Name: Kortikale Neurogenese: Übergang von Advances in das Labor zu zell-basierte Therapien (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 38 s
Description: Erfahren Sie die In-Utero-Elektroporation zur Untersuchung der kortikalen Neurogenese und Neuronenmigration im Entwicklungsstadium. Diese Methode ermöglicht Gain- und Loss-of-Function-Experimente für Gentherapien.

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kortikale neurogenese: Übergang von advances in das labor zu zell-basierte therapien

Cortical Neurogenesis: Transitioning from Advances in the Laboratory to Cell-Based Therapies

Kortikale Neurogenese: Übergang von Advances in das Labor zu zell-basierte Therapien

Mein Name ist Arnold Krickstein. Ich bin der Direktor des Instituts für Regenerationsmedizin hier an der UCSF, und mein Forschungsschwerpunkt liegt in der Entwicklungsneurobiologie. Insbesondere interessieren wir uns für die frühen Phasen der kortikalen Entwicklung, untersuchen neuronale Stamm- und Vorläuferzellen und analysieren, wie diese Neuronen erzeugen, wie diese Neuronen wandern und damit beginnen, Schaltkreise im sich entwickelnden Gehirn zu bilden, insbesondere im Kortex.Nun, die Einführung der in-utero-Elektroporation war meines Erachtens eine der bahnbrechenden Technologien, die von SDO und seinen Kollegen für die Untersuchung früher Phasen der Gehirnentwicklung entwickelt wurde, da sie Gewinn- und Verlust-funktionsexperimente für eine Vielzahl von Genen ermöglicht. Und dies relativ einfach, indem man diese Gene direkt in die neuralen Stammzellen und Vorläuferzellen einführt, die während der frühen kortikalen Entwicklung Neuronen bilden. Die Technik besteht im Wesentlichen darin, DNA in Form eines Plasmids in die Hirnventrikel eines Embryos einzuspritzen und anschließend einen kurzen elektrischen Stromstoß anzulegen, der die Plasmide in die Zellen eintreiben lässt, die d

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Neuronale Stammzellen aus dem erwachsenen Gehirn geerntet steigen in Anwendungen, die von der Grundlagenforschung der Entwicklung des Nervensystems zu erforschen mögliche klinische Anwendungen in der regenerativen Medizin eingesetzt. Dies macht eine strenge Kontrolle bei der Isolierung und Kultivierungsbedingungen verwendet werden, um diese Zellen entscheidend für experimentelle Ergebnisse klingen wachsen.

Wachsende neuronale Stammzellen aus konventionellen und Nonconventional Regionen der Volks Nagetier Gehirn

Phänotypische Wildtyp-Astrozyten und neurale Stammzellen, die von Mäusen entnommen wurden, die mit floxierten, bedingten onkogenen Allelen gezüchtet und über virale Cre-vermittelte Rekombination transformiert wurden, können zur Modellierung der Astrozytom-Pathogenese in vitro und in vivo durch orthotope Injektion von transformierten Zellen in Gehirne von syngenen, immunkompetenten Wurfgeschwistern verwendet werden.

Modellierung Astrozytom Pathogenese In-vitro- Und In Vivo Verwenden kortikale Astrozyten oder neuralen Stammzellen aus dem Bedingten, gentechnisch veränderte Mäuse

Diese Studie beschreibt eine experimentelle Plattform zur schnellen Charakterisierung von gentechnisch veränderten Stammzellen und ihrem Verhalten vor ihrer Anwendung in Langzeit-In-vivo-Transplantationsstudien zur Rettung und Reparatur des Nervensystems.

Hochdurchsatz-Charakterisierung von adulten Stammzellen für die Zuführung von therapeutischen Faktoren für neuroprotektive Strategien Engineered

Live Imaging ist ein leistungsfähiges Werkzeug zur zelluläre Verhaltensweisen in Echtzeit zu studieren. Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Time-Lapse Video-Mikroskopie des primären Hirnrinde Zellen, die eine detaillierte Untersuchung der Phasen verordnet während der Linie Weiterentwicklung von primäre neurale Stammzellen zu differenzierten Neuronen und Glia ermöglichen.

Bildgebung des primären Hirnrinde Zellen unter Verwendung einer 2D Kultursystem zu leben

Direkte neuronale Umprogrammierung erzeugt Neuronen, die im Alter von der somatischen Startzelle beibehalten. Hier beschreiben wir eine einzelne Vektor-basierte Methode um induzierte Neuronen von dermalen Fibroblasten von Erwachsenen menschlichen Spendern erhalten zu generieren.

Einfache Erstellung einer High-Yield-Kultur der induzierten Neuronen aus Menschenhaut Erwachsenen Fibroblasten

Das Ziel dieses Protokolls ist es, einen Ansatz zur Analyse des Verhaltens von adulten neuronalen Stamm-/Vorläuferzellen als Reaktion auf die chemogenetische Manipulation eines bestimmten lokalen neuronalen Schaltkreises zu beschreiben.

Assaying Circuit Spezifische Regulation von adulthippocampal neuralen Vorläuferzellen

Hier stellen wir ein Protokoll vor, das entwickelt wurde, um die Aktivität kortikaler Interneureuritoren zu manipulieren, die in den Kortex von frühen postnatalen Mäusen transplantiert wurden.

Transplantation von chemogenetisch hergestellten kortikalen Interneureuren in frühpostnatale Maushirne

Wir beschreiben ein Protokoll zur Neuprogrammierung menschlicher hautabgeleiteter Fibroblasten in induzierte neuronale Vorläuferzellen (iNPCs) und deren anschließende Differenzierung in induzierte Astrozyten (iAs). Diese Methode führt zu einer schnellen und reproduzierbaren Generierung von iNPCs und iAs in großen Mengen.

In-vitro-Modellierung für neurologische Erkrankungen mit direkter Konvertierung von Fibroblasten in neuronale Progenitorzellen und Differenzierung in Astrozyten

In dieser Studie stellen wir eine detaillierte Technik für ein einfaches, aber robustes kortikales Organoid-Kultursystem unter Verwendung von standardmäßigen feederfreien hPSC-Kulturen zur Verfügung. Dies ist ein schnelles, effizientes und reproduzierbares Protokoll zur Erzeugung von Organoiden, die Aspekte der Hirnseneszenz in vitro modellieren.

Robuste und hochreproduzierbare Erzeugung kortikaler Hirnorganoide zur Modellierung der neuronalen Seneszenz des Gehirns in vitro

Dieses Protokoll beschreibt langfristige organotypische Kulturen des adulten menschlichen Kortex in Kombination mit der intrakortikalen Ex-vivo-Transplantation von induzierten pluripotenten Stammzellen-abgeleiteten kortikalen Vorläuferzellen, die eine neuartige Methodik zur weiteren Erprobung stammzellbasierter Therapien für neurodegenerative Erkrankungen beim Menschen darstellen.

Organotypische Kulturen des adulten humanen Kortex als Ex-vivo-Modell für die Transplantation und Validierung humaner Stammzellen

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Transplantation und Verfolgung markierter Nervenzellen in menschliche Hirnorganoide.

Ein menschliches zerebrales Organoidmodell der neuronalen Zelltransplantation

Erfahren Sie die In-Utero-Elektroporation zur Untersuchung der kortikalen Neurogenese und Neuronenmigration im Entwicklungsstadium. Diese Methode ermöglicht Gain- und Loss-of-Function-Experimente für Gentherapien.

Kortikale Neurogenese: Übergang von Advances in das Labor zu zell-basierte Therapien

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