Charakterisierung der funktionellen Chemoresistenz: Eine Methode zur Bewertung der Arzneimittelresistenz in Krebszellen mit einem klonogenen Assay

Um die Chemoresistenz in Krebszellen zu bewerten, beginnen Sie mit der Einnahme einer Multi-Well-Platte. Säen Sie eine Suspension der gewünschten medikamentenempfindlichen Prostatakrebszellen in einige Vertiefungen und eine Suspension der arzneimittelresistenten Variante der Zellen in die verbleibenden Vertiefungen.

Inkubieren Sie die Kultur, um die Anheftung der Zellen an die Kulturplatte zu erleichtern. Behandeln Sie beide Zelltypen mit einer Reihe von steigenden Dosen der ausgewählten Arzneimittellösung. Die Wirkstoffmoleküle dringen in die empfindlichen Zellen ein und verursachen bereits in geringsten Konzentrationen den Zelltod. Die resistenten Zellen scheiden die Wirkstoffmoleküle jedoch durch spezielle Wirkstoff-Effluxpumpen aus, so dass sie trotz höherer Wirkstoffkonzentrationen überleben können.

Aspirieren Sie das verbrauchte Medium, das Schmutz und Arzneimittellösung enthält. Ergänzen Sie mit frischen, medikamentenfreien Nährmedien. Inkubieren, damit sich die überlebenden arzneimittelresistenten Zellen vermehren und Kolonien bilden können. Fügen Sie eine geeignete Färbelösung hinzu, um die lebenden Zellkolonien zu färben.

Waschen Sie die Kultur, um überschüssige Farbe zu