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Vorbereitung der akuten Subventrikulärzone Slices für Calcium Imaging
Vorbereitung der akuten Subventrikulärzone Slices für Calcium Imaging
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JoVE Journal Neuroscience
Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

Vorbereitung der akuten Subventrikulärzone Slices für Calcium Imaging

Full Text
13,768 Views
09:10 min
September 19, 2012

DOI: 10.3791/4071-v

Benjamin Lacar1, Stephanie Z. Young1, Jean-Claude Platel1, Angélique Bordey1

1Department of Neurosurgery and Cellular & Molecular Physiology,Yale University School of Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Eine Methode zur subventrikulären Zone (SVZ) Zellen mit Calcium-Indikator Farbstoffe für die Aufnahme Calciumaktivität laden beschrieben. Die postnatale SVZ enthält dicht gepackten Zellen, einschließlich neuralen Vorläuferzellen und Neuroblasten. Anstatt Badbelastung injizierten wir den Farbstoff durch Druck im Inneren des Gewebes eine bessere Farbstoffdiffusion.

Ziel dieses Verfahrens ist es, die Kalziumaktivität von Zellen in der postnatalen subventrikulären Zone abzubilden. Dies wird erreicht, indem zunächst vorsichtig Hirngewebe von einer postnatalen Maus entfernt wird. Der zweite Schritt besteht darin, lebende akute Hirnschnitte zu machen, die die subventrikuläre Zone enthalten.

Als nächstes werden die Gehirnschnitte mit einem kalziumempfindlichen Farbstoff beladen. Der letzte Schritt besteht darin, die Aktivität mit einem konfokalen Zeitraffermikroskop abzubilden. Letztendlich wird die Zeitrafferbildgebung der Kalziumaktivität in ventrikulären Zonenzellen verwendet, um die Dynamik der interzellulären Aktivität zu zeigen und Kommunikationsmuster zwischen verschiedenen Zelltypen und dem Gefäßsystem aufzudecken.

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