Name: Ein optimiertes Protokoll für die Aufzucht Fopius arisanus, Fliegt ein Parasitoid von Tephritid Fruit (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min
Description: Erfahren Sie ein optimiertes Aufzuchtprotokoll für den Parasitoiden Fopius arisanus zur biologischen Schädlingsbekämpfung. Diese Methode ermöglicht die effiziente Zucht weiblicher Wespen zur Bekämpfung von Tephritiden-Fruchtfliegen in Laborbedingungen.

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Wir bedanken uns bei Keith Shigeteni um Unterstützung bei der Insektarium und Natasha Sostrom für die Hilfe bei Computer-Grafik. Diese Arbeit wurde vom USDA-ARS finanziert. Meinungen, Ergebnisse, Schlussfolgerungen oder Empfehlungen in dieser Veröffentlichung geäußerten Ansichten sind die des Autors und spiegeln nicht unbedingt die Meinung des USDA. USDA ist ein Chancengleichheit Anbieter und Arbeitgeber.

1. Bereiten Host Fruchtfliege Eier für Parasitierung <ol><li> Bereiten Sie ein Substrat für die Fruchtfliege Eier durch die Vorbereitung Agar (alternativ Gelcarin GP812, FMC Biopolymer, Ewing NJ; eine kostengünstigere Option) parasitiert ausgefüllt werden Gerichte, 10 cm in der Länge pro Seite und 1,5 cm Tiefe. Bereiten Agar in einer Konzentration von 9 g pro Liter Wasser. </li><li> Füllen Sie Speisen bis zum Rand mit flüssigem Agar (ca. 70ml), und es ihnen ermöglichen, abkühlen und sich verfestigen (mindestens 45 Minuten). </li><li> Sobald der Agar-Blöcke fest sind, tragen eine einzelne Schicht von Tissue-Papier (eine einzelne Lage aus Georgia Pacific "Präferenz" Batch-Gewebe), die Oberseite eines jeden Blocks. Das Gewebe sollte leicht kleben, um den Agar, weil der Oberfläche Feuchtigkeit. </li><li> Tragen Sie eine 0,5 ml Volumen Fruchtfliege Eier in Wasser, um das Gewebe bedeckte Oberfläche des Agar-Blöcke unterbrochen. In unserem Insektarium, entspricht dies etwa 6000 Eier von Bactrocera dorsalis (12000 Eier pro ml). </li><li> Verwenden Sie ein sauberes 2,5 cm breiten Pinsel in Wasser getaucht, um die Fruchtfliege Eier gleichmäßig über die Gewebeoberfläche. </li><li> Legen Sie die Fruchtfliege Eier unter dem unteren Bildschirm des Parasitoiden Käfige Eiablage zu ermöglichen. Tippen Sie auf der Unterseite des unteren Bildschirm, um tote Parasiten, die die Eier behindern können, zu entfernen. Es ist am besten, wenn der untere Bildschirm nicht berührt die Eier. </li><li> Lassen Sie die Parasiten über Nacht und in den nächsten Tag oviposit, etwa 21 Stunden. Dies ist ausreichend Zeit für einen hohen Prozentsatz der Eier parasitiert werden. Längere Belichtungszeiten Risiken superparasitization. </li></ol> 2. Schraffuren und Verpuppung der von Parasiten befallenen Host Fruchtfliegen <ol><li> Bereiten Sie die Aufzucht Behälter, indem Sie 3 bis 3,5 zubereitet Agarblöcken der parasitierten Eier pro 1,25 Liter Fruchtfliege Diät 19 mit Eiern nach oben. </li><li> Legen Sie die Diät-Container mit Eiern auf einer Riser über eine 1,5 cm dicke Schicht aus feinem grade Vermiculit oder gewaschenem Sand in einen größeren Behälter Verpuppung. Decken Sie die Verpuppung Behälter mit Deckel und Klebeband die Kanten der mit Klebeband. Vermiculite können nach Sichtung (siehe unten) verwendet werden. </li><li> Stellen Sie sicher, dass genügend Raum zwischen der Spitze der Diät-Container und die Verpuppung Behälterdeckel für Taufliegen-Larven kriechen heraus und 'pop' 20 in den vemiculite unten. </li><li> Bewegen Verpuppung Container