Name: Orthotopen Hind-Limb Transplantation in Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-12T17:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Lernen Sie die orthotope Hinterlauftransplantation bei Ratten mit Manschettentechnik zur Revaskularisierung. Dieses Modell dient der Untersuchung von Ischämie-Reperfusionsverletzungen und immunologischen Reaktionen bei Allotransplantaten.

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Donor Betrieb und Hind-Limb Ernte <ol><li> Für das operative Vorgehen eine sterile Reihe von mikrochirurgischen Instrumenten eingesetzt wird. Der Chirurg müssen geeignete Kleidung einschließlich sterile Handschuhe, die vor Beginn des chirurgischen Eingriffs geändert werden müssen. </li><li> Die Ratte ist betäubt mit einer intraperitonealen Injektion von Pentobarbital (50mg/kg IP) und legte in Rückenlage auf einem beheizten Operationsfeld, die eine stabile Tier Körpertemperatur erleichtert über den gesamten chirurgischen Eingriffs. </li><li> Vor Hautschnitt den Betrieb gestellt wird dreimal mit je sowohl saniert, ein Desinfektionsmittel und Alkohol. Um zu verhindern, die Tiere Hornhaut vor dem Austrocknen, die Augen sind mit einer Augensalbe (Vidisic) vor der Operation geschmiert. </li><li> Der Hautschnitt wird über der rechten Leiste etwa auf dem Niveau des Leistenbandes gemacht. Die Femoralgefäße sind frei präpariert mit bipolarer Kauter und stumpf; tiefe Äste werden mit 8-0 Seide ligiert. </li><li> 300μl (50 IU) von Heparin erfolgt über den Penis Vene für Antikoagulation injiziert. </li><li> Femoralgefäße werden auf der Ebene des Leistenbandes ligiert und schneiden distal der Ligatur. </li><li> Das Hinterbein ist mit gerötetem eiskalter (4 ° C) HTK-Lösung (5 ml) über die Oberschenkelarterie über 5 Minuten. </li><li> Alle Muskelgruppen werden stark mit der Schere geteilt und Osteotomie wird mit einer rotierenden elektrischen Säge auf der Ebene des distalen Drittel des Femurs durchgeführt. </li><li> Die geernteten Glied ist dann in 20 mL eiskaltem HTK-Lösung für die Erhaltung und Kühllager bis zur Transplantation untergetaucht. </li></ol> Empfänger Betrieb und Transplantation <ol><li> Die Ratte ist betäubt mit einer intraperitonealen Injektion von Pentobarbital und legte sich rücklings auf den OP-Feld. </li><li> Der Hautschnitt wird über der rechten Leiste etwa auf dem Niveau des Leistenbandes gemacht. Die Femoralgefäße sind frei präpariert mit bipolarer Kauter und stumpf. </li><li> Femoralgefäße als distal wie möglich unterbunden, aber proximal der epigastrische Gefäß Start. Vascular Klemmen sind auf der Ebene des Leistenbandes auf Arterie und Vene gelegt. </li><li> 0,010 mm, Stulpe Länge:;: und Vene (innen Manschettendurchmesser Manschette-Wandstärke 1,151 mm A Polyethylen Manschette über der Arterie (: 0,912 mm, Stulpe-Wandstärke: 0,010 mm, Stulpe Länge 2,0 mm innen Manschettendurchmesser) gezogen : 2,0 mm). Der Rand der Gefäßlumen wird dann mit einem Gefäßdilatator gezogen und der Arteria und Vena femoralis sind über den ganzen Körper der Manschette (ca. 2mm) umgestülpt und mit einer umlaufenden 8-0 Seidenfaden. </li><li> Um Platz zu schaffen für den Spender des Körpers der Empfänger des Körpers ist mit scharfer Präparation von Muskelgruppen entfernt und Osteotomie wird in der Mitte Oberschenkel durchgeführt. </li><li> Der Spender des Körpers wird von der HTK-Lösung entfernt und Transplantation beginnt mit Osteosynthese des Femurs mit einer 18-Gauge-Nadel (Länge: 1,5-2,0 cm) als intramedulläre Stange. </li><li> Ventral Muskelgruppen sind eng mit 4-0 Vicryl oder Prolene Einzelknopfnähten approximiert. </li><li> Gefäßanastomosen werden, indem der Spender Vene und Arterie über die Empfänger Vene und Manschette komplexen durchgeführt. Eine umlaufende 8-0 Seidenfaden wird wieder aufgestellt, um die Anastomose zu sichern. </li><li> Die venöse Klemme gelöst, gefolgt von der arteriellen Klemme, und Reperfusion wird visualisiert durch Rücksendung der Farbe auf die distalen Gliedmaßen und Fuß sowie pulsatilen Fluss durch die Arterie. </li><li> Die restlichen dorsalen Muskelgruppen werden mit 4-0 Vicryl oder Prolene Einzelknopfnähten wieder angenähert. </li><li> Die Haut ist mit 4-0 Vicryl oder Prolene Einzelknopfnähten verschlossen. </li><li> Der Empfänger Ratte befindet sich auf einem Heizkissen gelegt und eng bis zur Genesung überwacht. </li><li> Empfänger Tiere prophylaktisch Antibiotika (Cefazolin, 20 mg / Tag, IM) und Buprenex (0,1 mg / kg, SC) für drei Transplantation Tage. </li></ol>

