3-dimensionale Kultur von Lungenkarzinomzellen: Eine Methode zur Untersuchung von Zell-Matrix-Wechselwirkungen

0 Aufrufe • 4:45 Min. • April 30th, 2023

- Tauen Sie zunächst Fläschchen mit Basalmembranmatrix über Nacht bei 4 Grad Celsius auf. Die Basalmembranmatrix besteht aus Proteinen, die in der Mikroumgebung des Tumors vorhanden sind und dazu beitragen, die Eigenschaften von Krebszellen in vitro zu erhalten. Stellen Sie am nächsten Tag das Basalmembran-Matrix-Fläschchen auf Eis, um die Matrix im flüssigen Zustand zu halten. Nehmen Sie Lungenkrebszellen in ein vorgekühltes Zentrifugenröhrchen und zentrifugieren Sie sie bei 4 Grad Celsius. Saugen Sie den Überstand an und klopfen Sie vorsichtig darauf, um das Pellet zu lösen und auf Eis zu legen. Geben Sie als nächstes ein geeignetes Volumen Basalmembranmischung in dieses Röhrchen und mischen Sie, um eine gleichmäßige Zellsuspension herzustellen. Führen Sie alle Schritte bei niedriger Temperatur durch, um ein Gelieren der Basalmembran zu verhindern.

Übertragen Sie ein geeignetes Volumen der Zellmatrixsuspension in die Mitte jedes Wells in einer vorgekühlten Well-Platte, wobei das gesamte Well abgedeckt wird. Inkubieren Sie die Well-Platte, damit sich die Matrix verfestigen kann. Untersuchen Sie unter einem Mikroskop, um eine gleichmäßige Verteilung der Zellen in der Matrix sicherz

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