zu einem Raum bei 27 ° C und 80% relative Luftfeuchtigkeit (RH) für eine Woche. Deckel Behälter mit einem dunklen Tuch für die ersten vier Tage, dann entfernen Sie das Tuch für die verbleibenden Tage. </li><li> Entfernen Larven Ernährung nach einer Woche haben einmal Larven knallte und betrat das Vermiculit für Verpuppung. Wenn es Larven im Vermiculit sind, damit sie sich zu verpuppen Nacht. </li><li> Sieve die Puppen aus der Vermiculit. Beginnen Sie mit einem groben Sieb (ca. 3 mm) verwenden Sie dann eine Hand Sieb, um alle verbleibenden Klumpen von Vermiculit entfernen. </li></ol> 3. Trennung und Sortierung <ol><li> Pupa mit F. arisanus kann teilweise aus unparasitized Fruchtfliegen werden nach ihrer Größe getrennt. Sammeln Puppe zwischen 1,65 und 2,26 mm im Durchmesser, da diese für parasitierten fliegt angereichert werden. 12 Puparia, die kleiner enthalten meist unterdimensioniert Parasitoide, größere Puppe enthalten meist Fliegen sind. Beachten Sie auch, dass für die parasitierten Puppen der Anteil der Frauen positiv korreliert mit der Größe 12. </li><li> Eine Vielzahl von Methoden eingesetzt werden, um Puppen nach Größe zu sortieren. Wir beschreiben eine mechanische Methode mit einem benutzerdefinierten Format Sortierer 21. </li><li> Legen Sie Puppen in den Trichter an der Spitze eines Vibrationsförderer, die sich langsam nährt die Größe Sorter. </li><li> Feed the Puppen in der Größe Sorter, die aus einem Paar leicht divergent Walzbarren zu einem Winkel von 30 ° besteht. Die Puppen Drop individuell nach Größe in ein Array von Slots, die in zehn getrennten Behältern durch einen Trichter leer. </li><li> Sammeln Puppen aus dem Becher in der Größenordnung von 1,65 bis 2,26 mm und legen Sie sie in einem Käfig Entstehung für 7 Tage, bis die meisten Fliegen aus dem unparasitized Puppen entstanden. </li><li> Als Nächstes verwenden Sie ein Fan auf leere puparia von denen, die noch mit Insekten zu trennen. </li></ol> 4. F. arisanus Entstehung und Aufrechterhaltung <ol><li> Um die Kolonie von F. halten arisanus einen Parasitoid Haltekäfigs mit einem abnehmbaren Glasfront, ca. 25 cm in der Länge pro Seite. Der Käfig hat 1mm 2 Screening auf der Oberseite und zwei Seiten. Die Rückseite des Käfigs befindet sich in einer Gummi-Blatt mit einer 9 cm Loch für den Zugang abgedeckt. Der Boden des Käfigs ist ein Schnitt auf der Innenseite mit 1-2mm 2 Bildschirm groß genug, um die Platzierung von zwei Agar-Blöcke mit Fruchtfliege Eier für Parasitoid Eiablage ermöglichen abgedeckt. </li><li> Die Käfige sollten auch eine getönte Teil entlang der unteren Viertel der Glasfront zum Licht, das Parasitoid Gedränge an der Vorderseite des Käfigs können, was zu erhöhten Mortalität zu minimieren. </li><li> Es werden ca. 11 g dieser AuswahlTed Puppen in Kunststoff-Behälter ca. 9 cm im Durchmesser. Dabei sollte sich ca. 600-700 Parasiten pro Käfig. Größe Auswahl sollte in etwa 60% Frauen führen. </li><li> Bringen Sie geschirmte Deckel der Behälter. Die Deckel sind mit 2 mm 2-Screening, die es erlauben erwachsenen F. abgedeckt werden arsianus die Behälter beim Austritt verlassen, sondern enthält alle verbleibenden Fruchtfliegen. </li><li> Pflegen Sie die Parasiten bei 24 ° C und ca. 45% RH mit einem 12:12 Photoperiode und gute Belüftung. Wenn hohe Mortalität beobachtet wird, kann die Umstellung der Käfige im Freien für ein paar Stunden am Tag oder Erhöhung Lüftung reduzieren. Parasiten sollten bereit sein, oviposit