Name: Ex vivo mechanische Belastung der Sehnen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-05-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 36 s
Description: Erfahren Sie die ex vivo mechanische Belastung von Sehnen für Tendonforschung mit einem neuen in vitro System. Diese Methode ermöglicht präzise Messungen und reproduzierbare Ergebnisse zur Untersuchung von Sehnenerkrankungen.

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<ol><li> Supplement Medien CO 2-unabhängigen Medien mit fötalem Rinderserum, L-Glutamin, Antibiotika und Ascorbinsäure </li><li> Aliquot 40 ml in 50 ml Zentrifugenröhrchen (1 für jede Sehne) </li><li> Aliquot von 10 ml in 15 ml Zentrifugenröhrchen (1 für jede Sehne) </li><li> Sterilisieren chirurgische Instrumente, Autoklaven Blatt, Pinzette und Drehmomentschlüssel in Autoklaven </li><li> Sterilisieren Klemmen und Kraft Mikrometer Tipps durch Einweichen in 70% Ethanol über Nacht </li><li> Ernte Sehnen aus dem hinteren Pfoten des Kaninchens. Kaninchen hätte eingeschläfert nicht mehr als 2 Stunden haben. </li><li> Legen Sehnen in 15 ml Zentrifugenröhrchen mit Medien gefüllt </li><li> Legen Sie eine sterilisierte Autoklaven Blatt in einen sterilen Bereich zu etablieren </li><li> Messen Querschnittsfläche der Sehne <ol style="margin-top: 0in"><li> Legen Sie Mikrometer Tipps Mikrometer, zum korrekten Ausrichten der </li><li> Grip Sehne durch die Enden </li><li> Fit dünnsten Sehne Abschnitt in Nut </li><li> Haben Assistent Ort 50g Gewicht </li><li> Warten Sie 30 Sekunden, lesen Dicke (CSA = Dicke x 1,3) </li></ol></li><li> Legen Sehne wieder in 15 ml Zentrifugenröhrchen </li><li> Wiederholen Sie mit jeder Sehne geladen werden </li><li> Antrieb abbauen von der Basis </li><li> Schneiden Sie zwei 15mm von 40mm-Streifen und einem 3mm von 5mm Stück aus steriler Gaze für jede Sehne </li><li> Roll jeden Streifen verschließen und zwischen den Rillen des distalen Klemme </li><li> Entfernen Sehne vom Zentrifugenröhrchen und Ort an der Klemme, das distale Ende der Sehne am distalen Klemme und den Faserknorpel Region der Sehne am proximalen Klemme </li><li> Legen Sie 3x5 Gaze Stück auf der Oberseite des distalen Ende der Sehne, und befestigen Sie die Klammer </li><li> Sichere proximalen Klemme, wobei sichergestellt Sehne ausgerichtet bleibt zwischen den Klemmen und mit genügend Spielraum, dass es nicht unter Spannung, wenn Klemmen fest angezogen sind. Ziehen Sie Klammern, um 1N-m </li><li> Legen Sie 50ml Zentrifugenröhrchen mit Medien in der Basis </li><li> Legen Antrieb in der Basis </li><li> Wiederholen Sie mit jeder Sehne geladen werden </li><li> Legen Basis über Wasserbad </li><li> Loading-Protokoll <ol style="margin-top: 0in"><li> Voraussetzung Sehnen </li><li> Übernehmen 0,5 N Last, messen Spanngliedlänge (dies ist die Messlänge) </li><li> Bewerben zyklischer Belastung </li></ol></li><li> Antrieb abbauen von der Basis </li><li> Release-Sehne vom Schellen </li><li> Prozess Sehne </li></ol>

<ol><li>Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+system+for+applying+cyclic+loads+to+connective+tissues+under+displacement+or+force+control%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control.</a> Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+loading+inhibits+expression+of+MMP-3+but+not+MMP-1+in+an+in+vitro+rabbit+flexor+tendon+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Biomech%22%5BJournal%5D)">Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model.</a> Clin Biomech. , In Press Forthcoming.</li>
<li>Asundi, K. R., Rempel, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MMP-1%2C+IL-1%CE%B2+and+COX-2+mRNA+Expression+is+Modulated+by+Static+Load+in+Rabbit+Flexor+Tendon%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon.</a> Ann Biomed Eng. , In Press Forthcoming.</li>
</ol>

Das Video zeigt ein neues System für die gleichzeitige Laden von bis zu vier Live-Sehnen in Gewebekultur. Typische loading Laufzeiten sind 2 bis 48 Stunden. Nach dem Laden werden die Sehnen entfernt und verarbeitet für die Genexpression. Das System ermöglicht die Untersuchung der Wirkung von Be-Muster auf Veränderungen in Genen, die mit degenerativen Veränderungen in der Sehne verbunden sind. Diese Experimente können einen Einblick in die Mechanismen von Verletzungen mit sich wiederholenden Belastung verbundene Dienstleistungen zu erbringen...

