Name: Kontrastverstärkten Vessel Imaging mit MicroCT (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-27T17:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Erfahren Sie die kontrastverstärkte Gefäßbildgebung mit MicroCT zur Analyse vaskulärer Netzwerke in lebenden Mäusen. Diese Methode ermöglicht hochwertige Daten für Tumorforschung und Therapiebewertung.

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1. Injektionen Vor intravenöse Schwanzvene der Injektion sollte die Rute Haut mit Isopropylalkohol Peelings für Sterilisation gereinigt werden. Über den distalen Schwanzvene mit geringer Totraum ½ CC U; Mäuse sollten dann mit 0,2 ml/20 g einer 20-mg Iod / ml jodhaltigen Kontrastmittels bloodpool (Binito Biomedical, Inc. in Ottawa, ON, Canada Exia 160XL) injiziert werden -100 28G ½ Insulinspritzen (Product # 329461, Becton Dickinson and Company, NJ, USA). 2. Tierische Vorbereitung Nach 10 Minuten nach der Injektion sollten die Tiere für MicroCT Bildgebung vorbereitet werden. Erstens sollte das Tier in einer Box mit 2% Isofluran in 100% Sauerstoff bei einer Rate von 2,5 Liter pro Minute betäubt. Ein Auge Schmier-Salbe angewendet, um ein Austrocknen der Hornhaut während der Narkose zu verhindern. Die Körpertemperatur sollte bei 37 ° C durch ein Heizkissen aufrechterhalten werden. 3. MicroCT Imaging Mäuse dann sollte auf einer MicroCT Einheit in der Lage, lebende Tiere Scans durchführen gescannt werden. Zur Minimierung der Bewegungsartefakte und Stabilität, können Mäuse in einem kommerziell erhältlichen Multi-Modalität Kammer (Numira Biosciences, Salt Lake City, UT) mit Bestimmung für Luft-und Abgas-gelegt werden. Zur Vermeidung einer Hypothermie Folge auf das Tier während MicroCT Scans, Gel Pads (Hot Kältetherapie Brace, CVS Pharmacy Woonsocket, RI), Warmer Toe (Heat Factory, Vista, CA) oder Thermipaq Ton Pads (Thermik, Springfield, IL) können verwendet werden. Legen Sie diese Heizkissen unter dem Schaum Bett, um die Maus bei 37 ° C zu halten, während die Vermeidung von direktem Kontakt mit dem Tier. Vitalfunktionen des Tieres wie Körpertemperatur, Atmung und Herzfrequenz sollte durch Anwendung der Small Animal Monitoring und Gating-Systeme wie z. B. SA Instruments (Stony Brook, NY) werden. Die folgende Abbildung Protokoll kann als Richtschnur, um festzustellen, das entsprechende Scan-Parameter für jede MicroCT Einheiten verwendet werden. Die Tiere in diesem Experiment verwendet wurden bei 93 mm Auflösung auf einem volumetrischen CT-Scanner von GE eXplore Locus (GE Healthcare, London, Ontario) gescannt. Diese volumetrische Scanner verwendet eine 3500 x 1750 CCD-Detektor für Feldkamp Cone-Beam-Rekonstruktion. Die Plattform unabhängige Parameter von Strom, Spannung und Belichtungszeit konstant gehalten wurden, bei 450 uA, 80 kVp und 100 ms jeweils. Die Standard-Parameter der Belichtungszeit können Frames-per-View und die Anzahl der Ansichten verändert werden und könnte 100 ms, 5-8 und 360-720, jeweils mit insgesamt Scan-Zeit von etwa 20 Minuten. Die Bilder wurden mit dem Hersteller-eigenen EVSBeam Software rekonstruiert. 4. Image Rendering Das rekonstruierte MicroCT Daten können für fortgeschrittene Isofläche, eindimensionalen oder zweidimensionalen Transferfunktion Rendering Bilder mit Seg3D Bildverarbeitungssoftware (Seg3D, verwendet werden <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). 5. Repräsentative Ergebnisse Bitte beachten Sie die beigefügte Abbildung eines Wildtyp-Maus mit eXIA160XL mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt. <img src="/files/ftp_upload/2377/2377fig1.jpg" alt="Abbildung 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1. Zweidimensionale Transfer Function (2DTF) Rendering Bild eines Wildtyp-Maus erstellt mit Seg3D Bildverarbeitungssoftware (Seg3D, <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). Das Tier wurde mit eXIA160XL injiziert und 10 Minuten später bei 93 um isometrische Auflösung mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt MicroCT. Video 1. Zweidimensionale Transfer Function (2DTF) Rendering Basis 360 °-Drehung Film eines Wildtyp-Maus erstellt mit Imagevis3D Bildverarbeitungssoftware (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software). Das Tier wurde mit eXIA160XL injiziert und 10 Minuten später bei 93 um isometrische Auflösung mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt MicroCT. <a href="/files/ftp_upload/2377/2377_Suresh_Prajapati_Representative_Results.mov">Klicken Sie hier, um Video anzuschauen</a>