<ol><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).</li>
<li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> Transplantation. 86 (4), 487-492 (2008).</li>
<li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+forearm+transplantation%3A+outcome+at+3+years%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).</li>
</ol>

Jahrzehntelange experimentelle Forschung vorausgegangen und ermöglichte erfolgreiche menschliche Hand-Transplantation in der jüngsten Vergangenheit. Im Jahr 1978, Shapiro et al. entwickelte eine orthotope Hinterbein Transplantation Modell in Ratten, gut geeignet, um verschiedene pathologische, physiologische und immunologische Aspekte sowie funktionelle Ergebnis von Composite Gewebetransplantate studieren. Wir haben den schwierigsten Teil des Verfahrens, nämlich die Gefäßanastomose geändert durch die Einführung eines ni...

<table><tbody><tr><td>Nembutal&amp;#174;</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin Immuno</td><td>Ebewe Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Custodiol HTK-Lösung</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adventitiascheren</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;SAS-21 R-8T</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;JFC-7</td><td></td></tr><tr><td>Dehnungspinzette</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;D-5AZ</td><td></td></tr><tr><td>Polyamid-Röhrchen</td><td>River Tech Medical</td><td>#17; #19</td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopen hind-limb transplantation in ratten

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Composite-Gewebe Allotransplantation (CTA) stellt nun eine gültige therapeutische Option nach dem Verlust einer Hand, Unterarm oder Ziffern und hat sich zu einem neuen therapeutischen Einheit in der rekonstruktiven Chirurgie. Allerdings ist langfristig hochdosierten Multi-Drug-immunsuppressive Therapie erforderlich, um Transplantat Überleben zu sichern, wobei das Risiko von schweren Nebenwirkungen, die eine breitere Anwendung Halfter. Weitere Progression in diesem Bereich kann auf ein besseres Verständnis der Grundlagen der Immunologie und Ischämie Reperfusionsschaden in Composite Gewebetransplantate ab. Bis heute orthotopen Hinterbein Transplantation in Ratten wurde die bevorzugte Nagermodell für die rekonstruktive Transplantation (RT) wurde, ist es jedoch ein sehr anspruchsvolles Verfahren, das außergewöhnliche mikrochirurgische Fähigkeiten erfordert für Wiederbefestigung der Gefäße, Knochen, Muskeln und Nerven. Wir haben die vaskuläre Manschette Anastomosentechnik diesem Modell eingeführt, die eine schnelle und zuverlässige Methode, um Hinterbein Transplantation Ratte. Diese Technik vereinfacht und verkürzt den chirurgischen Eingriff und können Chirurgen mit grundlegenden mikrochirurgische Erfahrung, um erfolgreich die Operation mit hoher Überlebens-und niedrigen Komplikationsraten. Die Technik scheint auch für immunologische sowie Ischämie Reperfusionsschaden (IRI) Studien geeignet sein.

Hier beschreiben wir die orthotopen Ratten-Hinterteil des Körpers Transplantation Verfahren, das an den Goldstandard zu sein scheint<em&gt; In vivo</em&gt; Modell für Composite Tissue Allotransplantation Forschung.

Orthotopen Hind-Limb Transplantation in Ratten

Die Composite Tissue Allotransplantation (CTA) stellt mittlerweile eine valide therapeutische Option nach dem Verlust einer Hand, eines Unterarms oder von Fingern dar und hat sich zu einer neuartigen ...

Ich bin Robert Suha vom Forschungslabor Daniels Roski der Abteilung Viszerale Transplantations- und Thoraxchirurgie der Medizinischen Universität Innsbruck. Heute werden wir Ihnen den Eingriff der unteren Extremitäten-Transplantation am Tiermodell vorstellen und dabei eine Manschetten-Technik zur Revascularisation einführen. Dieser chirurgische Eingriff der unteren Extremitäten-Transplantation wird von unseren chirurgischen Assistenzärzten, einschließlich mir selbst, durchgeführt.Wir verwenden dieses Tiermodell, um ischämische und reperfusionassoziierte Verletzungen in einem allogenen Verbundgewebetransplantat zu untersuchen. Darüber hinaus nutzen wir dieses Verfahren, um immunologische Vorgänge der Abstoßung eines allogenen Verbundgewebetransplantats sowie Strategien zur Verhinderung einer solchen Abstoßung zu erforschen. Zu diesen Strategien gehört die Minimierung oder sogar der Verzicht auf eine Erhaltungsimmunsuppression durch den Einsatz gezielter immunmodulatorischer Regime.Das Verfahren zur Transplantation der roten Hintergliedmaßen beginnt mit der Entnahme des kompositen Gewebetransplantats vom Spender, bei dem die rechte Hintergliedmaße von der Spender-Ratte entfernt und a

orthotopic-hind-limb-transplantation-in-rats

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Wir präsentieren einen einfach zu etablieren Revision der klassischen Zwei-Manschette Technik zur orthotopen Lebertransplantation in der Ratte.

