Migrationsassay für Hirntumor-Stammzellen (BTSC) für Arzneimittelbehandlungsstudien: Eine In-vitro-Lebendzell-Bildgebungstechnik zur Analyse der Wirkung einer medikamentösen Behandlung auf die Migration von BTSCs

Hirntumor-Stammzellen (BTSCs), eine Subpopulation von Hirntumorzellen, können das Tumorwachstum und die Metastasierung initiieren, was sie zu vielversprechenden Zielen für die Krebstherapie macht. Um die Wirkung von Arzneimitteln auf die BTSC-Migration in vitro zu untersuchen, stellen Sie zunächst einheitliche Suspensionen von BTSCs in einem geeigneten Medium her. Behandeln Sie eine der Suspensionen mit dem gewünschten Medikament.

In der Zwischenzeit erhalten Sie eine Multi-Well-Chemotaxisplatte, die aus membranösen Einsätzen besteht, die jede Vertiefung in eine obere und eine untere Kammer unterteilen. Pipettieren Sie das gewünschte extrazelluläre Matrixprotein in die unteren Kammern und membranösen Inserts. Inkubieren, um die Polymerisation des Proteins zu erleichtern.

Geben Sie ein geeignetes Basalmedium, das den gewünschten Chemolockstoff enthält, in die unteren Kammern und legen Sie es über die membranösen Einsätze. Als nächstes säen Sie die medikamentös behandelte und unbehandelte BTSC-Suspension in membranöse Inserts. Bilden Sie die Platte über einen längeren Zeitraum mit der Lebendzellmikroskopie ab.

In Kultur haften BTSCs an der Proteinmatrix des Inserts. Als Reaktion auf