Name: Organotypischen Kultur der E18 Gehirn von Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: Lernen Sie die organotypische Kultivierung von E18-Rattenhirnen für die Neurowissenschaft. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Hirnentwicklung und neuronaler Migration in vitro.

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organotypischen kultur der e18 gehirn von ratten

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

Organotypischen Kulturen von embryonalen Nagetier Gehirne sind weit verbreitet, um die Entwicklung des Gehirns zu studieren. Während es oft Vorteile, eine in-vivo-System, ermöglichen organotypischen Kulturen zu einem zu einer Reihe von Manipulationen, die nicht gegenwärtig machbar in-vivo durchzuführen. Bis heute organtotypic embryonalen Hirnschnitt Kulturen wurden verwendet, um einzelne Zellen mit Zeitraffer-Mikroskopie folgen, manipulieren die Expression von Genen in den Ganglien-emanances (eine Region, die schwer zu in-utero Elektroporation Ziel ist), sowie für die pharmakologische Studien. In diesem Video-Protokoll zeigen wir, wie an organotypischen Kulturen von Ratten embryonalen Tag 18 Embryonen zu machen. Das Protokoll beinhaltet Zerlegung der Embryonen, die Einbettung auf Eis in niedrig schmelzende Agarose, schneiden die embedded brains am Vibratom und schließlich Beschichtung der Scheiben auf Filter in Kulturschalen. Dieses Protokoll ist auch in seiner jetzigen Form zu machen organotypischen Kulturen aus verschiedenen embryonalen Alter sowohl für Ratten und Mäusen anwendbar.

Organotypischen Kultur der E18 Gehirn von Ratten

Organotypische Schnittkulturen aus embryonalen Nagetiergehirnen werden häufig eingesetzt, um die Gehirnentwicklung zu untersuchen. Während ein In-vivo-System oft Vorteile bietet, ...

Mein Name ist Laura Elias. Ich bin Doktorandin im Bereich Neurowissenschaften und arbeite im Labor von Arnold K. Stein. Wir befinden uns am Institut für Regenerationsmedizin hier an der UCSF, und heute werde ich Ihnen zeigen, wie man organotypische Schnittkulturen von E18-Rattengehirnen herstellt.Dieses Verfahren beinhaltet das Herausschneiden der Gehirne, das Einbetten in Low-Melt-Agarose, das Schneiden auf dem Viome und das Gewinnen Ihrer Koronarschnitte sowie das anschließende Platzieren in das Schnittkultursystem. Für dieses Verfahren der Schnittkultur verwenden wir einige wichtige Geräte und Reagenzien. Sie benötigen ein Stereomikroskop, um die Gehirne herauszuschneiden.Wir verwenden dieses V ebenfalls wie ein VT 1000 S Vibram, und das ist ein gutes System zum Schneiden der Schnitte. Der Kleber kann wichtig sein. Wir verwenden diesen Lock-Typ für einen Kleber, der die Gehirne sehr gut verklebt, da die Gehirne manchmal abfallen, wenn Sie den falschen Kleber verwenden, während Sie versuchen, sie zu schneiden, und das kann problematisch sein.Wir verwenden außerdem diese Milli-Cell-Filter, auf denen wir unsere Schnitte während der Kultur ausplattieren, und dies ist ebenfalls ein w

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Die organoptypic Hippocampus Stück Kultur-Modell ist...

Die Organotypische hippokampalen Slice-Kultur-Modell für die Prüfung neuronaler Schädigung

Dieses Protokoll beschreibt eine organotypischen Slice-Assay für die postnatale Gehirn und hochauflösenden Zeitraffer-Bildgebung von Neuroblasten Migration in der rostralen wandernde Stream optimiert.

Ein organotypischen Assay für High-Resolution Time-Lapse Imaging neuronaler Migration in der postnatalen Gehirn

Dies ist ein Protokoll zu erstellen und Aufrechterhaltung eines Neokortex Scheibe Vorbereitung in organotypischen Kultur zum Zwecke der Herstellung elektrischer Aufnahmen von pyramidalen Neuronen.