<ol><li>Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+in+small+animal+and+specimen+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Micro-CT in small animal and specimen imaging.</a> Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).</li>
<li>Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+Vessel+Imaging+by+Computed+Tomography+in+Live+Transgenic+Mouse+Models+for+Human+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors.</a> Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).</li>
</ol>

Alle tierischen Verfahren wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Labortieren durchgeführt und wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) an der University of Texas Health Science Center in San Antonio genehmigt.

Oberstes Ziel dieser Technik der kontrastverstärkten Schiff Bildgebung mit MicroCT ist es, optimale Verfahren zur Erzeugung von qualitativ hochwertigen Datensätze für die Analyse von vaskulären Netzwerken in lebenden Mäusen liefern. Für MicroCT Bildgebung, besseren Signal-Rausch-Verhältnis von weichem Gewebe wird durch längere Zykluszeiten mit einer erhöhten Anzahl von Ansichten und Anzahl der Frames-per-View 2 erreicht. Schiffskennzeichen hängt entscheidend genaue Weichgewebe Ide...

<table><tbody><tr><td>eXIA 160XL</td><td>Binito Biomedical, Inc.</td><td>eXIA160XL-01</td><td></td></tr></tbody></table>

kontrastverstärkten vessel imaging mit microct

Contrast Enhanced Vessel Imaging using MicroCT

Mikroskopische Computertomographie (MicroCT) bietet hochauflösende volumetrische Bildgebung der Anatomie des lebenden Kleintieren. Allerdings ist der Kontrast zwischen verschiedenen weichen Geweben und Körperflüssigkeiten von Natur aus arm an Mikro-CT-Bilder zeigen 1. Unter diesen Umständen wird Darstellung von Blutgefäßen eine fast unmögliche Aufgabe. Um dies zu überwinden und die Darstellung von Blutgefäßen exogenen Kontrastmittel eingesetzt werden, kann verbessern. Hier präsentieren wir eine Methode zur Visualisierung der Gefäßnetz in einem Nagetier-Modell. Durch die Verwendung eines lang wirkenden wässrigen kolloidalen polydisperse jodhaltigen Blut-Pool-Kontrastmittel, Exia 160XL, optimierte wir Bildaufnahmeparameter und Volumen-Rendering-Techniken für die Suche Blutgefäße in lebenden Tieren. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass eine überlegene Kontrast zwischen Knochen und Weichgewebe von Schiff zu erreichen, wurden mit mehreren Frames (mindestens 5-8 / Frames-per-View) und 360-720 Ansichten (für eine vollständige 360 ​​°-Drehung) Akquisitionen obligatorisch. Wir haben auch die Verwendung eines zweidimensionalen Transferfunktion (wo Voxel Farbe und Deckkraft war im Verhältnis zur CT-Wert und Gradient Größe zugeordnet), bei der Visualisierung der Anatomie und aus denen die Struktur von Interesse, das Blutgefäß-Netz. Gezeigt Diese vielversprechende Arbeit legt eine Grundlage für die qualitative und quantitative Bewertung der Anti-Angiogenese präklinischen Studien mit transgenen oder Xenograft Tumor-tragenden Mäusen.

Kontrastverstärkte Kleintier-Schiff Bildgebung durch MicroCT ist eine schnelle, kostengünstige und High-Throughput-Verfahren für die serielle<em&gt; In situ</em&gt; Prüfung für die Tumor-Entwicklung, für die Analyse der Bildung von Blutgefässen, die sie nähren und für nach der Reaktion von Tumoren auf präklinische therapeutische Intervention (s).

