Isolierung von Hirnkapillaren aus dem menschlichen Gehirn: Eine optimierte Methode zur Extraktion von Hirnkapillaren aus menschlichem Hirngewebe

Zerebrale Kapillaren sind ein wichtiger Bestandteil der Blut-Hirn-Schranke - eine semipermeable Barriere, die eine selektive Bewegung von gelösten Stoffen zwischen Blut und Gehirn ermöglicht. Um Hirnkapillaren zu isolieren, beginnen Sie mit frischem menschlichem Gehirngewebe. Entfernen Sie die Hirnhäute und hacken Sie die weiße Substanz ab.

Zerkleinern Sie das Hirngewebe in kleinere Fragmente. Die Fragmente werden in einen Homogenisator mit einem geeigneten Puffer überführt und homogenisiert. Durch die Homogenisierung wird das Gewebe zersetzt, wodurch Kapillaren und Gewebetrümmer in die Lösung freigesetzt werden.

Das Homogenat wird in ein frisches Röhrchen umgefüllt und ein optimales Volumen eines geeigneten Dichtegradientenmediums hinzugefügt. Zentrifugieren Sie die Lösung, um die Kapillaren zu pelletieren. Zu viel oder zu wenig Dichtegradient mittel führt zu einer geringen Kapillarausbeute. Entfernen Sie den Überstand.

Resuspendieren Sie das Pellet in Rinderserumalbumin oder BSA-supplementiertem Puffer. BSA stabilisiert Verdauungsenzyme und erhält die strukturelle Integrität der Kapillaren. Filtrieren Sie anschließend die Lösung mit einem geeigneten Filter, um große Gefäße und Ge