Endothelial Cell Co-Kultur Vermittelt Reifung von humanen embryonalen Stammzellen zu Pankreas-Insulin-produzierenden Zellen in einer gerichteten Differenzierung Ansatz

Dieses Protokoll stellt die mehrstufige Differenzierung menschlicher embryonaler Stammzellen als effektiven Ansatz für insulinproduzierende Zellen dar, wobei eine bessere Ausbeute als zuvor entwickelte Protokolle zunächst ein endgültiges Endoderm mit einem aktiven in einem und PI drei K-Inhibitoren induziert wird. Um die Induktion von Vorläuferzellen der Bauchspeicheldrüse zu fördern, setzen Sie die Zellen Topamin A und Retinsäure aus. Als nächstes Co-Kultur mit Endothelzellen, um die Reifung von Vorläuferzellen der Bauchspeicheldrüse zu insulinexprimierenden Zellen zu vermitteln.

Fahren Sie mit funktionellen Analysen durch Immunfluoreszenzmikroskopie und QPCR fort, um die Expression der C-Peptid- und Insulin-Hochregulation zu demonstrieren. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden, wie z.B. nicht, besteht darin, dass diese Methode zu einer höheren Hochregulierung von Insulin sowie zu einer höheren Ausbeute an cpep führt, die Zellen exprimieren. H eine menschliche embryonale Stammzellkolonie mit einer Größe zwischen einem und 1,5 Millimetern Durchmesser an die Zellen CO bis 12.