Name: Laser Capture Mikrodissektion von Säugetiergewebe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 34 s
Description: Lernen Sie die Laser Capture Mikrodissektion mit dem Leica A-S-L-M-D-System zur präzisen Isolierung von Säugetiergewebe. Diese Methode ermöglicht Forschern die gezielte Analyse spezifischer Zellpopulationen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

laser capture mikrodissektion von säugetiergewebe

Laser Capture Microdissection of Mammalian Tissue

Laser Capture-Mikroskopie, die auch als Laser-Mikrodissektion (LMD) bekannt ist, ermöglicht dem Benutzer, eine kleine Anzahl von Zellen oder Geweben von gefrorenen oder Formalin-fixierten, in Paraffin eingebettete Gewebeschnitte zu isolieren. LMD-Techniken beruhen auf einer hitzelabiler Membran entweder oben auf gelegt, oder unter der Gewebeschnitt. In einem Verfahren wird fokussierten Laser Energie verwendet, um die Membran auf die darunter liegenden Zellen, die dann aus dem Gewebe Abschnitt aufgehoben werden können schmelzen. In den anderen, verdampft die Laserenergie die Folie entlang eines Pfades &quot;gezeichnet&quot; auf das Gewebe, so dass die markierten Zellen in eine Auffangeinrichtung fallen. Jede Technik ermöglicht die Auswahl von Zellen mit einer minimalen Auflösung von einigen Mikrometern. DNA, RNA-, Protein-und Lipid-Proben isoliert und analysiert werden von der Mikro-seziert Proben. In diesem Video zeigen wir die Verwendung des Leica AS LMD-Lasermikrodissektion Instrument in sieben Segmente, darunter eine Einführung in die Prinzipien der LMD, die Initialisierung des Gerätes für den Einsatz, allgemeine Überlegungen zur Probenvorbereitung, die Montage der Probe und der Einrichtung erfassen Rohre , Ausrichten des Mikroskops, die Anpassung der Aufnahme kontrolliert, und die Erfassung Gewebeproben. Laser-Capture-Mikrodissektion ermöglicht die Ermittler Proben des reinen Zellpopulationen so klein wie ein paar Zell-Äquivalenten zu isolieren. Dies ermöglicht die Analyse von Zellen von Interesse, die frei von benachbarten Verunreinigungen, die experimentellen Ergebnisse verfälschen können sind.

Laser Capture Mikrodissektion von Säugetiergewebe

Die Laser-Capture-Mikroskopie, auch als Lasermikrodissektion (LMD) bekannt, ermöglicht es dem Anwender, kleine Zellmengen oder Gewebe aus gefrorenen oder ...

Hallo, mein Name ist Rob Edwards. Ich bin der Leiter der Laser-Kapture-Mikroskopie-Einrichtung der University of California Irvine. Ich werde Ihnen die Verwendung des hier verfügbaren Laser-Kapture-Mikroskops erläutern.Unser Instrument ist ein Leica A-S-L-M-D, den wir vor etwa drei Jahren erworben haben. Es gibt zwei verschiedene Arten von Lasermikrodissektions-Systemen. Eines kann mit einem Punktschweißgerät verglichen werden, bei dem ein Gewebestück auf einer Glasobjektträgerplatte auf einer Kunststoffmembran liegt, die über dem Gewebe angeordnet ist.Als Nächstes wird eine Laserquelle verwendet, um die Membran zu schmelzen, wodurch das Gewebe praktisch punktgeschweißt auf der Membran befestigt wird. Anschließend wird die Membran entfernt, wobei das gewonnene Gewebe mitgenommen wird. Gut. Um das LCM-System zu starten, schalten wir nacheinander mehrere Geräte ein. Zuerst beginnen wir mit der A-S-L-M-D-Steuerbox, die hier eingeschaltet wird.Dann schalten wir den Computer ein, was einfach genug ist. Wenn Sie eine Probe haben, die eine Fluoreszenzoptik zur Identifizierung der zu isolierenden Zellen erfordert, würden Sie die Quecksilberlampe für die Fluoreszenzbeleuchtung einschalten.

laser-capture-microdissection-of-mammalian-tissue

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Das Video beschreibt die Laserdissektion des 3D-organotypischen Co-Kulturmodells mit Präzision im Mikrometerbereich. In organotypischen 3D-Modellen werden stromale Bestandteile wie Fibroblasten 3-dimensional mit Krebsepithelzellen kokultiviert. Das 3D-Modell dient als experimentelles Werkzeug, mit dem Invasion und Krebs-Stroma-Wechselwirkungen unter nahezu physiologischen Bedingungen untersucht werden können.

Lasermikrodissektion: Eine Technik zur Isolierung eindringender Darmkrebszellen aus einem organotypischen 3D-Kulturmodell

Mikrodissektion wurde ausgiebig für die Untersuchung von DNA, RNA und Protein in Gewebe eingesetzt. Laser-Capture-Mikroskopie (LCM) ist die am häufigsten verwendete Methode, aber eine neue Frästechnik mesodissection ist kürzlich verfügbar. Wir zeigen, RNA-Extraktion aus Formalin fixiert mesodissected Paraffin eingebetteten Gewebeschnitten von Mycobacterium tuberculosis Granulome.