Kontrastverstärkten Vessel Imaging mit MicroCT

Die mikrocomputergestützte Tomographie (Mikro-CT) bietet eine hochauflösende volumetrische Bildgebung der Anatomie lebender kleiner Tiere. Jedoch ist der Kontrast zwischen ...

Das Ziel dieser Technik der kontrastverstärkten Gefäßdarstellung mittels mikroskopischer Computertomographie oder Mikro-CT besteht darin, eine optimale Methode zur Erzeugung hochwertiger Datensätze für die Analyse vaskulärer Netzwerke bei lebenden Mäusen bereitzustellen. Dies wird durch die intravenöse Injektion eines röntgenkontrastverstärkenden Mittels in vivo erreicht. Anschließend wird das Tier für die Mikro-CT-Bildgebung vorbereitet, indem eine Anästhesie induziert und das Tier sicher in einer Multimodalitätskammer positioniert wird, um Bewegungsartefakte während der Mikro-CT-Scans zu minimieren.Nach den Scans werden die Mikro-CT-Daten rekonstruiert und in die Visualisierungssoftware geladen. Der letzte Schritt des Verfahrens besteht darin, die Parameter der zweidimensionalen Transferfunktion anzupassen, um die Sichtbarkeit der Blutgefäße zu verbessern und Blutgefäßen, Knochen und Weichgewebe zur besseren Unterscheidung unterschiedliche Farben zuzuweisen. Letztendlich können Ergebnisse erzielt werden, die das vaskuläre Netzwerk in lebenden Tieren mittels CT-opaker, kontrastmittelverstärkter Bildgebung und der Darstellung durch eine zweidimensionale Transferfunktion zeigen.Hall

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Forschung

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Medicine

Medizin

Visualisierung der Herzkranzgefäße ist entscheidend für die Erweiterung der Kenntnisse über Herz-Kreislauf-Erkrankungen. Hier beschreiben wir ein Verfahren zum Perfundieren murinen Koronargefäße mit einem röntgendichten Silikonkautschuk (Microfil), in Vorbereitung für die Mikro-Computertomographie (μCT) Bildgebung.

Retrograde Perfusion und Abfüllung von Maus Koronargefäße als Vorbereitung für die Mikro-Computertomographie Imaging

Quelle: Choi, J. P. et al.et al. Induktion und Mikro-CT-Bildgebung von zerebralen kavernösen Fehlbildungen im Mausmodell. J. vis. exp. ( 2017)Dieses Video zeigt die Verwendung von Mikro-CT-Bildgebung zur Visualisierung von zerebralen kavernösen Malformationen (CCM) im Gehirn einer Maus. Es beschreibt die Schritte für die Probenvorbereitung, die Bildgebung und die 3D-Bildrekonstruktion, um die Dichte und Lokalisation von CCM-Läsionen im Hirngewebe zu bewerten.

Kontrastmittelverstärkte Mikro-CT-Bildgebung von zerebralen kavernösen Malformationsläsionen in einem Mausgehirn

Diese Methode beschreibt die Verwendung der Quanten-Mikro-Computertomographie (MicroCT) zur Beurteilung der kardialen Morphologie, Funktion, Durchblutung, des Stoffwechsels und der Lebensfähigkeit mit jodiertem Kontrastmittel bei Mäusen mit experimentell induzierter myokardialer Ischämie. Die Technik kann für die zerstörungsfreie longitudinale Hochdurchsatz-Bildgebung in vivo verschiedener Tiermodelle menschlicher Herzerkrankungen eingesetzt werden.

In Vivo quantitative Bewertung der myokardialen Struktur, Funktion, Perfusion und Lebensfähigkeit Mit Herz Micro-Computertomographie

Dieses Protokoll beschreibt die Anwendung von kombinierten nahen Infrarot fluoreszierende (NIRF) Bildgebung und Mikrocomputertomographie (microCT) für zerebrale Thromboemboli zu visualisieren. Diese Technik ermöglicht die Quantifizierung von Thrombus Belastung und Evolution. Die NIRF-Bildgebungstechnik zur Visualisierung von Thrombus innerhalb lebenden Tieren unter Verwendung von Gold-Nanopartikeln Thrombus in exzidierten Gehirn fluoreszenzmarkierte, während die microCT Technik visualisiert.

