Name: Planung und Bau eines kostengünstigen Headstage für Simultaneous Neural Stimulation und Aufnahme in the Water Maze (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-10-13T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 9 s
Description: Lernen Sie den Bau eines kostengünstigen Headstage-Verstärkers für simultane neuronale Aufnahme und Stimulation bei wachen Tieren. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Feldpotenzialmessungen im Rattenhippocampus.

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Wir möchten Justin Riceberg für die technische Unterstützung bei der Prüfung der headstage anzuerkennen. Diese Arbeit wurde teilweise durch National Institutes of Health Grants MH65658, MH073689 und F30 AG034003-01A1, und der Mount Sinai School of Medicine unterstützt.

1. Headstage Design und Herstellung Übersicht Ein ausgefülltes headstage Vorverstärker-System besteht aus den folgenden Komponenten: <ol><li> Ein Computer entwickelt integrierte Platine mit vier Kanälen von Aufnahme-und zwei Kanäle der Stimulation. </li><li> Elektroden, die die Aufnahmen und Stimulationskanäle mit den entsprechenden Anschlüssen auf die Tiere den Kopf Bühne Relais. </li><li> Eine Leine Kabel und Schnittstelle, leitet die Ableitung und Stimulation Kanäle zu einem Schleifring-Kollektor. </li><li> Zwei Formen der Abdichtung auf den Kopf der Bühne und auf der integrierten Schaltung. </li></ol> 2. Design und Layout der Headstage Wir haben eine gedruckte integrierte Platine mit 4 Quelle Anhänger und 2 durchlaufen Stimulationskanäle mit einem kommerziell erhältlichen Software CAD-Paket (www.expresspcb.com). Ein headstage ist so konzipiert, und die Design-Pattern ist gefliest über einen größeren Bogen der Leiterplatte zu vielen headstages zu geringeren Kosten bieten. Die CAD-Datei wird auf der Leiterplatte (PCB) Fertigungsdienstleister, wo doppelseitige, zweischichtige Platten sind gedruckt oben und unten Kupferschichten mit allen Bohrungen durchkontaktiert übertragen. Die Boards verwenden Zinn / Blei-Lot überzogen Spuren und Pads, die auf Industrie-Standard FR-4 Laminat entsprechen. Die PCB kann bestellt werden und spätestens am nächsten Werktag. Individuelle headstages sind von der großen gefliesten PCB Blatt geschnitten und elektronischen Bauteile sind mit Lot verbunden. Ein Beispiel Layout der headstage in diesem Protokoll wird angezeigt (Abbildung 1). Bitte beachten Sie die Webseite des Herstellers für detaillierte Anweisungen und Tipps zur Gestaltung eines PCB. 3. Vorbereitung und Löten von elektronischen Komponenten Alle elektronischen Bauteile im Sinne dieses Protokolls sind die Surface Mount Device (SMD)-Typ. Der Fußabdruck eines jeden Gerätetyp (Widerstand, Kondensator, etc.) wurde gewählt, um verschwendeten Speicherplatz auf der headstage zu minimieren, aber auch größere SMD-Bauteile verwendet werden, wenn es erforderlich ist. <ol><li> Organisieren Sie Ihre Komponenten auf der Platine und bereiten sie für das Löten. </li><li> Legen Sie eine kleine Menge Lot auf dem Zinn / Blei-Pad gelötet werden und bringen die Spitze des Lötkolbens in der Nähe zu schmelzen und zu halten das Lot auf dem Pad. </li><li> Löten Sie die Kondensatoren zunächst Widerstände nächsten, und dann die Operationsverstärker. </li><li> Die Op-Amps kann durch Überhitzung zerstört werden. Wir verwendeten eine variable Wärme Lötkolben und die niedrigste nötige Wärme, um das Lot zu schmelzen. Minimieren Sie die Heizzeit verwendet werden, um eine gute Lötstelle zu machen. Wir fanden es praktisch, einen kleinen Vorrat an Lot, die in die Bilanz Pad fließt durch die Anwendung Lot entlang der Kommunikation oder Power Spuren zu schaffen. </li><li> Testen Sie, ob der Widerstand über Ihre Widerständen der erwartete Wert mit einem Ohmmeter erfüllt. </li><li> Überprüfen Sie jedes Pad eng um