Name: Erstellung von Reversible Cholestatische Rattenmodell (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Lernen Sie die Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells für gastroenterologische Forschung. Diese Methode nutzt Mikrochirurgie und Isofluran-Anästhesie zur Untersuchung von Leberfunktionsstörungen.

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1. Rat biliäre Anatomie Die durchschnittliche Gallengang Durchmesser und die Länge war 1 mm und 29 mm. Der durchschnittliche Abstand zwischen den Pylorus und die Papilla betrug 28 mm. Es gibt zwei wesentliche Bauchspeicheldrüsengänge die in den Gallengang offen - die vordere mündet auf der linken Seite und der hinteren mündet auf der rechten Seite. Neben diesen großen Kanälen, eine Reihe von kleineren Kanälen, die alle drei Teile der Bauchspeicheldrüse Drainage direkt öffnen, um den Gallengang. 6 2. Technik Alle Tierexperimente wurden in Übereinstimmung mit den National Institutes of Health Richtlinien für ethische Forschung durchgeführt und wurden von der Institution Research Committee und Animal Care Committee genehmigt. Männliche Sprague-Dawley-Ratten im Alter von 8 Wochen wurden für diese Demonstration verwendet. Die Ratten wurden von Charles River Laboratories in Wilmington, MA, und alle waren mehr als 300 Gramm erhalten. Ratten hatten Zugang zu Standard-Labor-Diät und wurden in Standard-Laborbedingungen untergebracht. Die Ratten wurden zunächst betäubt mit Isofluoran und hielt unter Narkose während der Operation mit Isofluoran durch eine Maske. Ein Mittellinienschnitt von 2 cm wurde ab dem xiphisternum. Nachdem die Faszie eröffnet wurde, die Leberlappen kranial wurden mit einer Sen Retraktor eingefahren, und der Zwölffingerdarm wurde zurückgezogen kaudal mit Q-Tips. Der Gallengang wurde als eine röhrenförmige Struktur in das Duodenum identifiziert. Der Gallengang wurde unter Spannung gesetzt und teilweise aufgeschnitten. Eine sterile 5 cm langen Polyethylen-Rohr mit einem Innendurchmesser von 0,6 mm und einem Außendurchmesser von 0,9 mm verwendet wurde. Ein Ende dieser Röhre war heiß versiegelt und das andere Ende wurde leicht abgeschrägt. Das abgeschrägte Ende wurde dann in den Gallengang weitergegeben. Dies war in Ort mit 8-0 Nylon Fäden sowohl proximal und distal der Eröffnung in den Gallengang gesichert. Die restlichen Rohr zusammen mit dem verschlossenen Ende war in der Bauchhöhle platziert. Die operative Seite wurde mit physiologischer Kochsalzlösung gespült. Der Bauch wurde dann in 2 Schichten geschlossen, mit 4-0 Polyglactin Naht. Die Linea alba wurde mit kontinuierlichen Nähten verschlossen und die unterbrochene dermale Nähte wurden platziert. Hautleim wurde dann auf die Haut aufgetragen. Die Ratten durften unter Standard-Laborbedingungen mit täglich Körpergewicht Überwachung wieder auf ausreichende Flüssigkeitszufuhr zu gewährleisten. Für die Cholestase Umkehr Operation wurden die Ratten mit Isofluoran wie zuvor beschrieben. Der Unterleib war in den vergangenen Inzisionsstelle eröffnet. Das Rohr wurde identifiziert und aus der Bauchhöhle entnommen. Netzadhäsionen um das Rohr frei werden mit stumpfen und scharfen Dissektion. Eine Website in den Zwölffingerdarm wurde dann für eine komfortable Positionierung des Duodenostomie Rohr identifiziert. Eine Tabaksbeutelnaht, 2-3 mm im Durchmesser, wurde dann platziert mit 8-0 Nylon. Das Duodenum wurde dann in diesem Tabaksbeutelnaht eröffnet. Die versiegelte Ende des Rohres wurde dann auf entsprechende Länge geschnitten. Freier Fluss der Galle wurde sichergestellt. Das Ende des Rohres wurde dann in den Zwölffingerdarm gelegt und die Tabaksbeutelnaht wurde verschärft. Der Bauch war bewässert und in Schichten verschlossen. In einer früheren Studie, wobei Choledochoduodenostomie wurde unter Verwendung einer anderen Technik wurden die Ratten 12 Wochen lang überlebte und die Ratten wurden während dieser Zeit gesund. Auch diese Studie bestätigt die Umkehrung der biochemischen und histologischen Veränderungen nach Choledochoduodenostomie in Ratten, die zur Obstruktion des Gallengangs für einen Zeitraum von 2 Wochen. 7