in einer weiteren Woche und sollten produktiv sein für zwei weitere Wochen. </li><li> Streak unverdünnt gesponnen Honig am oberen Rand der Käfige mindestens dreimal pro Woche oder wenn die zur Verfügung Honig trocken ist. Übernehmen Sie die gesponnen Honig in schmalen Streifen mit einer Fingerspitze. Beachten Sie, dass, wenn die Streifen zu schwer sind der Honig wird in den Käfig tropft, wenn zu hell der Honig wird schnell austrocknen und erfordern häufige reapplication. </li><li> Legen Sie Agarblöcken (10 cm x 10 cm x 4 cm) auf den Gipfeln der Käfige, um Feuchtigkeit, um die Parasiten geben. Diese sollten zwei Mal pro Woche gewechselt werden. </li></ol> 5. Repräsentative Ergebnisse: Wir berichten hier ergibt sich aus Verfahren zur Qualitätskontrolle auf der USDA-ARS F. durchgeführt arisanus Aufzucht-Betrieb in Hilo, Hawaii zwischen dem 5. Januar und 22. Juni 2010. Aufzucht an der Hilo Lage auf der Skala in diesem Video Artikel und Protokoll beschrieben wurde im August 2009 eingeleitet, und anfänglichen Problemen und Anpassungen mit dem neuen Standort war vor allem im Januar aufgelöst. Daher sind diese Daten repräsentativ für die Ergebnisse anderer Forscher erhalten ab ihrer Kolonie, wenn sie das Protokoll folgen wie beschrieben könnte und haben Erfahrung Aufzucht Insekten im Allgemeinen. Während dieser Zeit waren wir erhalten eine kleine Kolonie von F. arisanus: 4 Parasitoid Käfige pro Woche produziert, das entspricht etwa 3600 F. arisanus. Eine erste Überprüfung von angereichertem Parasitierung Preise wurde durch Aufnahme eines 2-g-Probe von Puppen im Größenbereich von 1,65 durchgeführt - 2,26 mm (angereichert), bevor eine weitere Woche der Entwicklung in eine Holding-Käfig (dh unmittelbar nach dem Larvenstadium Ernährung entfernt wurde und die Puppen gesichtet und Größe sortiert. Wir bezeichnen diese als "frühe Puppen"). In den ersten drei Monaten des Jahres 2010 der mittlere Anteil Parasiten in der angereicherten Probe wurde 0,46 (SD = 0,18). In den folgenden Quartal bedeutet dies betrug 0,58 (SD = 0,08), was auf eine Stabilisierung der Kolonie und Aufzucht Verfahren am neuen Standort. Beachten Sie, dass das angereicherte Puppen, die nicht erfolgreich parasitiert jene, die nicht produziert hat Emergenzen und diejenigen, die Fliegen produziert sind. Nach einer weiteren Woche in der Haltekäfigs Entfernen leerer puparia weitere zwei Gramm-Probe entnommen wurde ("late Puppen"). Fruchtfliegen unter 1% dieser zweiten Stichprobe vertreten. Der geringe Prozentsatz von Fruchtfliegen ist teilweise auf die frühere Entstehung von Fliegen im Vergleich mit Parasiten, so dass die meisten Fliegen in den Aufnahmebehälter blieb. Schließlich gibt Abbildung 1 die Ausbeute in Puppenstadium Masse von Januar bis Juni 2010. Die Ausbeuten sind aus Puppen bereichert in der Größenordnung von Interesse, 1,65-2,26 mm gemessen. Die große Masse der "frühen Puppen" zu Beginn des Jahres zeigt einen hohen Anteil an Fruchtfliegen und unemerged Puppen damals, während Anpassungen an den neuen Standort gemacht werden. <img src="/files/ftp_upload/2901/2901fig1.jpg" alt="Abbildung 1" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Abbildung 1"> Abbildung 1. Angereichertes (Puppenstadium Durchmesser 1,65-2,26 mm) frühen Ernte (unmittelbar nach Größe Auswahl) und "Ende" (nach dem Halten für eine Woche und Entfernen von leeren Hülsen) Puppen an der ARS-USDA F. ariasnus Kolonie in Hilo, Hawaii , Januar - Juni 2010

