Isolierung und Reinigung von Kinesin aus Drosophila Embryonen

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27. April 2012

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27. April 2012

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Dies ist ein Protokoll, um aktiv in voller Länge zu isolieren Kinesin aus Drosophila Embryonen für die Einzel-Molekül-biophysikalische Untersuchungen. Wir zeigen, wie man Embryonen zu sammeln, machen den Embryo-Lysat, und dann polymerisieren Mikrotubuli (MT). Kinesin ist durch Immobilisierung auf der MTS, Spinning Festlegung der Kinesin-MT-Komplexe, und dann die Freigabe der Kinesin aus dem MTS via ATP zusätzlich gereinigt.

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Kinesin-Aufreinigung

Chapters in this video

0:05

Titel

2:28

Vorbereitung der Fliegenbecher und Embryonensammlung

4:00

Embryonenhomogenisierung und Klärung

4:48

Mikrotubuli-Polymerisation, Kinesin-Bindung und differenzielle Sedimentation von Mikrotubuli und Kinesin

6:49

Repräsentative Ergebnisse der Kinesin-Reinigung

8:29

Fazit

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