Name: Die Messung der cytosolischen Ca 2 + In Isolated Kontraktile Lymphgefäße (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-08T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 8 s
Description: Lernen Sie die Messung zytosolischer Ca²⁺-Konzentrationen in isolierten kontraktilen Lymphgefäßen der Ratte mittels Fura-2-basierter Ratiometrie. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung der Beziehung zwischen intrazellulärem Calcium und lymphatischer Kontraktilität unter kontrollierten Druckbedingungen.

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<p class="jove_content"&gt; Diese Arbeit wurde vom NIH P20RR018766 und einen Zuschuss von der ABMRF / Foundation for Alcohol Research gefördert.</p

<ol><li>Chakraborty, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+system%3A+a+vital+link+between+metabolic+syndrome+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.+Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Lymphatic system: a vital link between metabolic syndrome and inflammation.</a> Ann. N. Y. Acad. Sci. 1207, Suppl 1. 94-94 (2010).</li>
<li>Zawieja, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphatic+biology+and+the+microcirculation%3A+past%2C+present+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Lymphatic biology and the microcirculation: past, present and future.</a> Microcirculation. 12, 141-141 (2005).</li>
<li>Benoit, J. N., Zawieja, D. C., Goodman, A. H., Granger, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+intact+mesenteric+lymphatic+pump+and+its+responsiveness+to+acute+edemagenic+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of intact mesenteric lymphatic pump and its responsiveness to acute edemagenic stress.</a> Am. J. Physiol. 257, H2059-H2059 (1989).</li>
<li>Davis, M. J., Davis, A. M., Ku, C. W., Gashev, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myogenic+constriction+and+dilation+of+isolated+lymphatic+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart.+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myogenic constriction and dilation of isolated lymphatic vessels.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 296, H293-H293 (2009).</li>
<li>Dougherty, P. J., Davis, M. J., Zawieja, D. C., Muthuchamy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+sensitivity+and+cooperativity+of+permeabilized+rat+mesenteric+lymphatics%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Calcium sensitivity and cooperativity of permeabilized rat mesenteric lymphatics.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 294, R1524-R1524 (2008).</li>
<li>Fay, F. S., Shlevin, H. H., Granger, W. C., Taylor, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aequorin+luminescence+during+activation+of+single+isolated+smooth+muscle+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Aequorin luminescence during activation of single isolated smooth muscle cells.</a> Nature. 280, 506-506 (1979).</li>
<li>Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+myosin+light+chain+phosphorylation+decreases+rat+mesenteric+lymphatic+contractile+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart.+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Inhibition of myosin light chain phosphorylation decreases rat mesenteric lymphatic contractile activity.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, 726-726 (2009).</li>
<li>Karaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+movements%2C+distribution%2C+and+functions+in+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Calcium movements, distribution, and functions in smooth muscle.</a> Pharmacol. Rev. 49, 157-157 (1997).</li>
<li>Ratz, P. H., Berg, K. M., Urban, N. H., Miner, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+smooth+muscle+calcium+sensitivity%3A+KCl+as+a+calcium-sensitizing+stimulus%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Regulation of smooth muscle calcium sensitivity: KCl as a calcium-sensitizing stimulus.</a> Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 288, C769-C769 (2005).</li>
<li>Somlyo, A. P., Somlyo, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ca2%2B+sensitivity+of+smooth+muscle+and+nonmuscle+myosin+II%3A+modulated+by+G+proteins%2C+kinases%2C+and+myosin+phosphatase%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Ca2+ sensitivity of smooth muscle and nonmuscle myosin II: modulated by G proteins, kinases, and myosin phosphatase.</a> Physiol. Rev. 83, 1325-1325 (2003).</li>
<li>Souza-Smith, F. M., Kurtz, K. M., Molina, P. E., Breslin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+of+mesenteric+collecting+lymphatic+pump+function+following+acute+alcohol+intoxication%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Adaptation of mesenteric collecting lymphatic pump function following acute alcohol intoxication.</a> Microcirculation. 17, 514-514 (2010).</li>
<li>Breslin, J. W., Yuan, S. Y., Wu, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-C+alters+barrier+function+of+cultured+lymphatic+endothelial+cells+through+a+VEGFR-3-dependent+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphat.+Res.+Biol%22%5BJournal%5D)">VEGF-C alters barrier function of cultured lymphatic endothelial cells through a VEGFR-3-dependent mechanism.</a> Lymphat. Res. Biol. 5, 105-105 (2007).</li>
<li>Shirasawa, Y., Benoit, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stretch-induced+calcium+sensitization+of+rat+lymphatic+smooth+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart.+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Stretch-induced calcium sensitization of rat lymphatic smooth muscle.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 285, H2573-H2573 (2003).</li>
<li>Imtiaz, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pacemaking+through+Ca2%2B+stores+interacting+as+coupled+oscillators+via+membrane+depolarization%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Pacemaking through Ca2+ stores interacting as coupled oscillators via membrane depolarization.</a> Biophys. J. 92, 3843-3843 (2007).</li>
<li>Muller, J. M., Davis, M. J., Kuo, L., Chilian, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+coronary+endothelial+cell+Ca2%2B+concentration+during+shear+stress-+and+agonist-induced+vasodilation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Changes in coronary endothelial cell Ca2+ concentration during shear stress- and agonist-induced vasodilation.</a> Am. J. Physiol. 276, 1706-1706 (1999).</li>
<li>Ferrusi, I., Zhao, J., van Helden, D., von der Weid, P. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclopiazonic+acid+decreases+spontaneous+transient+depolarizations+in+guinea+pig+mesenteric+lymphatic+vessels+in+endothelium-dependent+and+-independent%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Cyclopiazonic acid decreases spontaneous transient depolarizations in guinea pig mesenteric lymphatic vessels in endothelium-dependent and -independent.</a> 286, H2287-H2287 (2004).</li>
</ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Eine neuartige Kombination von Methoden wurde eingesetzt, um innere Pumpen von Lymphgefäßen zu studieren. Die Fähigkeit, gleichzeitig zu messen Veränderungen in [Ca 2 +] i und Durchmesser in Pumpen Lymphgefäße wird für die Untersuchung der relativen Beiträge der Ca 2 +-abhängige und Ca 2 +-sensibilisierende Signalwege in der gesamten Mechanismus für die lymphatischen kontraktilen Zyklus. Zulassen Das lymphatische kontraktilen Zyklus besteht aus pha...

