Cranial Window-based Intravital Imaging in a Mouse Model: Eine bildgebende Technik zur Untersuchung des Verhaltens von vorinjizierten Krebszellen im Gehirn eines Mausmodells

Die intravitale Bildgebung durch optische Bildgebungsfenster ermöglicht die hochauflösende Verfolgung einzelner Zellen, um ihr Verhalten in der nativen Mikroumgebung eines lebenden Tieres zu untersuchen.

Nehmen Sie zunächst eine anästhesierte Maus, deren Gehirn mit Krebszellen vorinjiziert wurde und deren implantiertes Schädelfenster in einen Metallring passt. Die Krebszellen exprimieren nukleäre fluoreszierende Proteine.

Positionieren Sie die Maus mit der bedruckten Seite nach oben in einem Bildrahmen. Die magnetische Halterung in der Bildgebungsbox hilft, das implantierte Schädelfenster zu sichern.

Transportieren Sie nun die Bildgebungsbox in die umgebungskontrollierte Bildgebungskammer eines inversen Mikroskops, um das Verhalten von Krebszellen im Gehirn zu analysieren.

Stellen Sie den Laser im Multiphotonenmodus auf eine geeignete Wellenlänge ein. Fokussieren Sie sich auf die Tumorregion, um die Fluoreszenz von Krebszellen zu detektieren.

Definieren Sie für jede Position einen Z-Stapel, um mehrere intravitale Bilder von Krebszellen in verschiedenen optischen Ebenen aufzunehmen.

Dieser Schritt ermöglicht die Erfassung eines signifikanten Anteils der Krebszellen in der Mikroumgeb