sicherzustellen, dass kein Lot verbindet oder Überbrückung benachbarten Pads. Wenn es eine Lötbrücke, Wärme und schmelzen das Lötzinn und verwenden Sie eine Pinzette, um die Brücke zu brechen. </li></ol> 4. Montage und Fertigung von Implantat und Tether-Schnittstellen <ol><li> Legen Sie eine 23 Ga hypodermic Schlauch in einen der unbenutzten Ports des 9pol ABS-Steckdose für die mechanische Unterstützung. </li><li> Schneiden Sie sechs 1 cm Länge Stücke von isolierten magnetischen Draht zum Anschluss des weiblichen Amphenol Pins, die ABS-Steckdose. </li><li> Löten Sie die weiblichen Zapfen zu den magnetischen Draht mit einer kleinen Menge von Lot in jedem Pin und durch Erwärmen des Stiftes von der Spitze. </li><li> Löten Sie die anderen Enden der magnetischen Draht in die ABS-Buchsen. </li><li> Positionieren Sie den Stecker - Buchse MillMax Pins über die Pads auf der Leine Seite des headstage, und drücken Sie die Stifte in den PCB zu einem Druck Passform zu gewährleisten. Dann löten jeden Stift zu jedem Pad in Ordnung. </li><li> Positionieren Sie die Überwurfmutter über die Nervenimplantat Stecker und schieben alle weiblichen Stifte in die gewünschten Steckplätze auf der Kunststoff-Basis. </li><li> Bewerben Acrylkleber (Krazy Glue) auf der Oberseite des ABS-Buchse und befestigen Sie es an der Basis der headstage. Kleben Sie die 23Ga Rohr auf die Leine Seite des headstage für die Unterstützung. </li></ol> 5. Abdichtung der Headstage <ol><li> Zur Abdichtung der headstage, umhüllen die gesamte integrierte Schaltung und keine freiliegenden Metallflächen mit 5 Minuten Epoxy. Lassen Sie 5-10 Minuten für die erste Trocknung und 60 Minuten für die dauerhafte Trocknung. </li><li> Poster Tack putty sollte an die Oberfläche der 9-poligen ABS-Buchse auf der ganzen weiblichen Stifte ragen aus der Tier-Ende eingesetzt werden. </li><li> Für maximale Abdichtung, sollte das ABS-Buchse und Stecker ABS gedeckt werden und die Ringmutter sollten verschärft werden. Ein schmaler Streifen Parafilm sollte rund um die Schnittstelle zu Wasser in Kontakt mit der Pin-Anschlüsse zu verhindern gewickelt werden. </li></ol> Secrets to Success <ol><li> Beim Löten der Operationsverstärker nicht überhitzen die Kunststoff-Paket. Wenn essichtbar Brennen oder Schmelzen, entfernen Sie die Op-Amp und ersetzen Sie es. Wenn zuviel Hitze kann der Operationsverstärker ohne sichtbare Schmelz beschädigen. Testen Sie jeden Kanal mit einem Funktionsgenerator nach dem Löten. </li><li> Stellen Sie sicher, es gibt keine streunenden Verbindungen oder Lötbrücken auf der headstage. Entlötlitze kann verwendet werden, um Komponenten zu entfernen oder streunenden Lot sein. </li></ol> 6. Repräsentative Ergebnisse Eine gute Aufnahme wird ein Signal einer Eingangsquelle ohne Schneiden in und out während der Bewegung zu folgen. Um zu testen, die headstage, sollte der Benutzer einen Funktionsgenerator als Eingang für jede Aufnahme pin Nutzung und Auswertung der Signale in der Mühle Max-Header-Ausgang enden. Körperlich Bewegung des headstage sollte keinen Einfluss auf die Form der aufgezeichneten Signale. <img src="/files/ftp_upload/2155/2155fig1.jpg" alt="Abbildung 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1. (A) Schematische Darstellung der obersten Schicht der Leiterplatte (PCB). Rote Linien zeigen Kupferbahnen. Gelbe Linien zeigen optionale Siebdruck-Schicht für die Positionierung von elektronischen Bauteilen. Dargestellt sind die Operationsverstärker Platzierung (Zentral gelbes Quadrat), Widerstände (kleinere gelbe Quadrate) und Kondensatoren (kleinste gelbe Quadrate). (B) Schematische Darstellung der unteren Schicht der Leiterplatte. Grünen Linien Kupferbahnen anzuzeigen. Große grüne gefüllten Bereich stellt Bodenplatte. A-Modell-Datei von dieser schematischen steht zum Download zur Verfügung gestellt.