<table border="1"><tbody><tr><td> 1. Ringer 5x Lager </td></tr><tr><td Chemikalie </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Höhe </td></tr><tr><td> Kochsalz </td><td> EMD </td><td> SX0420-3 </td><td> 35 g </td></tr><tr><td> Kaliumchlorid </td><td> JT Baker </td><td> 3040 </td><td> 1,75 g </td></tr><tr><td> Calcium Chloride </td><td> Sigma </td><td> C-3881 </td><td> 1,47 g </td></tr><tr><td> Magnesium Sulfate </td><td> Sigma </td><td> M-9397 </td><td> 1,44 g </td></tr><tr><td> Steriles gefiltertes Wasser </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> Bring to 1 L </td></tr><tr><td> Sterile Filter in autoklaviert Flaschen und speichert bei 4 ° C </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 2. MOPS-Puffer </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Chemikalie </td><td> Firma </td&gt; <td> Katalog-Nummer </td><td> Höhe </td></tr><tr><td> MOPS </td><td> Sigma </td><td> M3183 </td><td> 125,6 g </td></tr><tr><td> Steriles gefiltertes Wasser </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> Bring to 1 L </td></tr><tr><td> Sterile Filter in autoklaviert Flaschen und speichert bei 4 ° C </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 3. Albumin physiologischer Kochsalzlösung (APSS) </td></tr><tr><td> Chemikalie </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Höhe </td></tr><tr><td> Ringer Lager (5x) </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> 200 ml </td></tr><tr><td> MOPS-Puffer </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> 5 mL </td></tr><tr><td> Sodium Phosphate </td><td> Sigma </td><td> S-9638 </td><td> 0,168 g </td></tr><tr><td> Natriumpyruvat </td><td> Sigma </td><td> P5280 </td><td> 0,22 g </td></tr><tr><td> EDTA-Natrium salt </td><td> Sigma </td><td> ED2SS </td><td> 0,0074 g </td></tr><tr><td> Glucose </td><td> Sigma </td><td> G7528 </td><td> 0,901 g </td></tr><tr><td> Albumin, Bovine </td><td> USB </td><td> 10856 </td><td> 10 g </td></tr><tr><td> Steriles gefiltertes Wasser </td><td> N / A </td><td> N / A </td><td> Bring to 1 L </td></tr><tr><td> Der pH-Wert auf 7,4 bei 37 ° C, dann Sterilfilter in autoklaviert Flaschen und lagern bei 4 ° C. </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Spezifische verwendeten Reagenzien. Speichern Sie alle bei 4 ° C.