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Wir haben keine Interessenkonflikte zu melden.

In diesem Protokoll und begleitendes Video Artikel wir beschrieben haben, und ein optimiertes Protokoll demonstriert für die Aufzucht von F. ariasnus, ein Parasitoiden von Tephritid Fruchtfliegen im Labor. Dieses Protokoll wurde im Laufe der Jahre verfeinert, um die Menge von Arbeit und Spezialausrüstung benötigt, um eine Kolonie zu halten minimieren. Wir stellen fest, dass eine gut etablierte, produktive und stabile Kolonie von Host Fruchtfliegen für jeden Versuch der Aufzucht Parasitoide erforderlich ist. In unserem Insektarium wir Bactrocera dorsalis als Host Taufliege, aber auch andere Arten haben gezeigt, dass kompetente Gastgeber sowie 14-17 werden. Mehrere Aspekte der F. arisanus Kolonie Wartung bleiben, erkundet zu werden. Dazu gehören die Rate der Labor-Anpassung in dieser Art 10, Mechanismen des Lernens 22 und die genetischen Veränderungen, die mit der Anpassung und Mechanismen, die in Host Fruchtfliege Plastizität beteiligt sein können auftreten könnten. B. dorsalis in Französisch-Polynesien, B.: In den letzten zehn Jahren gab es mehrere Beispiele für die Ausbreitung von Dacine fliegt in der ganzen Welt, vor allem in der Gattung Bactrocera worden carambolae in Teilen Südamerikas, B. invadens in Afrika und B. zonata in Afrika und nördlichen Mittelmeerraum. 3,23,18 Prüfung der Wirksamkeit von biologischen Agenzien wie F. arisanus gegen andere Bactrocera Arten sollten eine hohe Priorität, und es ist unsere Hoffnung, dass die Anwendung der Methoden in diesem Protokoll und begleitenden Video-Artikel beschrieben, wird die Forschung auf F. beschleunigen arisanus in einer größeren Vielfalt von Stellen 24. Schließlich kann die weitere Forschung mit dieser Methode als Ausgangspunkt auch wichtige Informationen, um die Kolonisierung des Romans Eiparasitoiden 25,1

ein optimiertes protokoll für die aufzucht fopius arisanus, fliegt ein parasitoid von tephritid fruit

An Optimized Protocol for Rearing Fopius arisanus, a Parasitoid of Tephritid Fruit Flies

Fopius arisanus (Sonan) ist ein wichtiger Parasitoiden von Tephritid Fruchtfliegen für mindestens zwei Gründen. Erstens ist es der eine von nur drei opiine Parasitoide bekannt, die Gastgeber während der Ei-Stufe 1 zu infizieren. Zweitens hat es eine breite Palette von möglichen Fruchtfliege Gastgeber. Vielleicht aufgrund seiner Lebensgeschichte, F. arisanus wurde eine erfolgreich zur biologischen Bekämpfung von Fruchtfliegen in mehreren tropischen Regionen 2-4 verwendet. Ein Hindernis für die breite Nutzung von F. arisanus für Fruchtfliege Kontrolle ist, dass es schwierig, eine stabile Labor Kolonie 5-9 etablieren. Trotz dieser Schwierigkeit, in den 1990er Jahren USDA-Forscher entwickelten eine zuverlässige Methode, um Labor-Populationen von F. halten arisanus 10-12. Es gibt großes Interesse an F. arisanus Biologie 13,14, insbesondere im Hinblick auf seine Fähigkeit, eine Vielzahl von Tephritid Gastgeber 14-17 besiedeln; Interesse ist vor allem durch die alarmierende Ausbreitung der Bactrocera Fruchtfliege Schädlinge zu neuen Kontinenten in den letzten zehn Jahren 18 angetrieben. Weitere Forschung auf F. arisanus und weitere Einsätze dieser Art als biologisches Bekämpfungsmittel wird von Optimierungen und Verbesserungen von Zuchtmethoden profitieren. In diesem Protokoll und die damit verbundenen Video-Artikel beschreiben wir ein optimiertes Verfahren zur Aufzucht von F. arisanus auf einem zuvor beschriebenen Ansatz 12. Die Methode, die wir hier beschreiben, ermöglicht die Aufzucht von F. arisanus in einem kleinen Maßstab, ohne die Verwendung von Obst, die Verwendung von Materialien in den tropischen Regionen der ganzen Welt und mit relativ geringen Handarbeit Anforderungen.

