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DOI: 10.3791/4230-v
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Ein einfaches Protokoll zur Herstellung von menschlichem Gewebe-Extrakten, die als Quelle von Antigenen in funktioneller T-Zell-Assays verwendet werden beschrieben. Diese Methode ermöglicht es T-Zellen-Reaktionen auf Gewebe stammenden Antigenen zu messenden
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, einen Gewebeextrakt herzustellen, der mit funktionellen immunologischen Assays kompatibel ist. Dies wird erreicht, indem zunächst eine Probe des interessierenden Gewebes entnommen wird. Als nächstes homogenisieren Sie die Gewebeprobe in einer Mischung aus Butanol, Aceto, Nitril und Wasser oder BAW.
Nach der Bestimmung der Proteinkonzentration wird der Extrakt zugeteilt und lyophilisiert, um Lösungsmittel zu entfernen. Letztendlich wird der rekonstituierte Extrakt als Antigenquelle in humanen T-Zell-Proliferations- oder Zytokinsekretionsassays verwendet. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden wie der Detergenzienlyse besteht darin, dass der Deserting-Extrakt frei von giftigen Lösungsmitteln und Reinigungsmitteln ist.
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