die messung der cytosolischen ca 2 + in isolated kontraktile lymphgefäße

Measurement of Cytosolic Ca2+ in Isolated Contractile Lymphatics

Lymphgefäße aus einem multifunktionalen Transport-System, das Flüssigkeitshomöostase unterhält, liefert Lipide zu den zentralen Kreislauf und wirkt wie ein Überwachungssystem für potenziell schädliche Antigene, die Optimierung der Schleimhaut-Immunität und adaptive Immunantworten 1. Lymphe ist in der interstitiellen Flüssigkeit, die blind endenden initialen Lymphgefäße eintritt, und dann gegen einen Druckgradienten in größeren Sammlung Lymphgefäße transportiert gebildet. Jeder sammelt lymphatischen besteht aus einer Reihe von Segmenten bezeichnet Lymphangiome gemacht, getrennt durch bicuspid Ventile Rückfluss zu verhindern. Jeder Lymphangione besitzt einen kontraktilen Zyklus, der Lymphe gegen ein Druckgefälle in Richtung der zentralen Kreislauf 2 antreibt. Diese phasischen kontraktilen Muster ist analog zu den Herzzyklus mit systolischen und diastolischen Phasen, und mit einem geringeren Rückgang Frequenz 4. Darüber hinaus generiert lymphatische Tonus der glatten Muskulatur und zeigt myogene Verengung und Erweiterung in Reaktion auf Zu-und Abnahmen in luminalen Druck bzw. 5. Ein Hybrid aus molekularen Mechanismen, die sowohl die phasischen und tonischen Kontraktilität Lymphgefäße Unterstützung sind daher vorgeschlagen. Kontraktion der glatten Muskulatur in der Regel durch die cytosolische Ca 2 +-Konzentration reguliert ([Ca 2 +] i) plus Sensibilität für Ca 2 +, der kontraktilen Elemente in Reaktion auf Veränderungen in der Umgebung der Zelle 6. [Ca 2 +] i wird durch die Kombination der Bewegung der Ca 2 + durch Plasmamembran Liganden oder spannungsgesteuerten Ca 2 +-Kanäle und die Freisetzung und Aufnahme von Ca 2 + aus dem internen Speicher bestimmt. Cytosolischen Ca 2 + bindet an Calmodulin und aktiviert Enzyme wie Myosin Light Chain (MLC)-Kinase (MLCK), die wiederum phosphoryliert MLC führt zu Aktin-Myosin-vermittelte Kontraktion 8. Allerdings ist die Sensitivität dieses Weges zu Ca <sup&gt; 2 + kann durch die MLC-Phosphatase (MLKP) 9 geregelt werden. MLCP Aktivität wird durch Rho-Kinase (ROCK) und der Myosin-Phosphatase-Inhibitors Protein CPI-17 geregelt. Hier stellen wir eine Methode, um Veränderungen in auszuwerten [Ca 2 +] i im Laufe der Zeit in isolierten, perfundierten Lymphbahnen um Ca 2 +-abhängige und Ca 2 +-sensibilisierende Mechanismen des lymphatischen Kontraktion der glatten Muskulatur zu studieren. Die Verwendung von isolierten Ratten mesenterialen sammeln Lymphbahnen wir untersucht stretch-induzierten Veränderungen in [Ca 2 +] i und kontraktile Aktivität. Die isolierten Lymph-Modell bietet den Vorteil, dass Druck, Durchfluss, und die chemische Zusammensetzung der Badlösung eng kontrolliert werden kann. [Ca 2 +] i wurde durch das Laden Lymphgefäße mit dem ratiometrisch, Ca 2 +-bindenden Farbstoff Fura-2 bestimmt. Diese Studien werden einen neuen Ansatz für die breitere Problem der Untersuchung der verschiedenen molekularen Mechanismen, die phasischen regulieren bietenKontraktionen im Vergleich Tonic Verengung in lymphatischen glatten Muskulatur.