Fopius arisanus ist ein Ei-Larven-Parasitoiden von Tephritid Fruchtfliegen, die erfolgreich in der biologischen Bekämpfung dieser wichtigen tropischen Schädlinge eingesetzt wird. Wir beschreiben hier ein optimiertes Protokoll für die Aufzucht von F. arisanus im kleinen Maßstab mit leicht verfügbaren Materialien.

Ein optimiertes Protokoll für die Aufzucht Fopius arisanus, Fliegt ein Parasitoid von Tephritid Fruit

*Fopius arisanus* (Sonan) ist aus mindestens zwei Gründen ein bedeutender Parasitoid von Tephritiden-Fruchtfliegen. Erstens ist es eine von nur drei opiinen ...

FOIA Aus ist ein wichtiger biologischer Kontrollagent in Hawaii, da es Fruchfliegen befällt, die ernsthafte wirtschaftliche Schädlinge in den Tropen und besonders hier in Hawaii darstellen. Die Besonderheit von FOIA Aus liegt darin, dass es die Ei-Phase des Schadinsekts befällt und so das Insekt in einem frühen Stadium bekämpft. In den folgenden Clips können Sie Nahansichten davon sehen, wie wir FOIA Aus unter Laborbedingungen züchten.Am Ende dieses Programms sehen Sie einige Diskussionen darüber, wie dieser bestimmte Parasitoid in einem erfolgreichen Freisetzungsprogramm in Französisch-Polynesien eingesetzt wurde. Wir beginnen unseren Protokollabschnitt mit adulten Parasiten, die bereit sind, in Eier einer Wirtsfruchtfliege einzunisten. Der erste Schritt besteht darin, die Eier der Fruchtfliege für die Präsentation gegenüber dem Parasiten vorzubereiten.Anschließend werden Fruchtfliegenlarven zum Schlüpfen, Wachsen und Verpuppen gebracht. Sobald die Fruchtfliegen das Puppenstadium erreichen, werden sie nach Größe sortiert, um Parasiten anzureichern. Schließlich schlüpfen die Parasiten und werden bis zur Reifung weitergepflegt.Dann paaren sie sich und sind erneut bereit, in eine neue Fruchtcharge zu legen. Fliegen-Eier. Damit ist der Zyklus abgeschlossen.Bereiten Sie ein Substrat für die Frucht vor, indem Sie Kolben mit einer Kantenlänge von etwa 10 Zentimetern herstellen. Der Kolben wird in einer Konzentration von neun Gramm Kolbenpulver pro Liter Wasser hergestellt.Unter Verwendung einer ebenen Oberfläche die Schalen bis zum Rand mit flüssigem Agar füllen und mindestens 45 Minuten lang erstarren lassen. Sobald die Agarblöcke fest sind, eine einzelne Lage Papiertuch über die Oberseite jedes Agarblocks legen. Das Papier sollte aufgrund der Oberfeuchtigkeit leicht am Agar haften.Ein zweiter Rollvorgang. Tragen Sie die Fruchtfliegen-Eier auf die mit Gewebe bedeckte Oberfläche der Schneckenblöcke auf. Ein Volumen von 0,5 Milliliter Fruchtfliegen-Eier in Suspension ergibt etwa 6.000 Eier pro Block.Eine 2,5 cm breite, in Wasser getränkte Pinselbürste wird verwendet, um die Fruchtfliegeneier gleichmäßig auf der Gewebeoberfläche zu verteilen. Die Fruchtfliegeneier werden nun unter dem unteren Sieb der Parasitenkäfige platziert, damit die Parasiten darauf ablegen können; durch Antippen der Unterseite des Siebs werden tote Parasiten entfernt, die die Frucht behindern könnten. Die Fruchtfliegeneier ermöglichen es den Parasiten, über Nacht darauf zu oviposieren.Ungefähr 21 Stunden sind ausreichend, damit ein hoher Prozentsatz der Taufliegen-Eier parasitiert wird. Eine längere Exposition birgt das Risiko einer Superparasitierung. Die wichtigsten Bestandteile, die zur Aufzucht der Eier nach der Exposition gegenüber Parasiten benötigt werden, sind Taufliegen-Larvennahrung, Behälter für die Larvennahrung und Pupationsbehälter.Platzieren