<ol><li>Morris, R. G., Garrud, P., Rawlins, J. N., O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Place+navigation+impaired+in+rats+with+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Place navigation impaired in rats with hippocampal lesions.</a> Nature. 297, 681-683 (1982).</li>
<li>Rolston, J. D., Gross, R. E., Potter, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+low-cost+multielectrode+system+for+data+acquisition+enabling+real-time+closed-loop+processing+with+rapid+recovery+from+stimulation+artifacts.+Front%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroengineering%22%5BJournal%5D)">A low-cost multielectrode system for data acquisition enabling real-time closed-loop processing with rapid recovery from stimulation artifacts. Front.</a> Neuroengineering. 2, 12-12 (2009).</li>
<li>Fee, M. S., Leonardo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miniature+motorized+microdrive+and+commutator+system+for+chronic+neural+recording+in+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Miniature motorized microdrive and commutator system for chronic neural recording in small animals.</a> J. Neurosci. Methods. 112, 83-94 (2001).</li>
<li>Shirvalkar, P. R., Rapp, P. R., Shapiro, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bidirectional+changes+to+hippocampal+theta+gamma+oscillations+predict+memory+for+recent+spatial+episodes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Bidirectional changes to hippocampal theta gamma oscillations predict memory for recent spatial episodes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (15), 7054-709 (2010).</li>
</ol>

Wasser Labyrinth auf Verhaltensänderungen Aufgaben bieten effektive Werkzeuge, um Tiere zu kognitiven Fähigkeiten und Darstellungen in Echtzeit 1-Sonde. Die Verwendung von leichten und kostengünstigen headstage Vorverstärker ist besonders kritisch in Verhaltenstherapie Neurophysiologie Anwendungen, bei denen das Wasser Labyrinth. Da entweicht das kalte Wasser bietet die intrinsische Motivation für die Tiere in dieser Aufgaben kann ihr Verhalten in wiederholten Versuchen, ohne die Schwierigkeiten zu motivieren...