Wir stellen eine Annäherung an die cytosolische Ca bewerten<sup&gt; 2 +</sup&gt; Konzentration in isolierten Lymphgefäße Ca-Studie<sup&gt; 2 +</sup&gt;-Abhängigen und Ca<sup&gt; 2 +</sup&gt; Sensibilisierend Mechanismen des lymphatischen Kontraktion der glatten Muskulatur.

Die Messung der cytosolischen Ca 2 + In Isolated Kontraktile Lymphgefäße

Lymphgefäße bilden ein multifunktionales Transportsystem, das die Flüssigkeitshomöostase aufrechterhält, Lipide in den zentralen Kreislauf transportiert und als ... fungiert.

Dieses experimentelle System untersucht, ob Veränderungen im intrazellulären Kalzium mit Veränderungen im kontraktilen Muster der Lymphgefäße in Zusammenhang stehen, die durch einen erhöhten luminalen Druck verursacht werden. Entfernen Sie zunächst ein kontraktil arbeitendes Lymphgefäß aus dem Rattenmesenterium und katheterisieren Sie es an beiden Enden, um den luminalen Druck präzise zu kontrollieren. Beladen Sie danach das Gefäß mit dem kalziumempfindlichen Farbstoff Fura-2-AM, der die Messung von Änderungen des zytosolischen Kalziums mittels Fluoreszenzmikroskopie mit alternierender Anregung bei 340 und 380 Nanometern ermöglicht.Registrieren Sie Änderungen des Lymphgefäße-Durchmessers und der zytosolischen Kalziumspiegel, während das Gefäß einem luminalen Druck ausgesetzt wird. Mit dem Schrittprotokoll wird außerdem der Lymphgefäße-Durchmesser aus den gewonnenen Zeitrafferaufnahmen bestimmt. Die Ergebnisse zeigen eine zeitliche Beziehung zwischen vorübergehenden Anstiegen des zytosolischen Kalziums und phasischen Kontraktionen der Lymphgefäße sowie eine Korrelation zwischen Kalziumspiegeln und myogener Konstriktion.Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden w

measurement-of-cytosolic-ca2-in-isolated-contractile-lymphatics

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Hier beschreiben wir die Isolierung von adulten Maus cardiomyoctyes mit einem Langendorff-Perfusion-System. Die resultierenden Zellen sind Ca2 +-tolerant, elektrisch Ruhe und kultiviert und mit Adeno-oder Lentiviren, um die Genexpression zu manipulieren transfiziert werden. Ihre Funktionalität kann auch mit dem MMSYS System und Patch-Clamp-Techniken analysiert werden.

Isolierung, Kultur, und funktionelle Charakterisierung der erwachsenen Maus Cardiomyoctyes

Murine linksventrikulären Papillarmuskeln können verwendet werden, um Herzkontraktilität in vitro untersucht werden. Dieser Artikel beschreibt im Detail die Isolierung und experimentelle Protokolle, um die Herzkontraktionseigenschaften zu studieren.

Kontraktilität Messungen auf isolierte Papillarmuskeln für die Untersuchung von Herz Inotropie bei Mäusen

Dieser Artikel beschreibt das detaillierte Protokoll und Anlagen für die duale optische Abbildung von Transmembranpotential (V m) und freie inner Retikulum (SR) notwendig Ca 2+ in der Langendorff-perfundierten Kaninchenherzen. Dieses Verfahren ermöglicht die direkte Beobachtung und Quantifizierung von V m und SR Ca 2+ Dynamik im intakten Herzens.

Optische Kartierung der Intra-Retikulum Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Und Transmembranpotential in der Langendorff-perfundierten Kaninchen Herz

Derzeit werden die meisten verfügbaren Kalziumindikatoren verwendet, um zytoplasmatische Kalziumtransienten als indirekte Maße für das aus dem sarkoplasmatischen Retikulum freigesetzte Kalzium in kultivierten glatten Muskelzellen zu quantifizieren. Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung eines spezifischen FRET-basierten Indikators, der die direkte Messung von Calciumsignalen innerhalb des sarkoplasmatischen Retikulumlumens ermöglicht.

Die Messung von Calcium Schwankungen innerhalb des Retikulum von kultivierten glatten Muskelzellen Mit FRET-basierten konfokale Imaging

Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll, das die Veränderungen der Myofilament-Ca2+-Empfindlichkeit während der Kontraktion in isolierten Herzmyozyten aus dem Rattenherz bewertet. Zusammen mit der kardialen Elektrophysiologie, den systolischen/diastolischen Zytosol-Ca2+-Spiegeln und der Kontraktion/Entspannung ist diese Messung unerlässlich, um die Mechanismen zu untermauern, die die kardiale Erregungs-Kontraktions-Kopplung bei gesunden und kranken Herzen vermitteln.

