Name: Maus-Modell der chirurgisch-induzierten Endometriose durch Auto-Transplantation von Gebärmutter-Gewebe (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Erfahren Sie die chirurgische Induktion von Endometriose bei Mäusen durch Autotransplantation von Gebärmuttergewebe an die Darmmesenterialarterien. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung von Krankheitsmechanismen und Therapieansätzen.

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Besonderer Dank geht an Chris Kassotis und Audrey Bailey für die kritische Durchsicht des Manuskripts und Dr. Scott Korte, Joseph Beeman, Alison Curfman, Paul Kimball, Bridget Neibreggue, Jacob Redel, Amy Schröder, Maija Steinberg, und Stacey Winkeler für ihre Unterstützung bei der Optimierung dieses Modell in unserem Labor. Die Finanzierung wurde von der Clinical Biodetectives Training Grant (NIH T90) (KEP), University of Missouri Life Sciences Undergraduate Research Opportunities Program, MU Research Council, MU Research Board Zuschüsse und NIH R21HD056441 (SCN) zur Verfügung gestellt.

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<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+estrogen%2C+progesterone%2C+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li>
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<li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li>
<li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li>
<li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li>
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</ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Es gibt mehrere kritische Parameter, bemerkt während der Durchführung der chirurgischen Induktion von Endometriose bei Mäusen sollte. Erstens ist die Endometriose ein Östrogen abhängig Krankheit und als solche diese Operation sollte in gesunden Tieren oder alternativ in ovarektomierten Tiere mit Östrogenen 20 ergänzt durchgeführt werden. Zweitens muss die Naht Endometriumbiopsien der arteriellen Kaskade mit äußerster Sorgfalt durchgeführt werden. Wir haben festgestellt, dass mit nur zwei relativ lockeren Knot...

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenzes / Ausrüstung </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td></tr><tr><td> Wax Bleistift </td><td> Fischer </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Objektträger aus Glas </td><td> Fischer </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Pipette </td><td> Fischer </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Standard-Lichtmikroskop für die Bewertung Vaginalzytologie Abstrichen </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorphin HCL c3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Butler Tiergesundheit Versorgung </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Sterile Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10.000 U / ml Penicillin, 10.000 pg / ml Streptomycin in 0,85% NaCl </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> Isofluran </td><td> AbbottTiergesundheit </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> Isofluran nicht Rückatmungssystemen System </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Recirculating Warmwasser Heizkissen </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 ml Spritze Mantel </td><td> Fischer </td><td> 14 bis 823-16G </td></tr><tr><td> Puderfrei sterile Handschuhe </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Augensalbe </td><td> Große Pharmaceuticals </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Kleine elektrische Haarschneidemaschine </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Chlorhexidin scrub </td><td> Fischer </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> 70% Ethanol </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Polylined sterilen Bereich </td><td> Busse Krankenhaus Disposables </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Größe 3 Skalpell </td><td> Fischer </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Number 10 Skalpellklingen </td><td> Fischer </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Kleine chirurgische Scheren </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Kleine gezackte semi-gebogenen Pinzette </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 schwarz geflochten Seidenfaden </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Sterilisiert Pyrexglas Petrischalen </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 mm Biopsiestanze </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Sterile Gaze </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 schwarz Monofilament Ethilon Nylonnaht </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> Needle-Treiber (optional) </td><td> World Precision Instruments </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 ungefärbt geflochten beschichtet vicryl Naht </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9mm Autoclip Wundklammern </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Autoclip Applier &amp; Entferner </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> 23G Nadel </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> 1cc Spritze </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> 5x Lupe Standfuß (optional) </td><td> Fischer </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> 10% gepuffertem Formalin </td><td> Fischer </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Taster </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> Verarbeitung / Einbettkassetten </td><td> Fischer </td><td> 15 bis 197-700A </td></tr><tr><td> Biopsie Schaumstoff-Pads </td><td> Fischer </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> RNAqueous RNA Isolation Kit </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> Flüssiger Stickstoff </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Schnappdeckel Mikrozentrifuge flachen Oberrohr </td><td> Fischer </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> Ketamin (optional) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (Medetomidinhydrochlorid) (optional) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (Atipamezol) (optional) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

maus-modell der chirurgisch-induzierten endometriose durch auto-transplantation von gebärmutter-gewebe