Lebertransplantation bei der Ratte

Lebertransplantation bei Ratten ist ein unverzichtbares experimentelles Modell für die biomedizinische Forschung. Hier präsentieren wir unsere chirurgischen Verfahren zur orthotopen Ratten Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion mit 50% partielle Transplantat.

Chirurgische Verfahren für eine Ratte Modell Teilweise Lebertransplantation mit arteriellen Rekonstruktion

Dieses neuartige Modell für orthotoper hinteren Gliedmaßen Transplantation in der Maus, eine nicht-Naht Manschette Technik für supermikrovaskulären Anastomose Anwendung bietet ein leistungsstarkes Werkzeug für die in-vivo-mechanistisch zu vaskularisiert Verbund Allotransplantationen bezogene immunologische Forschung (VCA).

Orthotopische Hind Gliedmaßen Transplantation in der Maus

Vaskularisierte Verbundlegierung bietet den Transplantationsempfängern lebensverändernde Vorteile, aber die biologischen Ursachen für die Abstoßung von Transplantationen und die Vaskulopathie bleiben schlecht verstanden. Das hier vorgestellte Nagetier bietet ein reproduzierbares, klinisch relevantes Transplantationsmodell, das es Forschern ermöglicht, Abstoßungsereignisse und mögliche therapeutische Strategien zu bewerten, um deren Auftreten zu verhindern.

Modifiziertes Heterotopisches Hindlimb Osteomyoskan Flap Model im Rat für translational Vasculariisierte Composite Allotransplantation Research

Dieses Protokoll stellt ein robustes, reproduzierbares Modell des vaskularisierten Kompositallotransplantats (VCA) dar, das auf die gleichzeitige Untersuchung der Immunologie und funktionellen Erholung ausgerichtet ist. Die In akribische Technik investierte Zeit in eine orthotopische Transplantation mit handgenähten Gefäßanastomosen und neuronaler Koaptation in eine orthotopische Transplantation mit dem rechten Mittelschenkel der Hinterbeine.

Der nächste Schritt: eine neuronale Koaptation Orthotopic Hind Limb Transplantation Modell, um die funktionelle Erholung in Derratzulande zu maximieren

Wir beschreiben ein Modell der heterotopischen Bauchherztransplantation bei Ratten, was Veränderungen der aktuellen Strategien impliziert, die zu einem vereinfachten chirurgischen Ansatz führen. Zusätzlich beschreiben wir ein neuartiges Abstoßungsmodell durch In-Ear-Injektion lebenswichtiger Herzmuskelzellen, das weitere transplantierte immunologische Analysen bei Ratten ermöglicht.

Ein immunologisches Modell für heterotopische Herz- und Herzmuskelzelltransplantation bei Ratten

Dieser Artikel stellt ein partielles heterotopes osteomyokutanes Lappentransplantationsprotokoll bei Ratten und seine möglichen Ergebnisse in der mittelfristigen Nachbeobachtung vor.

Partielles heterotopes Hinterbeinein Transplantationsmodell bei Ratten

Dieses Protokoll beschreibt eine verbesserte Technik für die orthotope linke Lungentransplantation bei Ratten, wobei der Schwerpunkt auf der Reduzierung von Operationsschwierigkeiten und der Verbesserung der Überlebensraten liegt.

Orthotope Transplantation der linken Lunge bei Ratten

Dieses Protokoll zeigt, wie man bei Ratten eine unterknienahe Amputation durchführen und gezielte Muskelrenervation (iTMR) sofort durchführen kann, um Strategien zur Behandlung und Vorbeugung von amputationsbedingten Schmerzen zu untersuchen und die mit der Amputation verbundenen Schmerzmechanismen besser zu verstehen.

Modell der Amputation unterhalb des Kniens bei Ratten und sofortige gezielte Muskelwiedernervation

Wir präsentieren ein reproduzierbares Mausmodell der heterotopischen Becken-zu-Hals-vaskularisierten Komposit-Allotransplantation. Dieses supermikrochirurgische Protokoll, das 0,3–0,5 mm Gefäßanastomosen umfasst, integriert Nylon-Filamentführung und venöse Manschetten. Es bietet eine verlässliche Plattform für translationale Studien zu Toleranz, Ischämie-Reperfusionsverletzungen und immunologischen Mechanismen bei der vaskularisierten Kompositenallotransplantation.

Heterotopische Hintergliedmaßen-zu-Hals-Transplantation bei der Maus: Ein supermikrochirurgisches Modell der vaskularisierten zusammengesetzten Allotransplantation

Lernen Sie die orthotope Hinterlauftransplantation bei Ratten mit Manschettentechnik zur Revaskularisierung. Dieses Modell dient der Untersuchung von Ischämie-Reperfusionsverletzungen und immunologischen Reaktionen bei Allotransplantaten.

Orthotopen Hind-Limb Transplantation in Ratten

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