Whole Cell Aufnahme von einem organotypischen Vorbereitung der Neocortex

Eine Methode zur organotypischen Slices aus dem E12.5 murinen embryonalen Mittelhirns zu erzeugen, ist beschrieben. Die organotypischen Kulturen verwendet, um das Verhalten von dopaminergen Neuronen oder anderen ventralen Mittelhirn Nervenzellen zu beobachten.

Organotypischen Kulturen von embryonalen ventralen Mittelhirn: Ein System zur Dopaminerge Neuronale Development Study In-vitro-</em

Um eine rasche Beurteilung der Funktion von Genen in der Entwicklung der Hirnrinde führen, beschreiben wir Verfahren, die...

Methoden zur Untersuchung der neuronalen Morphogenese:<em&gt; Ex-vivo-</em&gt; RNAi Elektroporation in embryonale Murine Cerebral Cortex

Dieses Video demonstriert eine Methode zur Herstellung von organotypischen Hippocampus-Schnittkulturen aus dem Gehirn eines Rattenwelpen. Es beschreibt die Schritte bei der Dissektion des Hippocampus, das Schneiden und die Kulturbedingungen, die erforderlich sind, um die Lebensfähigkeit und das Wachstum der Zellen in den Hippocampus-Schnitten zu fördern und letztendlich organotypische Schnittkulturen zu erzeugen.

Präparation von organotypischen Schnittkulturen aus dem Hippocampus eines Rattenwelpen

Das Video zeigt eine Methode, um rhinale Cortex-Hippocampus-Schnitte aus dem Gehirn eines Rattenwelpen zu gewinnen und sie in membranösen Inserts innerhalb einer mit Medien gefüllten Multiwell-Platte für die weitere Analyse zu kultivieren.

Vorbereitung von rhinalen Cortex-Hippocampus-Schnitten aus dem Gehirn eines Rattenwelpen

Eine Technik zur Untersuchung von NG2-Zellen und Oligodendrozyten unter Verwendung eines Schnittkultursystems des Vorderhirns und des Kleinhirns wird beschrieben.  Diese Methode ermöglicht die Untersuchung der Dynamik der Proliferation und Differenzierung von Zellen innerhalb der Oligodendrozytenlinie, bei der die extrazelluläre Umgebung leicht manipuliert werden kann, während die Zytoarchitektur des Gewebes erhalten bleibt.

Organotypischen Kulturen zu Oligodendrozyten Dynamik und Myelinisierung Studieren

Hier beschreiben wir eine Technik zur Untersuchung Hippocampus postnatale Neurogenese mit dem organotypischen Kulturtechnik. Dieses Verfahren ermöglicht die in vitro Manipulation von Neurogenese und ermöglicht die direkte Anwendung von pharmakologischen Wirkstoffen an die kultivierten Hippocampus.

Organotypischen Kulturen für Studien der postnatale Neurogenese

Wir beschreiben ein Protokoll zur zelltypspezifischen Expression des genetisch codierten FRET-basierten Sensors ATeam1.03YEMK in organotypischen Scheibenkulturen des Mausvorhirns. Darüber hinaus zeigen wir, wie dieser Sensor für die dynamische Bildgebung von zellulären ATP-Spiegeln in Neuronen und Astrozyten verwendet wird.

Bildgebung von intrazellulärem ATP in organotypischen Gewebescheiben des Maushirns mit dem FRET-basierten Sensor ATeam1.03YEMK

Hier beschreiben wir die Herstellung von rhinalen Kortex-Hippocampus organotypischen Scheiben. Unter einem allmählichen und kontrollierten Serumentzug zeigen diese Scheiben sich entwickelnde epileptische Ereignisse und können als Ex-vivo-Modell der Epileptogenese angesehen werden. Dieses System stellt ein hervorragendes Werkzeug zur Überwachung der Dynamik spontaner Aktivität sowie zur Beurteilung des Fortschreitens neuroinflammatoratorischer Merkmale im Verlauf der Epileptogenese dar.

Ein Modell der Epileptogenese in rhinalen Kortex-Hippocampus Organotypischen Schnittkulturen

Lernen Sie die organotypische Kultivierung von E18-Rattenhirnen für die Neurowissenschaft. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Hirnentwicklung und neuronaler Migration in vitro.

Organotypischen Kultur der E18 Gehirn von Ratten

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