Konservierung von formalinfixiertem Paraffin-eingebettetem (FFPE): Eine Methode zur Untersuchung der Gewebemorphologie

- Legen Sie zunächst eine Gewebescheibe auf ein mit PBS getränktes Filterpapier, um ein Schrumpfen oder Anschwellen der Zellen zu verhindern, indem Sie die Osmolarität ausgleichen. Übertragen Sie das Gewebe auf eine Histo-Kassette. Schließen Sie die Kassette und legen Sie sie in neutral gepuffertes Formalin, NBF-Lösung. NBF enthält Formaldehyd, das an Aminogruppen von Aminosäuren bindet und die Bildung von Ameisensäure verhindert, die das Gewebe pigmentiert. Lassen Sie die Kassette über Nacht bei niedriger Temperatur, was den Abbau der Nukleinsäuren verhindert und das Gewebe fixiert. Dehydrieren Sie das Gewebe mit mehreren Waschgängen mit Alkohol.

Lege es in flüssiges Paraffin und drücke es bis zum Boden der Form. Entfernen Sie das Gewicht und legen Sie die Unterseite der Histo-Kassette auf das Taschentuch. Gießen Sie flüssiges Paraffin auf die Baugruppe. Lassen Sie das Setup auf einer kalten Platte erstarren. Paraffin ist wasserunlöslich und härtet nach dem Eindringen in das dehydrierte Gewebe aus und hilft beim Schneiden. Übertragen Sie den Gewebeblock auf ein Mikrotom. Schneiden und sammeln Sie dünne Schnitte des Gewebes auf einem Objektträger. Wenn der Abschnitt zu dick ist, kö