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DOI: 10.3791/3074-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Ein Protokoll für die Kanülierung der Maus Glandula Speicheldrüse über die Wharton-Gang beschrieben. Für dieses Experiment ist die Trypanblau-Lösung als Färber verwendet werden, um zu demonstrieren, wie diese Technik effektiv liefert Infusionen in die gezielte Drüse, und die Zuverlässigkeit dieses neuen Ansatzes als potenzielle klinische Arzneimittelentwicklung / Zelltherapie für die Regeneration der Speicheldrüsen vorschlagen.
Alle Versuche wurden vom Tierpflegeausschuss der McGill University genehmigt und wir halten uns an die Richtlinien des Canadian Council on Animal Care. Das Ziel dieses Experiments ist es, Vorläufer- oder Stammzellen durch die Kanülierung des Wharton-Gangs in die Maus der Unterkieferspeicheldrüse zu bringen. Für dieses Video wird Trippenblau-Lösung als Farbstoff verwendet, um die Zellinfusion zu visualisieren.
Eine Unterfunktion der Speicheldrüsen ist eine der häufigsten Nebenwirkungen des Sjögren-Syndroms und der therapeutischen Bestrahlung zur Krebsbehandlung im Kopf- und Halsbereich. Eine Fehlfunktion der Speicheldrüse kann oft zu Zahnerkrankungen wie Infektionen der Mundschleimhaut und Karies führen. Ein innovativer Ansatz der regenerativen Medizin zur Behandlung geschädigter Speicheldrüsen ist der folgende.
Stammzellen können durch Kanülierung über die Enten der Speicheldrüse direkt in die Drüse eingebracht werden, da dies eine wirksame Methode zur Wiederbelebung der Funktionen der beeinträchtigten Drüse ist, vermutlich differenzieren sich die migrierten fremden Stammzellen zu Drüsenzellen, um als Teil der Speicheldrüse zu fungieren. Hier veranschaulichen wir die Schritte, die bei der Durchführung des Kanülierungsverfahrens an der Speicheldrüse der Maus über den Wharton-Gang erforderlich sind. Für dieses Experiment wird die Trip- und Blue-Lösung durch die Öffnung des Wharton-Kanals mit einer Ultra Comfort 29 Mullnadel und Spritze in die Drüse injiziert.
Anschließend wird die Maus präpariert, um zu zeigen, dass die Infusionen erfolgreich in die Drüse migriert sind. Vollständig. Schritt eins, ein Mikroliter pro Gramm Körpergewicht von 0,5 Milligramm pro Milliliter, Atropinsulfat-Monohydrat wird jeder Maus subkutan injiziert, um zu verhindern, dass die Speichelsekrete die Bewegung der Infusionen stören. Im zweiten Schritt wird jeder Maus intraperitoneal ein Mikroliter pro Gramm Körpergewicht von 100 Milligramm pro Milliliter, Ketamin und 20 Milligramm pro Milliliter Xylazinlösung injiziert, um die Maus zu sedieren.
Schritt drei. Nach dem Sedierungsprozess wird die Maus auf eine Plattform gelegt. In der Bauchlage wird der Oberkieferschneidezahn mit einem Metalldraht verriegelt und der Unterkieferschneidezahn an einer elastischen Schnur eingehakt, um den Mund offen zu halten.
Schritt vier: Mit einer ultra comfort 29 Gau Nadel und einer Spritze wird eine gefilterte 0,4%ige Trianblaulösung durch den Wharton-Kanal, der sich direkt unter der Zunge befindet, in die submandibuläre Speicheldrüse infundiert. Die Nadel zeigt nun auf die Öffnung des Wharton-Kanals und ist nun in den Kanal eingedrungen, um die Infusionen zu verabreichen. Schritt fünf.
Unmittelbar nach der Kanülierung wird die Speicheldrüse operativ freigelegt, um festzustellen, wie viel der Infusionen tatsächlich in der Drüse verblieben sind. Nachdem die Infusionen injiziert worden waren, wurde die Maus präpariert, um die postkanülierte Speicheldrüse chirurgisch freizulegen. Wie Sie in diesem Bild sehen können, ist die dunkle Färbung des Wharton-Kanals ein starker Beweis dafür, dass die Trippinblau-Lösung im Falle der Unterfunktion der Speicheldrüsen erfolgreich infundiert wurde.
Die lokale Anwendung, nämlich die Injektion von Medikamenten und Zellen durch dieses Kanülenverfahren, kann als ein direkterer und effektiverer Weg zur Wiederbelebung der Funktionen der Ohrspeicheldrüse, der Unterkieferspeicheldrüsen und der sublingualen Speicheldrüsen wahrgenommen werden. Wie aus den repräsentativen Ergebnissen hervorgeht, wurden die Infusionen, in diesem Fall die Trian-Blau-Lösung, erfolgreich über den Wharton-Gang in die submandibuläre Speicheldrüse der Maus eingebracht. Daher kann diese Kanülierungstechnik als zuverlässiges Modell für die regenerative Medizin der Speicheldrüse von Mäusen verwendet werden.
Und als Zukunftsperspektive könnte dieses Verfahren eine zielführende Methode für die klinische Anwendung des Gentransfers sein. Es wäre mir eine große Freude, wenn dieser visuelle Artikel als wirksames Werkzeug für Studenten und Forscher verwendet würde, die an weiteren Studien in der regenerativen Medizin der Speicheldrüse interessiert sind.
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