Custom 4 Linear Actuator Ladesystem warmen Wasserbad 50 ml Röhrchen Sehnen (Kaninchen) Sterile Medien

ex vivo mechanische belastung der sehnen

Ex vivo Mechanical Loading of Tendon

Verletzungen der Sehnen (zB Handgelenk Tendinitis, epicondyltis) durch Übernutzung sind in sportlichen Aktivitäten und am Arbeitsplatz verbreitet. Die meisten sind mit gleichbleibend hohe Kraft der Hand-Aktivitäten verbunden. Die Mechanismen der zellulären und strukturellen Schäden aufgrund zyklischer Belastung sind nicht bekannt. Der Zweck dieses Videos ist es, ein neues System, das gleichzeitig geladen werden können vier Sehnen in Gewebekultur zu präsentieren. Das Video beschreibt die Methoden der sterile Gewebe Ernte und wie sich die Sehnen auf ein Spannsystem, die anschließend in Medien eingetaucht und bei 37 ° C geladen Eine Klemme befestigt ist, während der andere mit einem Linearantrieb bewegt wird. Tendon Zugkraft wird mit einer Wägezelle in Serie mit dem mobilen Klammer überwacht. Die Antriebe sind mit einem LabView Programm gesteuert. Die vier Sehnen können wiederholt mit unterschiedlichen Mustern des Ladens, Repetitionsrate, Belastungsgeschwindigkeit und Dauer geladen werden. Loading kann für ein paar Minuten bis 48 Stunden fortgesetzt werden. Am Ende der Belastung sind die Sehnen entfernt, und die Mitte der Substanz für biochemische Analysen extrahiert. Dieses System ermöglicht die Untersuchung der Auswirkungen von Be-Muster auf die Genexpression und strukturellen Veränderungen in der Sehne. Letztlich kann Mechanismen von Verletzungen durch Überbeanspruchung Studien mit den Ergebnissen angewandt zur Behandlung und Prävention sein.

Ein neues in vitro-System für die gleichzeitige Laden vier Sehnen in der Kultur beschrieben wird.

Ex vivo mechanische Belastung der Sehnen

Sehnenverletzungen (z. B. Handgelenkssehnenscheidenentzündung, Epicondylitis) aufgrund von Überlastung sind bei sportlichen Aktivitäten und am Arbeitsplatz häufig. Die meisten davon stehen im Zusammenhang mit ...

Mein Name ist David Rempel. Ich bin Dozent an der Abteilung für Bioingenieurwesen an der University of California in Berkeley. Das Experiment, das Sie sehen werden, beinhaltet das Dehnen von Sehnen, und das eigentliche Ziel besteht darin, die zugrundeliegenden Mechanismen von Sehnenerkrankungen am Handgelenk und Ellbogen zu verstehen.Diese Sehnenstörungen sind bei Athleten und Arbeitnehmern, die wiederholte Handarbeit verrichten, häufig. Krish Sundi, einer der Doktoranden in unserem Labor, wird mehrere Funktionen des Systems demonstrieren, insbesondere die Messung der Querschnittsfläche der Sehne. Er wird die Sehnen in die Aktuatoren einlegen.Er wird demonstrieren, wie das System die Sehne über einen Zeitraum von 24 Stunden zyklisch belastet, und anschließend die Sehne aus dem System entfernen. Gut, das ist das Belastungssystem, das wir entworfen und gebaut haben. Wie Sie sehen, besteht es aus sechs Aktuatoren.Es handelt sich um hochpräzise Aktuatoren, die in der Lage sind, eine Verschiebung von einem Mikrometer zu erzeugen. In Reihe mit dem Aktuator befindet sich eine Kraftmessdose, um die auf die Sehnen ausgeübten Kräfte zu erfassen. In Reihe mit der Kraftmessdose sind diese Klem

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieser Artikel beschreibt die experimentellen Verfahren zur Rattenschwanzsehnen für biomechanische und mechanobiological Studien vorzubereiten. Einige Funktionen der wichtigsten Schritte in Vorbereitung sind nachgewiesen, beginnend mit der Extraktion Querschnittsfläche Messung, Spülen und Laden in den Bioreaktor Kammer.

Vorbereitung der Rattenschwanzsehnen für Biomechanik und Mechanobiological Studies

Ein In vivo Nager-Modell der Kontraktion-induzierte Verletzung und nicht-invasive Überwachung von Recovery

Wir haben eine neuartige mechanische Belastung Bioreaktor uniaxialen oder biaxialen mechanischen Belastung zu einer Knorpel Biokomposit können vor der Transplantation in eine Anwendung Gelenkknorpeldefekt.

