Magnetbead-basierte Exosomenextraktion: Eine Technik zur Isolierung spezifischer Exosomen aus Bioflüssigkeiten

Exosomen sind extrazelluläre vesikuläre Strukturen, die von Zellen in Bioflüssigkeiten abgesondert werden. Um spezifische Exosomen aus Bioflüssigkeiten einzufangen, beginnen Sie mit der Einnahme von Streptavidin-beschichteten magnetischen Kügelchen in einem Röhrchen.

Zu diesem Röhrchen fügen Sie biotinylierte Anti-Human-Antikörper hinzu. Biotin, das auf den Antikörpern vorhanden ist, hat eine hohe Affinität zu Streptavidin, das auf den magnetischen Kügelchen vorhanden ist. Dadurch kommt es zur Konjugation der Antikörper mit den magnetischen Kügelchen.

Geben Sie als Nächstes eine proteinreiche Blockierungslösung in das Röhrchen mit den mit Antikörpern markierten Magnetkügelchen. Die Proteine in der Blockierungslösung binden an die freien Stellen auf den magnetischen Kügelchen und erhöhen die Spezifität der Exosomenbindung.

Ergänzen Sie nun das Röhrchen mit einer Proben-Bioflüssigkeit, die reich an Exosomen ist. Inkubieren Sie das Röhrchen unter Rühren. Die Exosomen in der Bioflüssigkeit weisen spezifische Oberflächenrezeptoren auf, die ihnen helfen, an die Antikörper zu binden, die an der Oberfläche der magnetischen Kügelchen befestigt sind.

Stellen Sie dann das Rohr in ein Magnetfe