<table><tbody><tr><td>Kundenspezifische integrierte Schaltungsplatine</td><td>ExpressPCB.com</td><td>Custom</td><td>2-lagige doppelseitige Leiterplatte</td></tr><tr><td>SMD-Widerstände</td><td>Mouser Electronics</td><td>RK73B1JTTDD156J</td><td>1/10 W, 15 MΩ, 0603, Dickschicht</td></tr><tr><td>SMD-Kondensatoren</td><td>Newark Inc</td><td>0402YD104KAT2A</td><td>0,1 µF (0402)</td></tr><tr><td>SMD-Operationsverstärker (Vierfach-FET)</td><td>Mouser Electronics</td><td>595-TLC2274AIPW</td><td>Vierfach-FET – geringes Rauschen</td></tr><tr><td>9-poliger ABS-Steckverbinder</td><td>Ginder Scientific</td><td>GS09SKT-220</td><td>Für die Tierverbindung</td></tr><tr><td>9-poliger ABS-Stecker</td><td>Ginder Scientific</td><td>GS09PLG-220</td><td>Zur Implantation beim Tier</td></tr><tr><td>Schwarze Delrin-Ringmutter</td><td>Ginder Scientific</td><td>GS09BDN-220</td><td></td></tr><tr><td>Schwarze Delrin-Deckelmutter</td><td>Ginder Scientific</td><td>GS09BDC-220</td><td>Zum Schutz des Implantats des Tieres&amp;rsquo;s</td></tr><tr><td>Amphenol-Stifte (männlich)</td><td>Ginder Scientific</td><td>220-P02</td><td></td></tr><tr><td>Amphenol-Stifte (weiblich)</td><td>Ginder Scientific</td><td>220-S02</td><td></td></tr><tr><td>5-Minuten-Epoxidharz</td><td>Devcon Inc.</td><td>S-208 / 20845</td><td></td></tr><tr><td>Poster-Tack-Knetmasse</td><td>Elmer&amp;rsquo;s</td><td>026000015318</td><td></td></tr><tr><td>Zinnlot mit Flussmittelkern</td><td>Radio Shack</td><td>64-009</td><td></td></tr><tr><td>Lötstation</td><td>Weller</td><td>Pyropen WSTA6</td><td>(einstellbare Temperatur)</td></tr><tr><td>Metallspitzzange</td><td>Fine Science Tools</td><td>Größe 5</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm-Blätter</td><td>American National Can</td><td>Parafilm 4&quot; x 250&amp;rsquo;</td><td></td></tr><tr><td>Lackdraht</td><td>Belden</td><td>8052</td><td>Enamel Coated</td></tr><tr><td>Amperemeter/Multimeter</td><td>Fluke Biomedical</td><td>77 Multimeter</td><td></td></tr><tr><td>Millmax-Doppelreihen-Steckverbinder</td><td>Mill-Max</td><td>575 - 002101</td><td>0,05&quot;</td></tr><tr><td>Lötwick</td><td>Chemtronics</td><td>7-10L</td><td>0,75 in.</td></tr></tbody></table>

planung und bau eines kostengünstigen headstage für simultaneous neural stimulation und aufnahme in the water maze

Design and Construction of a Cost Effective Headstage for Simultaneous Neural Stimulation and Recording in the Water Maze

Headstage Vorverstärker und Quelle Anhänger werden üblicherweise verwendet, um neuronale Aktivität in der Verhaltensforschung Neurophysiologie Experimenten zu studieren. Verfügbaren kommerziellen Produkte sind oft teuer und nicht leicht angepasst, und nicht Tauchpumpe. Hier beschreiben wir eine Methode zur Planung und Errichtung einer maßgeschneiderten, integrierten Schaltkreis headstage zur gleichzeitigen 4-Kanal-neuronale Aufnahme und 2-Kanal-Simulation an wachen, sich verhaltenden Tier. Die headstage ist das Ergebnis eines freien, kommerziell erhältlichen CAD-type-Design-Paket, und kann leicht modifiziert werden, um verschiedene Skalen (zB Kanäle hinzufügen) unterzubringen. Eine angepasste Platine ist mit Hilfe Surface Mount Widerstände, Kondensatoren und Operationsverstärkern, die Einheit zu gewinnen Source-Folger-Schaltung zu bauen. Die headstage ist wasserdicht mit einer Kombination von Epoxidharz, Parafilm und ein synthetischer Kautschuk putty gemacht. Wir haben dieses Gerät verwendet, um lokale Feldpotenziale aufzeichnen und stimulieren verschiedene Hirnregionen gleichzeitig über unabhängige Kanäle in Ratten schwimmen in einem Wasser-Labyrinth. Die Gesamtkosten belaufen sich auf &lt;$ 30/unit und können leicht hergestellt werden.