Sie drei bis dreieinhalb vorbereitete Bohrblock-Präparate mit parasitierten Eiern auf eineinviertel Liter Fruchtfliegen-Larvalnahrung. Stellen Sie den Nahrungsbehälter mit den Eiern auf einen Erhöher und einen Pupationsbehälter über eine eineinhalb Zentimeter dicke Schicht aus feinem Vermiculit oder gewaschenem Sand.Verkleben Sie die Kanten des Pupationsbehälters mit Malerklebeband. Stellen Sie sicher, dass zwischen der Oberseite des Nährbodenbehälters und dem Deckel des Pupationsbehälters ausreichend Platz vorhanden ist, damit die Larven herauskriechen und in die darunterliegende Vermiculitschicht fallen können. Stellen Sie die Pupationsbehälter für eine Woche in einen Raum mit 27 Grad Celsius und 80 % relativer Luftfeuchtigkeit.Bedecken Sie die Behälter nach einer Woche vier Tage lang mit einem schweren Tuch. Öffnen Sie die Verpuppungsbehälter und entfernen Sie die Larvalnahrung. Wir verwenden Bre Dorsals als Wirtsfruchtfliege, um foia Airis aufzuziehen.Andere Arten der Gattungen Asfa und Sitis sind ebenfalls potenzielle Wirte. Wenn sich ungehäutete Larven im Vermiculit befinden, lassen Sie diese über Nacht verpuppen. Die Puppen werden aus dem Vermiculit mithilfe eines groben Siebs und eines großen Behälters gewonnen.Als Nächstes verwenden Sie ein Handsieb, um verbleibende Klumpen aus Vermiculit Eria, die Opia enthalten, zu entfernen. Ais können teilweise von nicht parasitierten Fruchtfliegen getrennt werden. Basierend auf früheren Untersuchungen sammeln wir daher nur die Aria mit einem Durchmesser zwischen 1,65 und 2,26 Millimetern, die kleiner sind und hauptsächlich unterentwickelte Parasitoide enthalten.Größere Aria enthalten hauptsächlich Fliegen. Es können verschiedene Methoden zur Größensortierung der Puppen eingesetzt werden. Wir werden eine mechanische Methode beschreiben, die einen speziell angefertigten Sortierer für die gesammelten parasitierten Aria verwendet.Der Anteil weiblicher Tiere steigt mit der Größe. Platzieren Sie den Puy in den Trichter an der Oberseite des mechanischen Größenseparators. Ein Vibrationstrichter befördert sie nach oben zu einem Paar leicht auseinanderlaufender Rollstangen in einem Winkel von 30 Grad. Die Tiere fallen einzeln in eine Anordnung von Schlitzen, die über Trichter in 10 getrennte Behälter münden.Stellen Sie Puppen im Größenbereich von 1,65 Millimetern bis 2,26 Millimetern sieben weitere Tage lang in einen Schlupfkäfig, bis die meisten Fliegen aus den parasitierten Puppen geschlüpft sind. Verwenden Sie anschließend einen Ventilator, um leere Fliegenpuppen von solchen zu trennen, die noch lebende Parasitoide enthalten. Um die Kolonie von Opia Aus aufrechtzuerhalten, verwenden Sie einen Parasiten-Aufbewahrungskäfig mit auswechselbarer Glasscheibe vorne, mit einer Kantenlänge von etwa 25 Zentimetern.Der Käfig verfügt über eine ein Quadratmillimeter große Masche an der Oberseite und an zwei Seiten. Die Rückseite des Käfigs ist mit einer Gummifolie abgedeckt, die eine neun Zentimeter durchmessende Öffnung für den Zugang aufweist. Der Boden des Käfigs hat eine Aussparung, die innen mit einem ein bis zwei Quadratmillimeter großen Maschendraht abgedeckt ist.Groß genug, um die Platzierung von zwei Bohrblock-Einheiten mit Früchten und Fliegen-Eiern für den Parasitoiden an der entsprechenden Position zu ermöglichen. Die Aufzuchtkäfige sollten außerdem im unteren Viertel der Glasfront einen getönten Bereich aufweisen, um eine