Erstellung von Reversible Cholestatische Rattenmodell
21. Mai 2011
Cholestase ist ein klinischer Zustand häufig von Chirurgen und Gastroenterologen gestoßen. Erstellung eines reversible cholestatische Rattenmodell kann in Anbetracht der geringeren Größe und einzigartige hepatopancreatobiliary Anatomie in Ratten eine Herausforderung sein. Dieses Video Artikel veranschaulicht die Schaffung eines reversible cholestatische Modell.
Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells. Hallo zusammen. Ich bin Goulash, Assistenzarzt für Allgemeinchirurgie am Providence Hospital and Medical Centers in Southfield, Michigan.
Heute werde ich die Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells demonstrieren. Die Ratte wird zunächst im Käfig und anschließend mit einer Maske mittels Isofluran narkotisiert. Während des Eingriffs wird ein Polyesterrohr mit einem Außendurchmesser von 0,9 Millimeter und einem Innendurchmesser von 0,6 Millimeter verwendet, wobei ein Ende offen und das andere Ende verschlossen ist. Verwendete Instrumente umfassen einen standardmäßigen Ratten-OP-Set für mikrochirurgische Eingriffe, okulare Speere, Wattestäbchen und Nylonfaden der Stärke 8-0. Der Eingriff wird mithilfe eines Operationsmikroskops durchgeführt.
Es kann alternativ mit chirurgischen Schlaufen durchgeführt werden. Hier wird ein stabiler Tuchverband angelegt. Das Verfahren wird unter vollständigen sterilen Vorsichtsmaßnahmen durchgeführt.
Operative Schritte: Ein zwei Zentimeter langer medianer Schnitt wird ausgehend vom Zipp-Sternum angelegt. Das subkutane Gewebe und die Faszie werden mit einer Schere eröffnet. Hier wird das Peritoneum eröffnet, wodurch die Leber freigelegt wird.
Die Hämostase wird mithilfe einer manuellen Elektrokauter sichergestellt. Dies ist der Median- und der linke Leberlappen der Ratten-Gallengangsanatomie. Dies ist ein schematisches Diagramm der Gallengangsanatomie der Ratte.
Die Ratte leber ist in die rechte, mediale, linke und caudate Lappen unterteilt. Dies ist die Vena cava und der Magen, und dies ist der Ductus choledochus. Hier sehen Sie, dass ein beträchtlicher Teil des Ductus choledochus nicht mit der Vena portae und der Arteria hepatica assoziiert ist.
Es ist dieser Abschnitt des Gallengangs, der zum Haken und zur Erzeugung einer Cholestase verwendet wird. Die Leberlappen werden mit einem Senn-Retraktor zurückgehalten, und ein Q-Tip dient dazu, die Num herunterzuziehen. Anschließend wird der Gallengang mit einem mikrochirurgischen Instrument nahe der Num gehakt.
Dies ist derselbe Schritt des Einfadens des Gallengangs, der hier an einem anderen Rattenmodell demonstriert wird. Auch hier handelt es sich um denselben Schritt des Einfadens des Gallengangs, der von außerhalb des Operationsmikroskops aufgezeichnet wurde. Zur Erzeugung der Cholestase wird anschließend eine feine Polysubgut-Naht unter den Gallengang geführt und der Gallengang unter Zug gesetzt.
Dies ist der Gallengang unter Zug. Dies ist eine vergrößerte Ansicht. Der Gallengang wird hier geöffnet.
Die Spitze des Polyrohrs wird dann in diesen Gallengang eingeführt. Wir verwenden ein mikrochirurgisches Instrument für die Tubenfütterung, um uns bei diesem Vorgang zu helfen. Es ist darauf zu achten, dass das Rohr vorsichtig eingeschoben wird.
Es wird dann ein Fenster in den proximalen Gallengang eingeschnitten. Anschließend wird eine achtfache Nylonnaht durch dieses Fenster geführt. Die ATO-Naht wird dann mit drei quadratischen Knoten abgebunden, um den Schlauch an seiner Position zu fixieren.
Ein zweites Fenster wird unterhalb des Blac proximal zur ersten Naht angelegt. Eine weitere ATO-Naht wird verwendet, um den Schlauch proximal zu befestigen. Anschließend wird ein Fenster im distalen Teil des Gallengangs angelegt, und die ATO-Naht wird hindurchgeführt.
Dies dient zunächst dazu, den Gallengang abzubinden. Diese Naht wird dann um die Sonde herumgeführt und daran befestigt, wodurch die Sonde sicher verankert wird. Die Naht wird hier durchtrennt. Anschließend wird die Zugnaht herausgezogen.
Hier zoomen wir erneut heraus. Das Rohr wird dann zurück in die Bauchhöhle geschoben und sorgfältig positioniert. Der Bauchraum wird anschließend mit zwei ml physiologischer Kochsalzlösung gespült.
Die Flüssigkeit wird anschließend mit einem 2×2-Kompressenverband abgesaugt. Danach erfolgt ein abschließender Kontrollblick, um die korrekte, komfortable Lage des Schlauchs sowie die Blutstillung zu überprüfen, gefolgt von der Bauchdeckenschließung. Die Fascia wird mit einer fortlaufenden Naht aus Polyactin 5-0 verschlossen.
