Drawing Blood von Ratten durch die Vena saphena und durch Herzpunktion

Hallo, ich bin Christine Beaton. Ich bin wissenschaftlicher Assistent im Labor von George Chen in der Abteilung für Physiologie und Biophysik an der University of California in Irvine. Und in dem Video, das Sie gerade mit Hilfe von Adriana Garcia, einer Doktorandin im Labor, sehen werden.

Ich zeige Ihnen zwei Techniken, um Ratten Blut abzunehmen. Die erste Technik, die wir Ihnen zeigen werden, ist die Entnahme von Blut aus der Stammvene. Und dies ist eine sehr nützliche Technik, wenn Sie kleine Mengen Blut von Ratten ohne Betäubung abnehmen möchten.

Zum Beispiel, wenn Sie eine pharmakokinetische Studie durchführen, die kleine Mengen Blut erfordert, aber in regelmäßigen Abständen entnommen wird. Die zweite Technik, die wir Ihnen zeigen werden, ist die Blutentnahme durch Herzpunktion. Da es sich um eine terminale Technik handelt, muss die Ratte am Ende der Blutabnahme geopfert werden.

Der Vorteil dieser Technik ist jedoch, dass Sie viel größere Mengen Blut erhalten können, mehrere Milliliter. Sobald wir den Bereich geformt haben, tragen wir normale Hautlotion auf, um zu verhindern, dass Fell herumfliegt und in die Tube gelangt und auch das Blut gerinnt. Dann übe ich mit meinem Daumen einen Druckpunkt aus, so dass sich die Vene ein wenig auswölbt, und dann durchsticht Adriana die Vene und manchmal rollt sie herum, damit wir sie nicht bekommen, und in diesem Fall stechen wir wieder hinein.

Jetzt, wo wir die Vene punktiert haben, kommen in regelmäßigen Abständen Blutstropfen heraus, also schöpfen wir sie mit Mikroröhrchen auf und wir machen das, bis wir genug Blut für unsere Asay haben oder bis kein Blut mehr herauskommt. Und je nachdem, um welche Ratte es sich handelt und wie gut die Punktion war, bekommen wir mehr oder weniger Blut, Blut aus dem Gehirn. Und damit mehr Blut austritt, pumpen wir mit dem Bein.

Dies ist die Menge an Blut, die wir normalerweise aus einer Blutabnahme aus einer Venenblutabnahme erhalten. Jetzt bin ich bereit, dir zu zeigen, wie man Kaun ausführt. Und für dieses Verfahren brauchen wir wirklich nur eine fünf Millionen verrutschte Kunststoffspritze und die 23-Gauge-Nadel.

Die Ratte trainiert also intensiv mit Alan, und ich setze eine Maske auf, das ist eine Spritze mit einem Kim-Tuch, das Alane enthält, um sicherzustellen, dass die Ratte nicht aufwacht. Ich bin Rechtshänder, also lege ich meinen linken Zeigefinger auf die Höhe des Solarplexus, um mich zu positionieren. Und um das Herz zu finden, gehe ich etwa einen Zentimeter höher, leicht nach rechts nach oben, meine Spritze mit einem Winkel von etwa 45 Grad.

Und wenn ich im Herzen bin, sollte ich einen festen Blutboden haben. Wenn ich nicht im Herzen bin, kann ich tiefer oder mehr an die Oberfläche gehen. Und mit dieser Technik sollte ich in der Lage sein, mehrere Liter Blut von einer bestimmten Ratte zu tropfen.

Wenn das Herz aufhört, hört natürlich gleichzeitig der Blutfluss auf. Du brauchst also die Ratte tief anthesis, aber du willst nicht, dass sie zu schnell stirbt. Wenn die Spritze voll ist, trenne ich mich von der Nadel und stecke sie in ein Röhrchen und lege sie langsam ab, um eine Hämolyse zu vermeiden, weil ich mein Serum später für die Gewebekultur oder zum Verdünnen meiner Medikamente aus Injektionen verwenden möchte.

Und da ich die Nadel an Ort und Stelle gelassen habe, kann ich versuchen, ob ich noch mehr Blut aus dieser Hand ziehen kann. Und nochmals, wenn der Fluss sehr klein ist, wie jetzt, bewege ich die Nadel auf und ab, um zu sehen, ob ich eine Stelle finde, an der mehr Blut entnommen werden kann. Und wenn Sie den Platz gefunden haben, möchten Sie den Zellenmotor natürlich nicht mehr bewegen.

Wir haben Ihnen gerade gezeigt, wie man Ratten Blut abnimmt, entweder aus der Vene ous oder aus einer Herzpunktion. Also viel Glück bei Ihren Experimenten.