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

Cholestase führt zu einer Vielzahl von Veränderungen im Magen-Darm-System. Es wurden Studien durchgeführt suchen die Veränderungen im Immunsystem und Ernährungszustand. 1-3 Cholestase kann die Ergebnisse der Leber-Operationen zu beeinflussen. Es wurden Studien durchgeführt, um die Ergebnisse der Leber-Operationen in der Gegenwart von Cholestase zu verbessern. 4-5 Mit Verbesserungen in Medizin und Forschung, werden weitere Untersuchungen zur Cholestase durchgeführt werden. Daher ist es notwendig, ei...

erstellung von reversible cholestatische rattenmodell

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestase ist ein klinischer Zustand häufig von Chirurgen und Gastroenterologen gestoßen. Cholestase kann verschiedene physiologische Veränderungen und Auswirkungen auf den Ernährungszustand und chirurgische Ergebnisse. Studium der pathophysiologischen Veränderungen in der Leber und andere Organe von Bedeutung ist. Verschiedene Studien haben in cholestatischen Ratten-Modellen getan. Wir verwendeten eine reversible cholestatische Rattenmodell in unserer jüngsten Studie, die die Rolle von Methylprednisolon in der Ischämie Reperfusion. Verschiedene Techniken zur Schaffung eines reversible cholestatische Modell beschrieben worden. Erstellung eines reversible cholestatische Rattenmodell kann in Anbetracht der geringeren Größe und einzigartige hepatopancreatobiliary Anatomie in Ratten eine Herausforderung sein. Dieses Video Artikel veranschaulicht die Schaffung eines reversible cholestatische Modell. Dieses Modell kann in verschiedenen Studien, wie z. B. Blick auf die Veränderungen in Ernährung, physiologischen, pathologischen, histologischen und immunologischen Veränderungen im Gastrointestinaltrakt eingesetzt werden. Dieses Modell kann auch verwendet werden, um die Auswirkungen der Cholestase und verschiedene therapeutische Interventionen am wichtigsten hepatischen Operationen zu sehen.

Cholestase ist ein klinischer Zustand häufig von Chirurgen und Gastroenterologen gestoßen. Erstellung eines reversible cholestatische Rattenmodell kann in Anbetracht der geringeren Größe und einzigartige hepatopancreatobiliary Anatomie in Ratten eine Herausforderung sein. Dieses Video Artikel veranschaulicht die Schaffung eines reversible cholestatische Modell.

Erstellung von Reversible Cholestatische Rattenmodell

Cholestase ist ein klinischer Zustand, der sowohl von Chirurgen als auch von Gastroenterologen häufig anzutreffen ist. Eine Cholestase kann verschiedene physiologische Veränderungen und ...

Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells. Hallo zusammen. Ich bin Goulash, Assistenzarzt für Allgemeinchirurgie am Providence Hospital and Medical Centers in Southfield, Michigan.Heute werde ich die Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells demonstrieren. Die Ratte wird zunächst im Käfig und anschließend mit einer Maske mittels Isofluran narkotisiert. Während des Eingriffs wird ein Polyesterrohr mit einem Außendurchmesser von 0,9 Millimeter und einem Innendurchmesser von 0,6 Millimeter verwendet, wobei ein Ende offen und das andere Ende verschlossen ist. Verwendete Instrumente umfassen einen standardmäßigen Ratten-OP-Set für mikrochirurgische Eingriffe, okulare Speere, Wattestäbchen und Nylonfaden der Stärke 8-0. Der Eingriff wird mithilfe eines Operationsmikroskops durchgeführt.Es kann alternativ mit chirurgischen Schlaufen durchgeführt werden. Hier wird ein stabiler Tuchverband angelegt. Das Verfahren wird unter vollständigen sterilen Vorsichtsmaßnahmen durchgeführt.Operative Schritte: Ein zwei Zentimeter langer medianer Schnitt wird ausgehend vom Zipp-Sternum angelegt. Das subkutane Gewebe und die Faszie werden mit einer Schere eröffnet. Hier w

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Eine Störung des Gallenflusses führt zu einer schweren entzündlichen cholestatischen Leberschädigung mit einer charakteristischen zeitabhängigen Abfolge morphologischer Veränderungen. In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll für die chirurgische Ligatur des Gallengangs communis bei Mäusen vor, das es ermöglicht, nach 21 bis 28 Tagen eine starke fibrotische Reaktion zu induzieren.

Gallengang-Ligation in Mice: Induktion von Entzündungsleber-Verletzung und Fibrose von obstruktiver Cholestase

Induktion schnelle Leber Hypertrophie mit Leber-Partition zuordnen und Pfortader Ligatur für eine Hepatektomie bereitgestellt wurde (ALPPS) für die Resektion von borderline entfernbaren Lebertumoren vorgeschlagen. Dieses Modell kann schnelle Hypertrophie Mechanismen aufzuklären und ermöglicht die Prüfung von Betäubungsmitteln, die fördern oder blockieren die Beschleunigung der Regeneration.