Wir präsentieren eine Low-Cost-Methode zu entwerfen und zu konstruieren ein Licht headstage Vorverstärker mit gleichzeitiger neuronalen Ableitung und Stimulation Fähigkeit. Dieses Gerät kann für den Einsatz abgedichtet werden in schwimmenden Tieren.

Planung und Bau eines kostengünstigen Headstage für Simultaneous Neural Stimulation und Aufnahme in the Water Maze

Headstage-Vorverstärker und Source-Follower werden häufig zur Untersuchung der neuronalen Aktivität in verhaltensphysiologischen Experimenten eingesetzt. Verfügbare kommerzielle ...

Dieses Video demonstriert ein Verfahren zum Aufbau eines Vorverstärkersystems für eine Kopfhalterung, das gleichzeitig die Aufzeichnung und Stimulation chronisch implantierten Elektroden bei wachen, verhaltensaktiven Tieren ermöglicht. Zunächst wird eine Leiterplatte für eine Kopfhalterung mit einer bestimmten Anzahl von Aufzeichnungs- und Stimulationskanälen entworfen. Zwei Beispiele für Source-Follower-Schaltungen werden gezeigt.Die elektronischen Bauteile werden anschließend an die Leiterplatte verkauft, und die Anschlüsse für die Kopfverstärkerstufe und den flexiblen Kabelverbinder werden konstruiert, um eine Schnittstelle zwischen der Kopfverstärkerstufe und dem Implantat des Tieres bereitzustellen. Da keine losen Verbindungen im System vorhanden sind, können zuverlässige Aufzeichnungen der lokalen Feldpotentiale aus dem Hippocampus der Ratte gewonnen werden. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden, wie dem Kauf eines kommerziell erhältlichen Kopfverstärker-Verstärkersystems, liegt darin, dass diese Methode Tausende von Dollar kostengünstiger sein kann und leicht an spezifische Stimulations- und Ableitexperimente angepasst werden kann.Da diese Methode di

design-construction-cost-effective-headstage-for-simultaneous-neural

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Das Design, die Fertigung und Montage von einer ultra-light motorisierten Microdrive beschrieben. Das Gerät bietet eine kostengünstige und einfach zu bedienende Lösung für chronische Aufnahmen von einzelnen Einheiten in kleinen verhaltenden Tier.

Konstruktion und Montage eines Ultra-light Motorisierte Microdrive für chronische Neural Recordings in Kleintiere

Quelle: Moore, J. D., et al. Juxtazelluläre Überwachung und Lokalisierung einzelner Neuronen innerhalb subkortikaler Hirnstrukturen von wachen, kopfgefesselten Ratten. J. Vis. Exp. (2015)Dieses Video zeigt die Methode der juxtazellulären Aufzeichnung und Färbung bei einer gefesselten, wachen Ratte. Das Verfahren beinhaltet die Aufzeichnung von Signalen von Neuronen und die Injektion von Farbstoff, um die Aufnahmestelle genau zu lokalisieren. Diese Technik ermöglicht eine genaue Zuordnung der...

Juxtazelluläre Aufzeichnung und Färbung zur präzisen Kartierung der neuronalen Aktivität bei einer wachen Ratte 

Wir beschreiben Protokolle für die Ausbildung von Ratten bei chronischer elektrophysiologischen Ableitungen in voll automatisierten kognitiven Aufgaben auf einer Bodenprojektion Maze.

Automatisierte kognitive Anforderungen für die Aufnahme Neuronale Aktivität Mit einer Bodenprojektion Maze

Shuttle-box Vermeidung Lernen wird in Behavioral Neuroscience etablierte. Dieses Protokoll beschreibt, wie Shuttle-Box-Lernen bei Nagetieren mit ortsspezifischen elektrischen intracortical Mikrostimulation (ICMS) und gleichzeitige chronische in vivo-Aufnahmen als Werkzeug, um mehrere Aspekte des Lernens und Wahrnehmung studieren kombiniert werden.