Entwurf eines Biaxiale Mechanische Belastung Bioreaktor für Tissue Engineering

Ein neuartiges Bildgebungsprotokoll wurde entwickelt, das einen speziellen motorbetriebenen mechanischen Aktuator verwendet, um die Messung von Echtzeitreaktionen auf mechanische Dehnung in lebenden Zellen zu ermöglichen. Das für die Mechanobiologie relevante System kann Dehnungen von bis zu 20 % aufbringen und ermöglicht gleichzeitig eine Bildgebung nahezu in Echtzeit mit konfokaler oder Rasterkraftmikroskopie.

Live Cell Imaging bei Mechanical Stretch

Wir beschreiben ein in vivo Protokoll zur Messung der Dorsalflexion des Fußes nach Stimulation des Peroneusnervs und Kontraktion des vorderen cruralen Kompartiments der Hintergliedmaße der Ratte. Solche Messungen sind ein unverzichtbares translationales Werkzeug zur Bewertung der Skelettmuskelpathologie und der Tissue Engineering-Ansätze zur Muskelreparatur und -regeneration.

Anwendungen<em&gt; In Vivo</em&gt; Funktionstest der Ratte Vorderer Schienbeingewebe Skeletal Muscle Repair Engineered für die Bewertung

Das Protokoll beschreibt effiziente und reproduzierbare zahnfeste biomechanische Prüfverfahren für murine Sehnen durch die Verwendung von kundenspezifischen 3D-gedruckten Vorrichtungen.

Biomechanische Prüfung von Murine tendons

Ein dreidimensionales uniaxiales mechanisches Stimulations-Bioreaktorsystem ist ein idealer Bioreaktor für tenogen-spezifische Differenzierung von Sehnenstammzellen und Neotendonbildung.

Anwendung eines dreidimensionalen uniaxialen mechanischen Stimulations-Bioreaktorsystems zur Induzieren tenogener Differenzierung von tendonabgeleiteten Stammzellen

In diesem Artikel wird ein Open-Source-Algorithmus zur digitalen Bildkorrelationsalgorithmus zur Messung lokaler 2D-Gewebestämme in Sehnenexplantaten beschrieben. Die Genauigkeit der Technik wurde mit mehreren Techniken validiert und steht der Öffentlichkeit zur Verfügung.

Messung lokaler Gewebebelastungen in Sehnen mittels digitaler Open-Source-Bildkorrelation

Wir stellen eine maßgeschneiderte experimentelle Plattform und ein Gewebekulturprotokoll vor, das fibroknorpelige Veränderungen nachbildet, die durch das Impingement der Achillessehneninsertion in murinen Hintergliedmaßenexplantaten mit anhaltender Zelllebensfähigkeit verursacht werden, und so ein Modell für die Erforschung der Mechanobiologie des Sehnenimpingements bietet.

Maus-Hintergliedmaßen-Explantatmodell zur Untersuchung der Mechanobiologie des Achillessehnen-Impingements

Dieses Protokoll stellt ein Testsystem vor, das zur Induktion quantifizierbarer und kontrollierter Ermüdungsverletzungen in einer Ratten-Achillessehne für ein In-vivo-Modell der überlastungsinduzierten Tendinopathie verwendet wird. Das Verfahren besteht darin, den Knöchel der Ratte an einem Gelenkaktuator zu befestigen, der mit einem speziell geschriebenen MATLAB-Skript eine passive Knöcheldorsalflexion durchführt.

Ein passives Sprunggelenk-Dorsalflexions-Testsystem für ein In-vivo-Modell der Überlastungsinduzierten Tendinopathie

Hier stellen wir ein assembloides Modellsystem vor, um die zelluläre Wechselwirkung zwischen dem tragenden Sehnenkerngewebe und einem extrinsischen Kompartiment mit Zellpopulationen nachzuahmen, die durch Krankheit und Verletzung aktiviert werden. Als wichtigen Anwendungsfall demonstrieren wir, wie das System eingesetzt werden kann, um die krankheitsrelevante Aktivierung von extrinsischen Endothelzellen zu untersuchen.

Entwicklung von Sehnen-Assembloiden zur Untersuchung zellulärer Wechselwirkungen bei Krankheit und Reparatur

Erfahren Sie die ex vivo mechanische Belastung von Sehnen für Tendonforschung mit einem neuen in vitro System. Diese Methode ermöglicht präzise Messungen und reproduzierbare Ergebnisse zur Untersuchung von Sehnenerkrankungen.

Ex vivo mechanische Belastung der Sehnen

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