ex vivo T-Zell-Stimulation im Pankreastumor: Eine Methode zur Steigerung der Zytokinproduktion in T-Zellen

- Aktivierte T-Zellen bewegen sich in die Mikroumgebung des Pankreastumors, wo sie Zytokine wie Interferon-gamma oder IFN gamma und Tumornekrosefaktor-alpha oder TNF alpha freisetzen, die eine wirksame Antitumorantwort vermitteln. Da sich Zytokine schnell aus der T-Zelle entfernen, können die intrazellulären Spiegel nicht nachweisbar sein. Daher benötigt die T-Zelle eine Stimulation, um die Produktion von basalen Zytokinen zu erhöhen, um ihre therapeutische Rolle im Tumor zu untersuchen.

Beginnen Sie mit der Entnahme einer Suspension von Tumorzellen aus der Bauchspeicheldrüse der Maus. Behandeln Sie nun die in Zellsuspension vorhandenen T-Zellen mit einem Zytokin-Stimulationscocktail und inkubieren Sie die Mischung für die gewünschte Zeit. Dieser Cocktail erleichtert die Freisetzung von Kalziumionen aus dem endoplasmatischen Retikulum in das Zytoplasma. Ein hoher Kalziumspiegel aktiviert wiederum bestimmte nukleäre Transkriptionsfaktoren, was zu einer Erhöhung der Zytokinproduktion in den T-Zellen führt.

Behandeln Sie anschließend die Zellen mit einem Proteintransporthemmer-Cocktail und inkubieren Sie das Röhrchen. Dieser Cocktail blockiert den Transport von Zytokinen vom endoplasm