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

Die Endometriose ist eine chronische, schmerzhafte Erkrankung, deren Ätiologie ist unbekannt. Darüber hinaus kann die Behandlung der Endometriose erfordern laparoskopische Entfernung der Läsionen und / oder chronischen pharmazeutische Behandlung von Schmerzen und Unfruchtbarkeit Symptome. Die Kosten im Zusammenhang mit Endometriose hat bei 22 Milliarden Dollar pro Jahr in den Vereinigten Staaten von Amerika 1 geschätzt. Um unser Verständnis der zugrunde liegenden Mechanismen dieser rätselhaften Krankheit sind Tiermodelle eingesetzt. Primaten entwickeln spontan Endometriose und somit Primatenmodelle am ehesten die Krankheit bei Frauen ähneln. Nager-Modelle, sind aber kostengünstiger und leicht verfügbar 2. Das Modell, das wir hier beschreiben, beinhaltet eine autologe Transfer von Gebärmutter-Gewebe der Darmwand Mesenterium (Abbildung 1) und wurde zum ersten Mal in der Ratte 3 entwickelt und später an der Maus 4 übertragen. Das Ziel der autologen Nagetier Modell der chirurgisch-induzierten Endometriose ist zu imitierendie Krankheit bei Frauen. Wir und andere haben bereits gezeigt, dass die veränderte Genexpressionsmuster in Endometrioseherde von Mäusen oder Ratten Spiegel bei Frauen mit der Krankheit 5,6 beobachtet wurden. Ein Vorteil der Durchführung der Operation in der Maus ist, dass die Fülle von transgenen Mauslinien zur Verfügung können die Forscher bei der Bestimmung der Rolle von spezifischen Komponenten wichtig für die Gründung und das Wachstum der Endometriose helfen. Ein alternatives Modell, in dem ausgeschnittenen menschlichen Endometrium-Fragmente an das Bauchfell von immungeschwächten Mäusen eingebracht werden, ist ebenfalls weit verbreitet, sondern wird durch das Fehlen eines normalen Immunsystems, die Gedanken zu sein bei der Endometriose 2,7 wichtig ist begrenzt. Wichtig ist, dass die Maus-Modell der chirurgisch induzierten Endometriose ein vielseitiges Modell, das verwendet wurde, zu untersuchen, wie das Immunsystem 8, Hormone 9,10 und Umweltfaktoren 11,12 Endometriose sowie die Auswirkungen von Endometriose auf fert beeinflussenility 13 und Schmerzen 14.

Eine Beschreibung der chirurgischen Induktion von Endometriose bei Mäusen und Ratten durch auto-Transplantation von Gebärmutter-Gewebe auf die arterielle Kaskade der Darm Mesenterium.

Maus-Modell der chirurgisch-induzierten Endometriose durch Auto-Transplantation von Gebärmutter-Gewebe

Endometriose ist eine chronische, schmerzhafte Erkrankung, deren Ätiologie weiterhin unbekannt ist. Darüber hinaus kann die Behandlung von Endometriose die laparoskopische Entfernung von ... erfordern.

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, bei Mäusen operativ Endometriose durch autologe Transplantation von Uterusgewebe in die arterielle Versorgung des Darmmesenteriums zu induzieren. Dies wird erreicht, indem zunächst die Uterusarterie ligiert, der Uterus entfernt und das Endometrium freigelegt wird. Der zweite Schritt des Verfahrens besteht darin, mithilfe einer zweimillimeterigen Biopsiepunch aus dem freigelegten Endometrium drei endometrioidartige Implantate herzustellen.Der dritte Schritt des Verfahrens besteht darin, die drei endometrioiden Implantate an Arterien in der arteriellen Kaskade des Darmmesenteriums zu nähen. Der letzte Schritt des Verfahrens ist das Verschließen der Bauchwand und der Haut sowie die Gewährleistung der Erholung der endometrioiden Läsionen beim Tier. Bei Mäusen entfernte Proben ähneln denjenigen bei Frauen mit Endometriose, wie histologische Analysen sowie Muster der Gen- und Proteinexpression zeigen.Im Allgemeinen haben Personen, die neu in dieser Methode sind, aus drei Hauptgründen Schwierigkeiten. Erstens sind die Mausgewebe einfach sehr klein. Zweitens lässt sich das Darmmesenterium leicht beschädigen, und drittens führen Nähte,

mouse-model-surgically-induced-endometriosis-auto-transplantation

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Dieses Video zeigt die Erzeugung eines Kaninchenmodells für Endometriumkarzinom durch Injektion einer hochmetastasierten VX2-Zellsuspension in die vernähten Gebärmutterhörner des Kaninchens. Dies führt zur Entstehung eines primären Endometriumkarzinoms mit retroperitonealen Lymphknotenmetastasen.

Modellierung des metastasierten Endometriumkarzinommodells: Eine Technik zur Erzeugung von Endometriumkarzinom mit Lymphknotenmetastasen in Kaninchenmodellen

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll für live-Aufnahmen von Eindringmittel beschriftete menschliche endometrialen Fragmente bei Mäusen verpflanzt. Die Methode ermöglicht das untersuchen die Auswirkungen der Medikamente der Wahl auf die Größe der nichtmalignem Läsion durch Überwachung und Quantifizierung der Fluoreszenz emittiert von fluoreszierenden Reporter in...

