assay, der in Fliegen sowie in Honigbienen verwendet wurde. Auf der Oberfläche der Fliege in den Mund (Labellum), gibt es Haar-ähnliche Strukturen genannt Sensillen, die Geschmack Neuronen Häuser. Wenn eine attraktive Substanz Kontakt zur Lippe macht, erstreckt sich die Fliege ihren Rüssel, um das Material zu verbrauchen. Proboscis Erweiterung Response (PER)-Assay misst diesen Geschmack Verhalten Reaktion, und es ist eine nützliche Methode, um über das Essen Vorlieben in eine Fliege zu lernen. Lösungen verschiedener Zucker wie Saccharose, Glucose und Fructose, sind sehr attraktiv, die Fliege. Die Wirkung von aversiven Substanzen können auch als Reduzierung der PER getestet werden, wenn in einem süßen gemischt. Trotz der Einfachheit der grundlegenden Verfahren, es gibt viele Dinge, die sie von der Arbeit verhindern können. Einer der Faktoren, die Aufmerksamkeit erfordern, ist die Fliege reagiert Zustand. Die erforderliche Hungertod der Zeit, die fliegen, um die richtige Reaktion Zustand zu bringen variiert drastisch von 36 bis 72 Stunden. Wir haben eine Reihe von Kontrollen, die Fliege den Zustand und die Screening ermöglicht der non-responsive oder hyper-responsive einzelnen Tiere zu bewerten. Ein weiterer wichtiger Faktor sind die Auswirkungen auf und die Position der Kontakt zu den Labellum, was schwierig sein, die von Worten zu beschreiben wäre. Diese Videopräsentation zeigt alle diese zusammen mit einigen anderen Verbesserungen, die die Reproduzierbarkeit dieses Verfahrens erhöhen würde.

Proboscis Extension Response oder PRO ist ein Geschmack Verhalten Assay, der in Fliegen sowie in Honigbienen verwendet wurde. Wenn der Rüssel den Kontakt mit einem attraktiven Stoff macht, erstreckt sich die Fliege ihren Rüssel, um die Substanz zu konsumieren. Lösungen verschiedener Zucker sind sehr attraktiv, die Fliege.

Proboscis Erweiterung Response (PER) Assay in Drosophila

Die Proboscis-Extension-Response (PER) ist ein Geschmacksverhaltens-Assay, der sowohl bei Fliegen als auch bei Honigbienen eingesetzt wurde.
An der Oberfläche des Mundapparats der Fliege ...

Hallo. In dieser Präsentation möchten wir Ihnen zeigen, wie man den Proboscis-Verlängerungsreaktions-Test (PER) in der Speiseröhre durchführt. Die Proboscis-Verlängerungsreaktion, auch PER genannt, ist ein Verhaltensassay zur Geschmacksprüfung, der sowohl bei Fliegen als auch bei Honigbienen angewendet wurde. Wenn die Proboscis mit einer attraktiven Substanz in Kontakt kommt, streckt die Fliege ihre Proboscis aus, um die Substanz aufzunehmen.Lösungen verschiedener Zucker wie Saccharose, Glukose und Fructose sind für die Fliege sehr attraktiv. PR kann auch durch Berührung am Bein ausgelöst werden, aber in dieser Darstellung möchten wir uns auf den Kontakt mit dem Rüssel konzentrieren. Der erste Schritt für den PR-Test besteht daher darin, die Fliege zu entbehren.Die Optimierung der Hungerbedingung ist einer der wichtigsten Faktoren für diesen Assay. Dabei sind zwei wesentliche Aspekte von Bedeutung: die Dauer der Nahrungsentzug und die Körperlänge der Fliege vor dem Nahrungsentzug.Und es scheint eine positive Korrelation zwischen diesen beiden Faktoren zu geben. Und wenn die Fliege groß und fett ist, muss man sie stärker hungern. Die Körperlänge hängt nun von der Ernährung des Flieg

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Gleichzeitige Aufnahme von Calcium-Signale von identifizierten Neuronen und Fressverhalten von Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster ist eine genetisch und auf der Verhaltensebene praktische Zwecke geeigneten Modells, das verwendet wurde, um die molekularen und zellulären Grundlagen von vielen wichtigen biologischen Prozessen seit über einem Jahrhundert ein zu verstehen. Drosophila wurde auch genutzt, um Einblicke in die genetischen Grundlagen der Fliege Verhalten zu gewinnen.

Methoden zum Test Drosophila Verhalten

Dieses Video demonstriert eine Methode zum Nachweis sensorischer Neuronenreaktionen in Drosophila mittels Ligandenbindung und Fluoreszenzbildgebung. Liganden binden an Neuronenrezeptoren und verursachen so den Kalziumeinstrom. Das Kalzium bindet an Indikatorkomplexe, was zu einer Fluoreszenzemission führt, die die neuronale Reaktion auf den Liganden bestätigt.