Beurteilung der myofilament Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Empfindlichkeit Basiswert Cardiac elektromechanischen Kopplung

Recycling von intrazellulären Calcium spielt eine entscheidende Rolle bei Regulierung der systolischen und diastolischen Funktion in Herzmuskelzellen. Hier beschreiben wir ein Protokoll zur sarkoplasmatischen Retikulum Ca2 + Reserve und diastolische Kalzium-Removal-Funktion in Herzmuskelzellen durch ein Calcium imaging-System zu bewerten.

Bewertung der sarkoplasmatischen Retikulum Calcium Reserve und intrazellulären diastolische Calcium Entfernung in isolierten ventrikulären Kardiomyozyten

Hier wird ein Protokoll zur Bewertung der kontraktilen Eigenschaften von gestreiften Muskelmyofibrils mit Nano-Newton-Auflösung vorgestellt. Das Protokoll verwendet ein Setup mit einer Interferometrie-basierten optischen Kraftsonde. Dieses Setup erzeugt Daten mit einem hohen Signal-Rausch-Verhältnis und ermöglicht die Beurteilung der kontraktilen Kinetik von Myofibrils.

Isolieren von Myofibrils von Skelettmuskelbiopsien und Bestimmung der Kontraktilenfunktion mit einem Nano-Newton Resolution Force Transducer

Mausmodelle ermöglichen es, Schlüsselmechanismen der Arrhythmogenese zu untersuchen. Zu diesem Zweck sind qualitativ hochwertige Kardiomyozyten notwendig, um Patch-Clamp-Messungen durchzuführen. In dieser Arbeit wird eine Methode zur Isolierung muriner atrialer und ventrikulärer Myozyten mittels retrograder enzymbasierter Langendorff-Perfusion beschrieben, die simultane Messungen von Calcium-Transienten und L-Typ-Calciumstrom ermöglicht.

Isolierung von hochwertigen atrialen und ventrikulären Myozyten der Maus für die simultane Messung von Ca2+ Transienten und L-Typ Calciumstrom

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Vorbereitung und Verwendung von präzise geschnittenen Lungenschnitten der Maus zur Beurteilung der Kontraktilität der Atemwege und der intrapulmonalen arteriellen glatten Muskulatur in einem nahezu in vivo Milieu.

Verwendung der präzisionsgeschnittenen Lungenscheibe zur Untersuchung der kontraktilen Regulation der Atemwege und der intrapulmonalen arteriellen glatten Muskulatur

Hier wird eine etablierte Methode beschrieben, um Kontraktilitäts- und Kalziummessungen in humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Kardiomyozyten unter Verwendung einer optischen Plattform durchzuführen. Diese Plattform ermöglicht es den Forschern, die Auswirkungen von Mutationen und die Reaktion auf verschiedene Reize schnell und reproduzierbar zu untersuchen.

Echtzeitmessungen von Kalzium- und Kontraktilitätsparametern in humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Kardiomyozyten

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur gleichzeitigen Messung von zytosolischem, freiem Calcium [Ca2+]i und Gefäßdurchmesser in kontrahierenden Lymphgefäßen in Echtzeit und zur Berechnung der absoluten Ca2+ -Konzentrationen sowie der Kontraktilitäts-/Rhythmizitätsparameter. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um Ca2+ und kontraktile Dynamik unter einer Vielzahl von experimentellen Bedingungen zu untersuchen.

Echtzeit-Auswertung der absoluten, zytosolischen, freien ca2+ und der entsprechenden Kontraktilität in isolierten, druckbeaufschlagten Lymphgefäßen

Lernen Sie die Messung zytosolischer Ca²⁺-Konzentrationen in isolierten kontraktilen Lymphgefäßen der Ratte mittels Fura-2-basierter Ratiometrie. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung der Beziehung zwischen intrazellulärem Calcium und lymphatischer Kontraktilität unter kontrollierten Druckbedingungen.

Die Messung der cytosolischen Ca^{2 +} In Isolated Kontraktile Lymphgefäße

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