Intrabronchiale Verabreichung: Eine Technik zur selektiven Verabreichung eines experimentellen Wirkstoffs in eine Mauslunge

0 Aufrufe3:18 Min. • April 30th, 2023

- Bei einer intrabronchialen Verabreichung wird einer bestimmten Lunge ein experimentelles Mittel verabreicht. Befestigen Sie zunächst eine betäubte Maus in Rückenlage auf einem Plastikbrett und kanülieren Sie die Luftröhre mit einem verlängerten Katheter. Um die distale rechte Lunge zu kanülieren, drehen Sie das Brett um 30 Grad und führen Sie den Katheter parallel zur Mittellinie der Maus, bis Sie einen Widerstand spüren.

Verabreichen Sie das experimentelle Mittel in den Katheter. Geben Sie dann mit einer Pipette Luft ab, um das Mittel aus dem Katheter zu entfernen. Ziehen Sie den Katheter heraus und halten Sie die Maus 30 Sekunden lang in Position. Legen Sie die Maus zur Wiederherstellung in einen Käfig.

Um nach der intratrachealen Kanülierung experimentelle Wirkstoffe in die distale linke Lunge zu verabreichen, drehen Sie die Kunststoffplatte um minus 74 Grad. Schieben Sie den Katheter vorsichtig in den linken Hauptstammbronchus vor. Drehen Sie die Platine um minus 30 Grad, um die Gravitationsunterstützung für die Verabreichung des experimentellen Wirkstoffs zu ermöglichen. Geben Sie mehr Volumen des experimentellen Mittels proportional zum linken Lungenlappen mit einer größeren Fläche ab. Geben Sie mit einer Pipette Luft ab und ziehen Sie den Katheter heraus. Halten Sie die Maus 30 Sekunden lang in Position und legen Sie sie dann zur Wiederherstellung in einen Käfig.

Das folgende Protokoll zeigt die Verabreichung des Evans-Blau-Farbstoffs über intrabronchiale Verabreichung zur selektiven Ablagerung in einer Mauslunge.

- Für die selektive Lupenkanülierung der distalen rechten Lunge drehen Sie nach der intratrachealen Intubation die Kunststoffplatte um 30 Grad und führen Sie die Nabe des Katheters parallel zur Mittellinie der Maus auf die entsprechende gewichtsbasierte Tiefe, wie in der Tabelle angegeben. Geben Sie mit einer Gelladespitze 20 Mikroliter 0,3 % Evansblau-Farbstoff in den Katheter, gefolgt von 1 bis 2 100 Mikroliter Aliquots Luft mit einer Glaspipette. Ziehen Sie dann den Katheter heraus und halten Sie die Maus 30 Sekunden lang in Position, bevor Sie das Tier auf eine wärmende Decke legen und bis zur vollständigen Genesung überwachen.

Für eine selektive lappenförmige Kanülierung der distalen linken Lunge nach der intratrachealen Intubation drehen Sie die Kunststoffplatte um minus 74 Grad und schieben Sie den Katheter vorsichtig in den linken Hauptschaftbronchus vor, während Sie einen moderaten Druck von 90 Grad nach unten und in Richtung Buchstütze ausüben. Nach der Kanülierung der linken unteren Lungensegmente drehen Sie die Kunststoffplatte um minus 30 Grad und geben Sie 40 Mikroliter 0,3 % Evans-Blau-Farbstoff mit einer Gelladespitze ab. Geben Sie dann 1 bis 2 100 bis 300 Mikroliter Aliquots Luft über eine Glaspipette ab und ziehen Sie den Katheter heraus, damit sich die Maus wie gezeigt erholen kann.