Detektion physiologischer Reaktionen von sensorischen Neuronen in Drosophila

In diesem Video-Artikel beschreiben wir einen automatisierten Test, um die Wirkung von Hunger oder Sättigung auf olfaktorische abhängige Nahrungsmittel Suchverhalten in der Erwachsenen Obst messen Drosophila melanogaster.

Ein Single-fly-Assay für Sammelverhalten in Drosophila

Das Proboscis Extension Response (PER) Konditionierungsprotokoll, das für die Honigbiene (Apis mellifera) entwickelt wurde, bietet ein ökologisch relevantes und leicht quantifizierbares Mittel, um verschiedene Lernmechanismen bei vielen Insektenarten zu untersuchen.

Eine Nasennebenschutz-Protokoll für die Untersuchung Verhaltensplastizität bei Insekten: Anwendung auf Grund, Biomedizinische und Agrarforschung

Um neue Mutationen zu identifizieren, die die Mechanoempfindung beeinflussen, haben wir einen Assay entwickelt, der die Verhaltensreaktion auf taktile Stimulation von Fliegenborsten in mutierten Klonen misst, die mit der MARCM-Methode erzeugt wurden. Die Kombination der Techniken ermöglicht die Identifizierung mechanosensitiver Mutationen, die sonst tödlich wären.

Ein Verhaltenstest für Mechanosensation der MARCM-basierte Klonen in<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Wir beschreiben hier eine Verhaltensaufbau- und Datenanalysemethode zur Untersuchung der Geruchsreaktionen von bis zu 100 Essigfliegen (Drosophila melanogaster). Dieses System kann mit einzelnen oder mehreren olfaktorischen Reizen verwendet werden und kann für die optogenetische Aktivierung oder Stilllegung neuronaler Untergruppen angepasst werden.

Olfaktorischen Behaviors Assayed von Computer-Tracking<em&gt; Drosophila</em&gt; In einem Vier-Quadranten-Olfaktometer

Das Gesamtziel dieses Protokolls ist es, zu zeigen, wie man Geruchsstoffe mit geringer Flüchtigkeit für die Single-Sensillum-Aufzeichnung von Drosophila- olfaktorischen Rezeptor-Neuronen, die auf langkettige cutikuläre Pheromone reagieren, präsentieren kann.

Elektrophysiologische Aufzeichnung von<em&gt; Drosophila</em&gt; Trichoid Sensilla in Reaktion auf Odoranten der niedrigen Volatilität

Dieses Protokoll analysiert Navigations Verhalten von Drosophila Larve in Reaktion auf die gleichzeitige optogenetische Stimulation der olfaktorischen Neuronen. 630 nm Wellenlänge wird verwendet, um einzelne olfaktorischen Neuronen mit dem Ausdruck einer rot-verschoben Kanal Rhodopsin zu aktivieren. Larval Bewegung gleichzeitig verfolgt, digital erfasst und mit individuell geschriebenen Software analysiert.

Tracking von Drosophila Larven Verhalten als Reaktion auf optogenetische Stimulation der olfaktorischen Neuronen

Das Ziel dieses Protokolls ist es, zu zeigen, wie ein verbesserter Test für mechanische Nociception in Drosophila Larven durchzuführen. Wir verwenden den Test hier, um zu zeigen, dass mechanische Überempfindlichkeit (Allodynie und Hyperalgesie) in Drosophila Larven existiert.

Ein verbesserter Assay und Werkzeuge zur Messung der mechanischen Nociception in Drosophila Larven

In dieser Arbeit werden Methoden zur optogenetischen Manipulation in Drosophila melanogaster vorgestellt, bei denen CsChrimson und GtACR2 verwendet werden, um spezifische Neuronen zu aktivieren und zum Schweigen zu bringen. Es werden vier Experimente beschrieben, die die Optogenetik nutzen, um thermotaktische und gustatorische Verhaltensweisen zu erforschen und Einblicke in die zugrunde liegenden neuronalen Mechanismen zu geben, die diese Prozesse steuern.

Verhaltensassays zur optogenetischen Manipulation neuronaler Schaltkreise in Drosophila melanogaster

Lernen Sie den Proboscis Extension Response Assay in Drosophila für Verhaltensbiologie und Neurowissenschaft. Diese Methode untersucht Geschmackspräferenzen und Fütterungsverhalten von Insekten mit Zuckerlösungen.

Proboscis Erweiterung Response (PER) Assay in Drosophila

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