Co-Kultivierung von Glioblastomzellen auf gemusterten Neuronen: Eine Technik zur Überwachung der Migration von Glioblastomzellen auf Hippocampus-Neuronen von Ratten in vitro

Das Glioblastom besitzt stammähnliche Zellen, die entlang der axonalen Bahnen myelinisierter Neuronen wandern, um in entfernte Orte im Gehirn einzudringen. Um die Wanderung von Glioblastom- oder GBM-Zellen auf Neuronen in vitro zu rekapitulieren, beginnen Sie mit der Entnahme eines Glasdecktuchs.

Aktivieren Sie das Deckglas durch eine Sauerstoffplasmabehandlung und grundieren Sie es mit einem Funktionalisierungsmittel. Diese Behandlung unterstützt den einfachen Zugang zu den Chemikalien in den nachfolgenden Schritten. PEGylierte Lösung zum Deckglas geben und inkubieren. Diese Lösung bedeckt das Deckglas und verhindert die Adhäsion von Neuronen an zufälligen Stellen.

Geben Sie ein Photoinitiator-Polymer auf das Deckglas und montieren Sie es in der Bildgebungskammer. Stellen Sie die Kammer auf den Tisch eines Fluoreszenzmikroskops. Im Inneren werden die Photoinitiator-Moleküle durch die UV-Beleuchtung lokal an den dafür vorgesehenen Stellen aktiviert, die den vorgesehenen Mikromustern entsprechen.

Die aktivierten Photoinitiator-Moleküle spalten die darunterliegende PEG-Schicht und erzeugen so das gewünschte Muster. Fügen Sie nun die Lamininlösung hinzu und inkubieren Sie. Laminin - e