Ansammlung der Parasitoide an der Vorderseite des Käfigs zu minimieren. Geben Sie etwa 11 Gramm der ausgewählten Aria in Plastikbehälter, die etwa neun Zentimeter im Durchmesser messen.Dies sollte etwa 600 bis 700 Parasiten pro Käfig ergeben. Die Größenselektion sollte etwa 60 % Weibchen ergeben. Befestigen Sie Siebe mit Abdeckungen an den Behältern. Die Abdeckungen sollten mit einem zwei Quadratmillimeter großen Sieb bedeckt sein, das es den Imagines ermöglicht, die Behälter beim Schlüpfen zu verlassen, aber alle verbleibenden Fruchtfliegen zurückhält.Halten Sie die Parasiten bei 24 Grad Celsius und einer relativen Luftfeuchtigkeit von etwa 45 % bei einem 12:12-Licht-Dunkel-Rhythmus und guter Belüftung. Tragen Sie mindestens dreimal pro Woche gesponnenen Honig in dünnen Streifen entlang der Oberseite der Käfige auf oder immer dann, wenn der verfügbare Honig trocken ist. Tragen Sie den gesponnenen Honig mit der Fingerspitze in schmalen Streifen auf. Beachten Sie, dass der Honig in den Käfig tropfen wird, wenn die Streifen zu dick sind, und dass der Honig schnell austrocknet und häufig erneuert werden muss, wenn die Streifen zu dünn sind. Stellen Sie Schneckenblöcke, die 10 Zentimeter breit und vier Zentimeter tief sind, auf die Oberseite der Käfige, um den Parasiten Feuchtigkeit bereitzustellen.Diese Blöcke sollten zweimal pro Woche gewechselt werden. Im Jahr 2001 erhielten wir eine kleine Startfinanzierung, um zu prüfen, ob wir biologische Kontrollmaßnahmen in Französisch-Polynesien einführen könnten, um die Situation zu verbessern, da die Orientalische Fruchtfliege zu jener Zeit gerade eine unglaubliche Befallung aller tropischen Früchte verursachte. Das Labor hier in Hawaii hat zehn Sendungen verschickt.Jede dieser Sendungen umfasste gewöhnlich etwa hunderttausend Exemplare von Opia air Sayings, tatsächlich waren es sogar deutlich mehr, aber wir verschickten die PPE der Orientalischen Fruchtfliege mit dem Parasitoiden im Inneren, und anschließend ließen wir sie schlüpfen. Daher richteten wir ein kleines Labor auf Tahiti ein, um die Sendungen entgegenzunehmen und dann die FOIA Air Sanus schlüpfen zu lassen. Über einen Zeitraum von etwa einem Jahr setzten wir nahezu eine Million FOIA Aans frei.Insgesamt ist dies außerhalb von Hawaii der erfolgreichste Fall. Als FOIA Aus ursprünglich in Hawaii eingeführt wurde, stellte es das beste Beispiel für die biologische Bekämpfung von Fruchtfliegen im gesamten pazifischen Raum dar. In den letzten 10 Jahren hat sich der Bactrocera Dorsals-Komplex weltweit enorm ausgebreitet.So hat sich Bactrocera Carbo in Südamerika, in Surinam, ausgebreitet und ist nun im Norden Brasiliens anzutreffen. Dann gibt es eine weitere Art namens Bacter Inance, die sich über ganz Afrika verbreitet hat und alle möglichen Schäden verursacht. Außerdem hat sich auch Bacter Papaya ausgebreitet.Dieser Erfolg eröffnet nun die Möglichkeit, diese FOIA Aus in Südamerika, Afrika und in anderen Teilen Asiens freizugeben.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Verfahren zur Aufzucht von Drosophila melanogaster unter axenic und gnotobiotischer Bedingungen vorgestellt. Fly Embryonen werden in Natriumhypochlorit, aseptisch in sterile Ernährung dechorionated und aufgezogen in geschlossenen Behältern. Impfen Ernährung und Embryonen mit Bakterien führt zu gnotobiotischer Verbänden und bakterielle Präsenz wird durch Plattierung Ganzkörper- Drosophila Homogenate bestätigt.