Kombinierte Shuttle-Box-Training mit Elektrophysiologische Cortex Ableitung und Stimulation als ein Instrument zur Wahrnehmung und Lernen Studie

Ein kabelloses, bidirektionale System für neuronale Mehrkanal-Aufnahmen und Stimulation in Ratten frei Verhalten wird eingeführt. Das System ist leicht und kompakt, so dass nur minimale Auswirkungen auf die Futtersorten Verhaltensrepertoire. Darüber hinaus bietet dieses bidirektionale System ein ausgefeiltes Instrument um kausale Zusammenhänge zwischen Aktivierungsmuster Gehirn und Verhalten zu beurteilen.

Ein kabelloses, bidirektionale Schnittstelle für In Vivo Aufnahme und Stimulation der neuronalen Aktivität in Ratten frei Verhalten

Eine neuartige drahtlose Technik zur Aufzeichnung extrazellulärer neuronaler Signale aus dem Gehirn frei schwimmender Goldfische wird vorgestellt. Das Aufnahmegerät besteht aus zwei Tetrodes, einem Microdrive, einem neuronalen Datenlogger und einem wasserdichten Gehäuse. Alle Teile sind mit Ausnahme des Datenloggers und seines Anschlusses maßgeschneidert.

Drahtlose elektrophysiologische Aufzeichnung von Neuronen durch bewegliche Tetrodes in frei schwimmenden Fischen

Das hier vorgestellte Protokoll liefert Informationen zur simultanen Elektroenzephalografie (EEG) und Verhaltensbeurteilung in Echtzeit. Wir haben alle Schritte, die mit diesem Protokoll verbunden sind, als attraktive Lösung für Forscher in vielen Bereichen der Neurowissenschaften diskutiert, insbesondere in Lern- und Gedächtnisbereichen.

Simultane Überwachung der drahtlosen Elektrophysiologie und des Gedächtnisverhaltenstests als Werkzeug zur Untersuchung der Neurogenese des Hippocampus

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Konstruktion von maßgeschneiderten Mikroelektrodenarrays, um lokale Feldpotentiale in vivo aus mehreren Gehirnstrukturen gleichzeitig aufzuzeichnen.

Aufbau von lokalen Feldpotential-Mikroelektroden für in vivo Aufnahmen aus mehreren Gehirnstrukturen gleichzeitig

Ein kostengünstiges elektroenzephalographisches Aufzeichnungssystem in Kombination mit einer millimetergroßen Spule wird vorgeschlagen, um die transkranielle Magnetstimulation des Mäusegehirns in vivo zu steuern. Unter Verwendung herkömmlicher Schraubenelektroden mit einem speziell angefertigten, flexiblen Multielektroden-Array-Substrat kann als Reaktion auf die transkranielle Magnetstimulation eine Multi-Site-Aufzeichnung aus dem Mäusegehirn durchgeführt werden.

Kostengünstiges elektroenzephalographisches Aufzeichnungssystem in Kombination mit einer millimetergroßen Spule zur transkraniellen Stimulation des Mäusegehirns in vivo

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung eines speziell entwickelten Aufzeichnungsgeräts und von Elektroden zur Aufzeichnung lokaler Feldpotentiale und zur Untersuchung des Informationsflusses im Hippocampus der Maus und im präfrontalen Kortex.

Duale extrazelluläre Aufzeichnungen im Hippocampus der Maus und im präfrontalen Kortex

Lernen Sie den Bau eines kostengünstigen Headstage-Verstärkers für simultane neuronale Aufnahme und Stimulation bei wachen Tieren. Diese Methode ermöglicht zuverlässige Feldpotenzialmessungen im Rattenhippocampus.

Planung und Bau eines kostengünstigen Headstage für Simultaneous Neural Stimulation und Aufnahme in the Water Maze

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