Kombinierte Near-Infrarot-Fluoreszenz-Bildgebung und Mikrocomputertomographie für Direkt Visualizing Cerebral Thromboembolie

Dieser Artikel beschreibt eine detaillierte Methode mit einem röntgendichten bleihaltigen Silikon-Kautschuk zu das murine Gefäßsystem zur Quantifizierung der Aorta Durchmesser in einem Mausmodell der Aortenaneurysma und Dissektion durchspülen.

Quantitative Micro-CT-Analyse der Aortopathy in einem Mausmodell der β-Aminopropionitrile-induzierte Aortenaneurysma und Dissektion

Das Ziel dieser Technik ist die ex vivo Visualisierung von pulmonalen arteriellen Netzwerken von frühpostnatalen und erwachsenen Mäusen durch Lungeninflation und Injektion einer radio-opaque polymerbasierten Verbindung über die Lungenarterie. Mögliche Anwendungen für gegossenes Gewebe werden ebenfalls diskutiert.

Vaskuläres Gießen von Erwachsenen und frühpostnatalen Mauslungen für Micro-CT Imaging

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um hochauflösende Mikrocomputertomographie-Bilder von gesunden und pathologischen großen Säugetier-Vollherzen mit kollagenselektiver Kontrastverstärkung zu erhalten.

Gewebepräparationstechniken für die kontrastverstärkte Mikro-Computertomographie-Bildgebung von Herzmodellen großer Säugetiere mit chronischen Erkrankungen

Die Doppelharzguss-Mikrocomputertomographie (DUCT) ermöglicht die Visualisierung, Digitalisierung und Segmentierung von zwei röhrenförmigen Systemen gleichzeitig, um die 3D-Analyse der Organarchitektur zu erleichtern. DUCT kombiniert die Ex-vivo-Injektion von zwei röntgenopaken Harzen, gefolgt von Mikro-Computertomographie-Scanning und Segmentierung der tomographischen Daten.

DUCT: Doppelharzguss mit anschließender Mikro-Computertomographie zur 3D-Leberanalyse

Hier beschreiben wir eine Visualisierungs- und Quantifizierungsmethode für murine Hintergliedmaßengefäße mittels Mikro-Röntgen-Computertomographie.

Probenvorbereitung für computertomographisch basierte dreidimensionale Visualisierung von Murinen Hintergliedmaßengefäßen

Unter Verwendung eines diätinduzierten Mausmodells der nicht-alkoholischen Fettlebererkrankung (NAFLD) beschreiben wir den Einsatz neuartiger in vivo Mikro-Computertomographie-Bildgebungsverfahren als nicht-invasive Methode zur Beurteilung der Progressionsstadien der NAFLD, wobei der Schwerpunkt hauptsächlich auf dem hepatischen Gefäßnetzwerk liegt, da es maßgeblich an der NAFLD-bedingten Leberdysregulation beteiligt ist.

Neuartige In-vivo-Mikro-Computertomographie-Bildgebungsverfahren zur Beurteilung des Fortschreitens der nicht-alkoholischen Fettlebererkrankung

In diesem Protokoll diskutieren wir die Implementierung eines Modells für eine erfolgreiche orthotope Lebertransplantation (OLT) bei Mäusen. Darüber hinaus werden auch Adjuvantien zur weiteren Analyse der Durchgängigkeit von Transplantaten nach erfolgreicher OLT in einer Maus diskutiert, insbesondere unter Verwendung von Mikrocomputertomographie (microCT)-Scans.

Erfolgreiche orthotope Lebertransplantation bei Mäusen mittels Mikrocomputertomographie-Angiographie

Erfahren Sie die kontrastverstärkte Gefäßbildgebung mit MicroCT zur Analyse vaskulärer Netzwerke in lebenden Mäusen. Diese Methode ermöglicht hochwertige Daten für Tumorforschung und Therapiebewertung.

Kontrastverstärkten Vessel Imaging mit MicroCT

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