Extrazellulärer Flux-Assay in 3D-Sphäroiden: Eine Methode zur Messung der metabolischen Aktivität von Pankreastumor-Sphäroiden

- Bauchspeicheldrüsenkrebszellen interagieren mit krebsassoziierten Fibroblasten in der Tumormikroumgebung (TME). Diese Wechselwirkungen modulieren die Stoffwechselaktivität der Krebszellen und beeinflussen das Fortschreiten der Krebserkrankung.

Sphäroide sind die zellulären Aggregate, die das TME in vitro rekapitulieren. Daher können wir diese Sphäroide verwenden, um die Veränderungen in den Stoffwechselfunktionen des Tumors mit Hilfe eines extrazellulären Flux-Assays zu testen. Dieser Assay misst die extrazelluläre Konzentration von Sauerstoff und Protonen, um den aeroben bzw. glykolytischen Stoffwechsel zu bestimmen.

Beginnen Sie mit der Einnahme von 3D-Sphäroiden in geeigneter Größe, die durch Co-Kultivierung von Bauchspeicheldrüsenkrebszellen mit Bauchspeicheldrüsenfibroblasten hergestellt wurden. Übertragen Sie nun die Sphäroide in eine Flussmittelanalyseplatte und bedecken Sie diese mit einer Sensorkartusche, die Testmedikamente enthält. Führen Sie den Assay in einem extrazellulären Flussanalysator durch.

Der Flussmittelanalysator injiziert Testmedikamente pneumatisch zu bestimmten Zeitpunkten aus der Sensorkartusche auf die Analyseplatte. Als Reaktion auf die Testmedikament