Immunfluoreszenz-Assay: Eine Methode zur Identifizierung von Tumorzellen, die auf einem medizinischen Draht eingefangen wurden

- Nehmen Sie einen funktionalisierten Draht mit einem kleinen Goldanteil, der mit einem Hydrogel beschichtet ist, das mit Antikörpern von Interesse gekoppelt ist. Tauchen Sie den Goldteil des Drahtes in ein Fläschchen mit Tumorzellen. Verschließen Sie es mit einem Drahtstopfen und inkubieren Sie es in einem Röhrchenrotator. Die zirkulierenden Tumorzellen oder CTCs, die Oberflächenantigene aufweisen, binden an die Antikörper auf dem Draht. Spülen Sie den Draht, indem Sie ihn in Fläschchen tauchen, die phosphatgepufferte Kochsalzlösung oder PBS enthalten, und an der Luft trocknen. Tauchen Sie nun den Draht in eine Acetonlösung, um die Zellen durch Dehydrieren zu fixieren.

Führen Sie anschließend den Draht vorsichtig durch eine P200-Spitze mit dem funktionalisierten Teil darin. Füllen Sie das Band mit einem Antikörper, der mit einem Fluorochrom konjugiert ist, um den Draht einzutauchen. Diese markierten Antikörper binden an ihre jeweiligen Antigene, die auf den Zellen vorhanden sind. Verschließen Sie die Öffnung mit einer Laborfolie und inkubieren Sie sie über Nacht im Dunkeln bei 4 Grad Celsius. Waschen Sie anschließend den Draht mit PBS, um alle ungebundenen Antikörper zu entfernen.