Aufzucht der Fruit Fly<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Unter Axenic und gnotobiotische Bedingungen

Hier stellen wir ein Protokoll vor, das auf dem Mehlwurm (Tenebrio molitor) -Ködersystem basiert, das zur Isolierung und Auswahl entomopathogener Pilze (EPF) aus Bodenproben verwendet wurde. Eine effektive Konidienzahlformel (ECN) wird verwendet, um einen hoch stresstoleranten EPF basierend auf physiologischen Eigenschaften für die mikrobielle Schädlingsbekämpfung im Feld auszuwählen.

Isolierung und Selektion entomopathogener Pilze aus Bodenproben und Bewertung der Pilzvirulenz gegen Schadinsekten

Ganaspis brasiliensis - ein Larvenparasitoid von Drosophila suzukii (ein globaler invasiver Obstkulturpest) - wurde zur biologischen Bekämpfung dieses Schädlings in Europa und den Vereinigten Staaten zugelassen oder wird für die Einführung in Europa und die Vereinigten Staaten in Betracht gezogen. Dieser Artikel enthält Protokolle für die Aufzucht dieses parasitoiden Parasitoids in kleinem und großem Maßstab.

Methoden zur Aufzucht des parasitoiden Ganaspis brasiliensis, einem vielversprechenden biologischen Bekämpfungsmittel für die invasive Drosophila suzukii

Die verstärkte Erkennung von unreifen Tephritiden-Fruchtfliegen im Feld kann rechtzeitig Anstrengungen zur Beseitigung von Populationen dieser zerstörerischen Schädlinge auslösen. Die Erkennung von Larven im späten Stadium ist schneller und genauer, wenn die Wirtsfrüchte in einem Beutel zerdrückt und das Fruchtfleisch durch eine Reihe von Sieben geführt werden, als beim manuellen Schneiden und bei der visuellen Inspektion.

Siebung von Fruchtfleisch zum Nachweis unreifer Tephritiden-Fruchtfliegen auf dem Feld

Hier stellen wir ein Protokoll zur Gewinnung entomopathogener Pilze aus einem Waldholzzünsler vor und eine substituierende Methode zur Bewertung ihrer entomopathogenen Aktivitäten anhand eines Coleoptera-Modellinsekts. Diese Methode ist effizient und praktisch, um entomopathogene Pilzressourcen von holzbohrenden Schadinsekten in natürlichen Wäldern zu erforschen.

Isolierung, Verhaltensidentifikation und Pathogenitätsbewertung von entomopathogenen Pilzen aus einem Waldholzbohrer

In dieser Arbeit wird die Laborerhaltung (einschließlich Paarung und Fütterung) der unteren zweiflüglerischen Fliege Bradysia (Sciara) coprophila beschrieben.

Laborerhaltung der Unterdipteranen Fliege Bradysia (Sciara) coprophila: Ein neuer/alter aufstrebender Modellorganismus

Ziel dieses Protokolls ist es, die funktionelle Analyse der Parasitoid-Wirt-Interaktionen bei Asobara japonica und Drosophila melanogaster zu erleichtern. Durch optimierte Aufzuchtmethoden, einen Infektionstest mit einer einzelnen Eiablage und RNAi-vermittelte Gen-Knockdown.

Protokolle für effiziente Aufzucht und funktionelle Analyse der endoparasitoiden Wespe Asobara japonica und ihres Wirts Drosophila melanogaster

Studieren Aggression in Drosophila (Taufliege)

Dieses Video zeigt den allgemeinen Techniken verwendet, um hinten Anopheles gambiae im Labor. Die Methoden für die Pflege Labor Mücken sind in allen Phasen des Organismus Lebenszyklus von Larven zu Blut-Fütterung Erwachsene Puppen gezeigt.

Protokoll für Mosquito Aufzucht (A. gambiae)

Eine schnelle Methode zur Analyse flüchtiger Verbindungen in Obst wird beschrieben. Die flüchtigen Verbindungen in dem Kopfraum eines Homogenats der Probe schnell getrennt werden und damit mit ultra-schnellen Gaschromatographie (GC) mit einem Oberflächenwellen (SAW)-Sensor gekoppelt ist. Ein Verfahren zur Datenverarbeitung und-analyse wird ebenfalls diskutiert.

Obst-Volatile-Analyse mit einem elektronische Nase

Erfahren Sie ein optimiertes Aufzuchtprotokoll für den Parasitoiden Fopius arisanus zur biologischen Schädlingsbekämpfung. Diese Methode ermöglicht die effiziente Zucht weiblicher Wespen zur Bekämpfung von Tephritiden-Fruchtfliegen in Laborbedingungen.

Ein optimiertes Protokoll für die Aufzucht Fopius arisanus, Fliegt ein Parasitoid von Tephritid Fruit

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