Organkonditioniertes Medium: Erzeugung von Medium aus entnommenen Organzellen für metastasierende Krebsstudien

Bestimmte Organe produzieren lösliche Faktoren und werden zu bevorzugten Stellen für Brustkrebsmetastasen. Ein konditioniertes Medium, das aus diesen entnommenen Organzellen hergestellt wird, kann helfen, solche Faktoren zu identifizieren und zu untersuchen.

Beginnen Sie damit, ein entnommenes Organ wie eine Leber in ein Röhrchen mit kaltem PBS zu legen und das Röhrchen auf und ab zu drehen, um das Restblut des Organs zu entfernen. Lege das Organ in eine Petrischale. Und mit einem Skalpell das Organ in kleine Stücke würfeln.

Suspendieren Sie diese Stücke in ein Röhrchen mit einem Basalmedium, das mit einem Antibiotikum ergänzt wird, um das Zellwachstum zu unterstützen und eine Kontamination zu verhindern. Gießen Sie nun die Zellsuspension in eine Kulturplatte und inkubieren Sie bei 37 Grad Celsius mit kontinuierlicher Kohlendioxidzufuhr für die erforderliche Dauer.

Während der Inkubation geben diese Zellen Metaboliten, Wachstumsfaktoren und Proteine der extrazellulären Matrix an das Medium ab. Übertragen Sie anschließend die Zellsuspension in ein Zentrifugenröhrchen und fügen Sie frisches Medium hinzu, um es zu verdünnen. Zentrifugieren Sie das Röhrchen und filtrieren Sie den Übers