Die Haut wird anschließend mit Einzelknopfstichen verschlossen. Die Cholestaseumkehr erfolgt durch Eintraining des Polyesterwürfels in das Odum. Die Umkehr der Cholestase wird hier am Rattenmodell unter gleichen Bedingungen demonstriert. Die Haut und die Fascia werden mit einer Schere geöffnet.
Die Leber wird reponiert und am Darm gezogen. Mit den Wattestäbchen identifizieren wir eine Stelle im Darm, an der der Polyester-Schlauch gut liegen wird. Anschließend legen wir Spreiznähte mit Seide acht oder Nylon um die vorab ausgewählte Stelle für die Schlauchplatzierung an.
Wir stellen sicher, dass bei jedem Stich muskuläre Anteile des Peritoneums mitgenäht werden. Der NEP-Polyrohr wird dann aus der Bauchhöhle herausgezogen. In Fällen, in denen der Schlauch länger belassen wurde, kann es zu erheblichen oder manchmal auch zu heftigen Adhäsionen um den Schlauch herum kommen, die vorsichtig gelöst werden müssen.
Das Röhrchen wird dann mit der Schere über einem Tupfer abgeschnitten, um die Gallenflüssigkeit aufzusaugen. In Fällen, in denen das Röhrchen länger belassen wurde, beobachten wir eine beträchtliche Menge austretender Galle. Sobald das Röhrchen geöffnet ist, wird das Durum in der Mitte der Pulsfadennaht mit der Schere geöffnet, wobei sichergestellt wird, dass die gesamte Dicke des Durums durchtrennt wurde.
Das Röhrchen wird dann in das Nu geschoben, und wir stellen sicher, dass es bequem liegt und in der richtigen Richtung ausgerichtet ist. Die postoperative Fadennaht wird anschließend mit drei quadratischen Knoten festgezogen, um das Röhrchen im Dynam zu verankern. Die Wunde wird danach gespült, um die während des Eingriffs ausgetretene Galle zu entfernen, und der ADOS wird dann geschlossen, wobei sichergestellt wird, dass das Röhrchen bequem liegt und eine gute Blutstillung vorliegt, bevor die Wunde verschlossen wird.
Demonstration der biliären Drainage hier, lediglich zu Demonstrationszwecken ziehen wir das Rohr aus dem Jordan, um zu zeigen, dass eine freie Drainage von Galle aus dem Rohr erfolgt. Anwendung dieses Modells, Anwendung dieses Modells. Dieses Modell kann zur Untersuchung der physiologischen, pathologischen und histologischen Veränderungen im biliären System und im Magen-Darm-Trakt im Zusammenhang mit Cholestase verwendet werden. Dieses Modell kann dazu genutzt werden, die Auswirkungen der Cholestase auf die Leberchirurgie zu untersuchen, und es kann außerdem verwendet werden, um die Veränderungen im Ernährungszustand im Zusammenhang mit Cholestase zu untersuchen.
Sehen Sie sich das vollständige Transkript an und erhalten Sie Zugang zu Tausenden wissenschaftlicher Videos
Übersicht
Dieser Videoartikel demonstriert die Erstellung eines reversiblen cholestatischen Rattenmodells, das für die Untersuchung der Cholestase, einer in klinischen Einstellungen häufig auftretenden Erkrankung, unerlässlich ist. Das Verfahren umfasst spezifische Anästhesietechniken und mikrochirurgische Instrumente, die auf die besondere Anatomie von Ratten zugeschnitten sind.
Wesentliche Studienkomponenten
Bereich der Wissenschaft
- Neurowissenschaften
- Gastroenterologie
- Chirurgische Techniken
Hintergrund
- Cholestase ist eine klinische Erkrankung, die die Leberfunktion beeinträchtigt.
- Die Erstellung von Tiermodellen für die Cholestase kann aufgrund anatomischer Unterschiede komplex sein.
- Ratten werden häufig in der Forschung eingesetzt, weisen jedoch besondere Herausforderungen auf.
- Umkehrbare Modelle ermöglichen ein besseres Verständnis und die Behandlung der Cholestase.
Zweck der Studie
- Eine Methode zur Erstellung eines reversiblen cholestatischen Modells bei Ratten demonstrieren.
- Forschern eine visuelle Anleitung für chirurgische Techniken bereitstellen.
- Das Verständnis von Cholestase und ihren Auswirkungen vertiefen.
Verwendete Methoden
- Ratten werden mit Isofluran anästhesiert.
- Für den Eingriff wird ein Polyesterrohr verwendet.
- Es kommen standardmäßige mikrochirurgische Instrumente zum Einsatz.
- Der Eingriff wird unter einem Operationsmikroskop durchgeführt.
Hauptergebnisse
- Die Methode erzeugt erfolgreich ein reversibles cholestatisches Modell.
- Die dargestellten Techniken sind unter Laborbedingungen reproduzierbar.
- Visuelle Dokumentation trägt zum besseren Verständnis des chirurgischen Vorgehens bei.