A Novel Microdissection Ansatz zur Wiederherstellung<em&gt; Mycobacterium tuberculosis</em&gt; Spezifische Transkripte aus Formalin fixierten und in Paraffin eingebetteten Lung Granulome

Die Isolierung der einzelnen Dopamin-Neuronen oder der ventralen Haubengebiet mit direkter oder indirekter Immunhistochemie nutzt Laser Mikrodissektion demonstriert. Parameter für die Isolierung von Gewebe aus einem Glasobjektträger unter Verwendung eines Infrarotlasers und aus Membran Folien unter Verwendung der Kombination eines Infrarot und Ultraviolett-Lasers diskutiert.

Laser Mikrodissektion - Eine Demonstration der Isolation der einzelnen Dopamin-Neuronen und die gesamte ventrale Tegmentum

Das Ziel dieses Protokolls ist es, die Laser-Capture-Mikrodissektion als effektive Methode zur Isolierung reiner Populationen von Zelltypen aus heterogenem Prostatagewebe für die nachgeschaltete RNA-Analyse zu verwenden.

Laser-Mikrodissektion für Menschen Prostataepithel für die RNA-Analyse

Hier beschreiben wir ein Protokoll für eine reproduzierbare Laser Capture Microdissection (LCM) zur Isolierung von trabekuläre Geflecht (TM) für die nachgelagerten RNA-Analyse. Die Fähigkeit, Veränderungen in der Genexpression im TM zu analysieren hilft beim Verständnis der zugrunde liegenden molekularen Mechanismen der TM-okulären Erkrankungen.

Laser Capture Microdissection von hochreinen trabekuläre Geflecht aus Maus Augen für Gene Expression Analysis

Ein Lasercapture Microdissection (LCM) Protokoll wurde entwickelt, um eine ausreichende Menge an hochwertiger RNA für die Genexpressionsanalyse in Knochenzellen zu erhalten. Die aktuelle Studie konzentriert sich auf Mausfemurabschnitte. Das hier berichtete LCM-Protokoll kann jedoch verwendet werden, um die Genexpression in Zellen von hartgeweben zu untersuchen.

Ein Laser Capture Microdissection Protocol, das hochwertige RNA aus frisch gefrorenen Mausknochen liefert

Dieses Protokoll beschreibt lasercapture microdissection for the isolation of knorpel and bone from fresh frozen sections of the mouse embryo. Knorpel und Knochen können durch Kresylviolettfärbung schnell visualisiert und präzise gesammelt werden, um hochwertige RNA für die transkriptomische Analyse zu liefern.

Laser Capture Mikrodissektion von Maus embryonalen Knorpel und Knochen für Die Genexpressionsanalyse

Lasermikrodissektion (LMD) ist eine empfindliche und hochreproduzierbare Technik, die verwendet werden kann, um Wege aufzudecken, die Gliomheterogenität und Invasion vermitteln. Hier beschreiben wir ein optimiertes Protokoll zur Isolierung diskreter Bereiche aus Gliomgewebe mittels Laser LMD, gefolgt von transkriptomischer Analyse.

Lasercapture Mikrodissektion von Glioma Subregionen für räumliche und molekulare Charakterisierung der intratumoralen Heterogenität, Oncostreams und Invasion

Es wird ein Protokoll beschrieben, das Laser-Mikrodissektion verwendet, um einzelne Nematodengewebe für die RNA-Sequenzierung zu isolieren. Das Protokoll erfordert keine artspezifischen genetischen Toolkits, so dass Genexpressionsprofile zwischen verschiedenen Spezies auf der Ebene von Einzelgewebeproben verglichen werden können.

Laser-Mikrodissektion für speziesunabhängige Einzelgewebeanwendungen

Dieses Protokoll beschreibt einen Hochdurchsatz-Workflow für die künstliche Intelligenz-gesteuerte Segmentierung von pathologiebestätigten Regionen von Interesse aus gefärbten, dünnen Gewebeschnittbildern zur Anreicherung von histologieaufgelösten Zellpopulationen mittels Laser-Mikrodissektion. Diese Strategie beinhaltet einen neuartigen Algorithmus, der die Übertragung von Demarkationen, die Zellpopulationen von Interesse bezeichnen, direkt auf Lasermikroskope ermöglicht.

Industrialisierte, von künstlicher Intelligenz gesteuerte Laser-Mikrodissektion zur mikroskaligen proteomischen Analyse der Tumormikroumgebung

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Isolierung von RNA aus definierten histologischen Regionen von paraformaldehydfixiertem, mit Optimal Cutting Temperatur eingebettetem Mauslebergewebe mittels Laser-Capture-Mikrodissektion, was eine gezielte nachgeschaltete Genexpressionsanalyse ermöglicht.

Laser-Capture-Mikrodissektion von paraformaldehydfixiertem Mauslebergewebe zur RNA-Analyse

Lernen Sie die Laser Capture Mikrodissektion mit dem Leica A-S-L-M-D-System zur präzisen Isolierung von Säugetiergewebe. Diese Methode ermöglicht Forschern die gezielte Analyse spezifischer Zellpopulationen.

Laser Capture Mikrodissektion von Säugetiergewebe

Weitere Videos entdecken