Nicht-invasive Überwachung der Größe der Läsion in einer heterologen Mausmodell der Endometriose

Viele Nagetiermodelle der Endometriose sind durch technische Komplexität, Reproduzierbarkeit und/oder den Bedarf an immungeschwächten Tieren oder speziellen Reportermäusen begrenzt. Wir präsentieren ein vereinfachtes System der Läsionsinduktion mit jeder experimentellen Maus mit einem unabhängig überprüfbaren, objektiven Scoring-System und ohne Notwendigkeit für Ovariektomie oder Überlebensoperation.

Ein syngenes Murinmodell der Endometriose mit natürlich radfahrenden Mäusen

In dieser Studie wird ein neuartiges Mausmodell vorgestellt, das speziell zur Simulation von Endometriomen, einem klinisch signifikanten Subtyp der Endometriose, entwickelt wurde. Durch die Verwendung von C57BL/6J-Mäusen zielt das Modell darauf ab, die pathophysiologischen Mechanismen aufzuklären, die der endometriombedingten Unfruchtbarkeit zugrunde liegen, und bietet ein verfeinertes Werkzeug, um die derzeitige Wissenslücke in der Reproduktionsmedizin zu schließen.

Etablierung eines experimentellen Mausmodells des Endometrioms zur Untersuchung der damit verbundenen Unfruchtbarkeit

Dieser Artikel beschreibt ein detailliertes Protokoll zur Herstellung eines zuverlässigen und reproduzierbaren dünnen Endometriums mit einer sehr niedrigen Mortalitätsrate und minimalen intrauterinen Adhäsionen durch Injektion von 95% Ethanol in die Gebärmutter der Maus innerhalb von 1-3 Minuten.

Etablierung eines Mausmodells für dünnes Endometrium

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur Induktion einer Gebärmutterschädigung im Mausmodell, gefolgt von nachgelagerten Analysen während einer nachfolgenden Schwangerschaft.

Mausmodell der chirurgischen Gebärmutterverletzung und der nachfolgenden Schwangerschaftsergebnisse

Der intraluminale cerebri Okklusion in Mäusen wird hier vorgestellt. Das Ausmaß der Hirninfarkt wird durch eine neurologische Partitur und Cresylviolett Färbung, eine alternative Färbung zur TTC bietet den großen Vorteil, dass sie parallel viele interessante Marker testen ausgewertet.

Maus-Modell der Intraluminal MCAO: Hirninfarkt Evaluation durch Cresylviolett Staining

Nach unserer Kenntnis der zellulären und molekularen neotissue Bildung zu verbessern, wurde ein Maus-Modell der TEVG vor kurzem entwickelt. Die Transplantate wurden als infrarenalen Vena cava Zwischen Transplantate in C57BL / 6 Mäusen implantiert. Dieses Modell erzielt ähnliche Ergebnisse wie in unserer klinischen Untersuchung erreicht wird, sondern über einen weit verkürzt Zeitverlauf.

Die Implantation von Vena Cava Interposition Graft in Maus-Modell

Um die zellulären und molekularen Mechanismen neotissue Bildung und Stenose Entwicklung in Gewebezüchtungen Herzklappen zugrunde liegen, wurde ein Maus-Modell der heterotopen Herzklappentransplantation entwickelt. Eine Lungenherzklappe wurde mit der heterotopen Herztransplantation Technik, um Empfänger transplantiert.

Transplantation von Pulmonalklappe Mit einem Maus-Modell der heterotopen Herztransplantation

Hier beschreiben wir einen semi-invasiven optischen Mikroskopie-Ansatz zur Induktion eines photothrombotischen Gerinnsels in der somatosensorischen Hirnrinde einer Maus in vivo.  Es werden die technischen Aspekte des bildgebenden Verfahrens von der Induktion eines photothrombotischen Ereignisses über die Anwendung bis hin zur Datenerhebung beschrieben.

Rose Bengal Photothrombosis von konfokalen optischen Imaging<em&gt; In Vivo</em&gt;: Ein Modell des Einzelfahrzeug Stroke

Erfahren Sie die chirurgische Induktion von Endometriose bei Mäusen durch Autotransplantation von Gebärmuttergewebe an die Darmmesenterialarterien. Dieses Modell ermöglicht die Untersuchung von Krankheitsmechanismen und Therapieansätzen.

Maus-Modell der chirurgisch-induzierten Endometriose durch Auto-Transplantation von Gebärmutter-Gewebe

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