- Mögliche Anwendungen in der weiteren Cholestase-Forschung werden hervorgehoben.
Schlussfolgerungen
- Das reversibel-cholestatische Rattenmodell ist ein wertvolles Werkzeug für die Forschung.
- Richtige Techniken können bessere Ergebnisse in Studien ermöglichen.
- Dieses Modell kann zu Fortschritten im Verständnis der Cholestase führen.
Häufig gestellte Fragen
Aussagekräftige Relevanz für die Industrie
Umkehrbare cholestatische Rattenmodelle ermöglichen die mechanistische Absicherung von hepatobiliären Interventionen, indem sie ein krankheitsrelevantes System bereitstellen, um physiologische und pathologische Veränderungen im Zusammenhang mit gestörtem Gallenfluss zu untersuchen. Dies unterstützt die Zielvalidierung und die Entwicklung von Assays für therapeutische Strategien, die cholestasebedingte Komplikationen in der chirurgischen und gastroenterologischen Forschung adressieren. Das Modell erhöht die Vorhersagesicherheit bei der präklinischen Bewertung von Interventionen, die die biliäre Funktion und den Ernährungszustand beeinflussen.
Strategische Anwendungen in der Biopharma-Forschung und -Entwicklung
Frühe Entdeckung und Zielvalidierung
- Wissenschaftlicher Wert: Ermöglicht die Überprüfung therapeutischer Hypothesen im Zusammenhang mit Gallengangsobstruktion und der Pathophysiologie der Cholestase.
- Operativer Wert: Bietet ein reversibles System zur funktionellen Zielvalidierung in hepatopankreatobiliären Wegen.
Screening und Assay-Entwicklung
- Wissenschaftlicher Wert: Unterstützt die Vorbereitung validierter biologischer Systeme zur Beurteilung der biliären Drainage und hepatischer Reaktionen.
- Operativer Wert: Ermöglicht die Standardisierung von Assays durch reproduzierbare chirurgische Erzeugung und Umkehrung von Cholestase.
Translationale und präklinische Forschung
- Wissenschaftlicher Wert: Bietet eine krankheitsrelevante Ausrichtung zur Untersuchung ernährungsbedingter, physiologischer und histologischer Veränderungen im Gastrointestinaltrakt während einer Cholestase.
- Operativer Wert: Ermöglicht die Kontinuität von der Entdeckung bis zur präklinischen Validierung von Interventionen hinsichtlich der Ergebnisse hepatochirurgischer Eingriffe.
Pipeline- und Workflow-Integration
Das Modell lässt sich in Entdeckungsbiologie-Arbeitsabläufe integrieren, indem es die Hypothesenprüfung von Cholestase-Mechanismen unterstützt und eine quantitative Beurteilung biliärer und gastrointestinaler Veränderungen ermöglicht.
- Entdeckungsbiologie: Unterstützt die Aufklärung von Signalwegen und die biologische Entrisikobewertung von Zielstrukturen, die an der Regulierung des Gallenflusses beteiligt sind.
- Screening: Ermöglicht die Testbereitschaft durch standardisierte Erzeugung und Aufhebung eines cholestatischen Zustands zur Evaluierung von Wirkstoffen.
- Analytik: Bietet quantitative Messungen abhängiger Variablen wie Gallenabfluss, Ernährungsstatus und histologische Bewertung.
- Translationale Forschung: Schafft Anschluss an die präklinische Kontinuität, indem die Auswirkungen der Cholestase auf umfangreiche hepatische Eingriffe modelliert werden.
- Unternehmensweite Wiederverwendung: Stellt eine wiederverwendbare Kapazität für die iterative Prüfung therapeutischer Interventionen über verschiedene Studien hinweg dar.
Operative und unternehmerische Auswirkungen
- Wissenschaftlicher Wert: Vorhersagbare Zuversicht bei der Target-Validierung durch mechanistische Einblicke in cholestaseinduzierte physiologische Veränderungen.
- Operativer Wert: Standardisierung und Reproduzierbarkeit mittels reversiblen chirurgischen Modells mit definiertem Umkehrprotokoll.
- Strategischer Wert: Verbesserte Go/No-Go-Entscheidungen durch Verringerung biologischer Risiken im fortgeschrittenen Stadium bei hepatobiliären Programmen.
- Portfolio-Wirkung: Risikoadjustierte Priorisierung basierend auf krankheitsrelevanten Systemantworten auf therapeutische Kandidaten.
Durchführungsaspekte
- Erfordert mikrochirurgische Expertise und Operationsmikroskop für eine präzise Manipulation der Gallengänge.
- Beruht auf spezialisierten Instrumenten wie Polyester-Röhrchen, Nylon-Nähten und mikrochirurgischen Werkzeugen.
- Erfordert eine standardisierte Vorgehensweise zwischen den Teams hinsichtlich chirurgischer Technik und postoperativer Versorgungsprotokolle.
- Beinhaltet Anpassungsüberlegungen aufgrund der einzigartigen hepatopankreatobiliairen Anatomie der Ratte.
- Zu den praktischen Einschränkungen gehören die technische Komplexität der Gallengang-Katheterisierung und des Umkehrverfahrens.
