Parasite Induced Genetisch Angetrieben Autoimmune Chagas-Herz-Krankheit in der Hähnchen-Modell

Die Krankheit von Cha ist der klinische Zustand, der auf chronische Infektionen mit dem Ate-Prot und Tno-Mausi folgt. Die Krankheit befällt das Herz von chronisch infizierten Personen mehrere Jahrzehnte nach Erwerb der Infektionen. Ein Modellsystem über verschiedene Reiche hinweg zeigt, dass Hühnereier für die Taz-Makrocruise-Infektionen permeabel sind.

Während der ersten Woche des Embryonalwachstums zeigen die Experimente, dass infektionsfreie Hühner, die das Parasiten-KA in ihre Genome aufnehmen, an Chagas-Herzkrankheit sterben; exzellente Haltung, Futter- und Wasserversorgung gewährleisten das Tierwohl. Die dreifache Masse, gute Schwimmformen werden aus der Gewebekultur gewonnen. Transillumination von Tio und Eiern, um deren Blasenkontrolle sichtbar zu machen.

Eiern wird keine para-Inokulation verabreicht. Kontroll-Eier erhalten eine Inokulation mit 10 Mikroliter Kulturmedium. Das Loch wird mit Klebeband versiegelt 100 virale FL Manie.

Brasiliens ist Profi-Meister. Ziegen impfen die Luftkammer von befruchteten Hühnereiern mit 100 viralen Einheiten und fangen Makrophagen in 10 Mikroliter Kalziummedium ab, wobei Ziegen die Luftkammer oder virtualisierte Hühnereier impfen. Die Eier werden bei 37 °C und 65 % Luftfeuchtigkeit für ein bis zwei Tage unter sanfter Rotation alle 30 Minuten inkubiert. Die Proben werden gleichermaßen aus renoso-makro-geimpften Eiern und aus Kontrollansätzen gewonnen.

Die Wangen wachsen bis ins Erwachsenenalter heran. Blutproben werden aus den Flügelvenen entnommen. Das Blut wird in konische 15-ml-Röhrchen überführt.

Monozytäre Zellen werden durch Zentrifugation über einen FICO-Gradienten gewonnen, wobei die weißen Blutzellen entfernt und die Trennung verworfen wird. Genomische DNA mittlerer Größe wird aus den monozytären Blutzellen isoliert. Die 1,5-ml-Konizentrifugenröhrchen werden gemäß dem PCR-Design in Res gepuffert. Die PCR wird durchgeführt, um chroinukleäre G-N-A-N-G-N-A und pls GNA kg NA zu amplifizieren. Nach Vorbereitung der Reaktionsansätze mit spezifischen Primer-Sets werden die Röhrchen in den Thermocycler eingelegt und der Lauf gestartet.

Nehmen Sie die Röhrchen vom Thermocycler zurück. Analysieren Sie die PCR-Produkte. Die PCR-Produkte werden durch Agarose-Gelelektrophorese getrennt.

Die GNA-Banden im Gel werden auf eine positiv geladene Nylonmembran übertragen. Die Hybridisierung erfolgt mit einer spezifischen, radioaktiv markierten Sonde, um die unabhängigen Rollen der Parasitenpersistenz und der Immunität separat zu analysieren. Bei der Pathogenese der Chagas-Krankheit verwenden wir ein Hühnchenmodell, das gegenüber der TNO-Cruise-Infektion resistent ist, mit Ausnahme der frühen embryonalen Entwicklung vor der Ausbildung des Immunsystems. Die Küken, die aus mit TNO Cruise infizierten Eiern hervorgegangen sind, sind infektionsfrei, doch das mitochondriale A KG A des Parasiten bleibt im Körper erhalten.

Nur Hühner, die aus mit tzo-Makro-inokulierten Eiern geschlüpft sind, zeigen kg-Banden, wobei keine DNA im Hühnchengenom vorhanden ist. Küken, die aus mit pro-Master-Ziegen von Leia Brazilian ex-inokulierten Eiern geschlüpft sind, behalten die mitochondriale In-Kreis-Sequenzen nicht in ihren Genomen. Lane eins: leer; Lane zwei: Kontroll-GNA; Lanes drei und vier: Mock-GS; Lanes fünf bis 14: GS von tschechischem Hatcher aus Las-Mania-Brazilians, infizierte Eier.

Lane 15 zeigt ein Mania-Brazil-Amplicon im Format eines 750 Basenpaare langen Bandes, das mit den spezifischen kDNA-Primer-Sets LB drei und LB fünf erhalten wurde. Die L-PCR-A-Checkerboard-Analyse zeigt die Gallus-guns-Primer, die nach drei Amplifikationszyklen mit schrittweise steigender Temperatur im Walking-Nest eingesetzt wurden. Die PCR erfolgte mit verschiedenen kDNA-Primer-Sets.

Der Louis-Stringenzzyklus erzeugt Bedingungen für Primerbindung und hohe Stringenz. Er erhöht die Spezifität der Amplifikationsprodukte. Die PCR-Produkte mit geringerer Amplifikation, die mit der KA-Sonde hybridisierten, wurden kommerziell kloniert und sequenziert.

Die Sequenz zeigt die kg NA im Kreis blaue intermediäre mikrohomo­logische Rekombinationsstelle gelb und das gallo ga GNA grün. Die Kartierung der kg NA, die in das Hühnchengenom integriert ist, erfolgt mittels einer gezielten Primer-PCR-RTP-Therapie-PCR-Technik. Die Cajun-mutierten erwachsenen Hühner entwickelten eine Chagas-Herzkrankheit.

Je mehr Kontrollen zu einem gesunden Leben heranwachsen. Die KDNA-mutierten Hühner zeigen eine vergrößerte Herzsilhouette auf Röntgenaufnahmen. Die Sektion ergibt, dass kontrollierte Hühner eine geringere Herztgröße aufweisen.

Der Cajun, ein mutiertes Huhn, zeigt Hydroperikard, Hydrotox und ein großes Herz. Die Kardiomegalie ähnelt der bei der Chagas-Herzkrankheit. Das mit dem Moog gesteuerte Hühnerherz zeigt eine normale Histologie.

Das kg eines mutierten Huhns zeigt einen Tunnel, der vom zytotoxischen Lymphozyten im Myokard gebildet wurde und die Herzmuskelfasern umgibt. Die Sequenzen aviärer circulärer Elemente, die in kodierende Regionen mehrerer Chromosomen integrieren, werden mittels modifizierter nested-PCR offengelegt, die kg-NA-Primer mit wirtsspezifischen GNA-Primer-Sets kombiniert. GNA-mutierte Hühner sterben an Herzversagen und weisen eine Kardiomegalie auf.

Die mikroskopische Pathologie zeigt eine Myokarditis, die der Chagas-Myokarditis ähnelt und die ins Herz übersetzt. Bei Kilogramm NA mutierten Hühnern handelt es sich um eine genetisch bedingte Erkrankung. Dies ist das erste Mal, dass klinische und pathologische Erscheinungsformen der Chagas-Krankheit in einem sauberen, quer über Reiche hinweg reichenden Modellsystem reproduziert wurden.

Vielen Dank.