Rattenmodell der Leber Partition zuordnen und Pfortader Ligation inszenierten Hepatektomie (ALPPS) Verfahren

Hier beschreiben wir eine gängige Methode um chronische Schädigung der Leber bei Mäusen zu induzieren, durch die Fütterung einer Cholin-Mangel und Ethionine ergänzt (CDE) Ernährung. Wir zeigen Systemüberwachung, Leber Perfusion, Isolation und Erhaltung. Schädigung der Leber, Pathohistology, Fibrose, entzündliche, und Leber Stammvater-Zell-Reaktionen kann ein zeitlichen Verlauf von sechs Wochen mitteilen.

Der murinen Cholin-Mangel, Ethionine ergänzt (CDE) Diät-Modell einer chronischen Leberschädigung

Hier präsentieren wir Ihnen teilweise Gallengang Ligatur als chirurgische Modell der Leberschädigung und Regeneration bei Nagetieren.

Partielle Gallengang Ligation in der Maus: eine kontrollierte Modell der lokalisierten obstruktive Cholestase

Hier beschreiben wir ein detailliertes Protokoll für invasive Messungen der hämodynamischen Parameter einschließlich Portal Druck, splanchnic Blutfluss und systemischen Hämodynamik um das Portal Hypertensive Syndrom bei Ratten zu charakterisieren.

Invasive hämodynamische Charakterisierung des Portal-hypertensiven Syndroms in zirrhotischen Ratten

Das in der aktuellen Studie entwickelte Modell für akutes Leberversagen stellt eine praktikable Alternative zur Untersuchung potenzieller Therapien dar. Das aktuelle Modell nutzt die kombinierte Wirkung von körperlichen und drogeninduzierten Leberverletzungen und bietet ein geeignetes Zeitfenster, um das Potenzial neuartiger Therapien zu untersuchen.

Generierung eines Rattenmodells für akutes Leberversagen durch Kombination von 70% partieller Hepatektomie und Acetaminophen

Dieses Protokoll beschreibt eine gängige und praktikable Methode zur Induktion akuter Leberverletzungen (ALI) über cCl4 Exposition durch eine orogastrische Röhre. CCl4 Exposition induziert ALI durch die Bildung von reaktiven Sauerstoffspezies während seiner Biotransformation in der Leber. Diese Methode wird verwendet, um die Pathophysiologie von ALI zu analysieren und verschiedene hepatoprotektive Strategien zu untersuchen.

Induzieren akute Leberverletzung bei Ratten über Kohlenstofftetrachlorid (CCl4) Exposition durch eine orogastrische Röhre

Tiermodelle für schwere akute Pankreatitis ermöglichen die Untersuchung pathophysiologischer Veränderungen im Anfangsstadium und erleichtern die Beobachtung der Evolution von Entzündungsereignissen. Hier stellen wir ein Protokoll für die Induktion einer schweren akuten biliären Pankreatitis durch retrograde Infusion von Natriumtaurocholat in den Pankreasgang von anästhesierten C57BL/6-Mäusen zur Verfügung.

Natriumtaurocolat induzierte schwere akute Pankreatitis bei C57BL/6 Mäusen

Chronische Pankreatitis (CP) ist eine Krankheit, die durch Entzündungen und Fibrose der Bauchspeicheldrüse gekennzeichnet ist, die oft mit hartnäckigen Bauchschmerzen verbunden sind. Dieser Artikel konzentriert sich auf die Verfeinerung der Technik, um ein Mausmodell von CP durch Gallengangsinfusion mit 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) zu erzeugen.

Ein Mausmodell für chronische Pankreatitis mittels Gallengangs-TNBS-Infusion

Ein Mausmodell der schweren akuten Pankreatitis wird hierin beschrieben. Das hier vorgestellte Verfahren ist sehr schnell, einfach und zugänglich und ermöglicht so möglicherweise die Untersuchung der molekularen Mechanismen und verschiedener therapeutischer Interventionen bei akuter Pankreatitis auf bequeme Weise.

Etablierung eines Mausmodells für schwere akute Pankreatitis mittels retrograder Injektion von Natriumtaurocholat in den Gallengang

Wir haben ein Mausmodell für chronische Leberfibrose etabliert, das ein geeignetes Tiermodell für die virusinduzierte Leberfibrose-mechanistische Untersuchung der Gallengangsatresie (BA) und eine Plattform für zukünftige BA-Behandlungen darstellt.

Ein Mausmodell der chronischen Leberfibrose zur Untersuchung der Gallengangsatresie

Lernen Sie die Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells für gastroenterologische Forschung. Diese Methode nutzt Mikrochirurgie und Isofluran-Anästhesie zur Untersuchung von Leberfunktionsstörungen.

Erstellung von Reversible Cholestatische Rattenmodell

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