Name: Vorbereitung und Pathogeninaktivierung von Double Dose Buffy Coat Platelet Produkte, die INTERCEPT Blood System (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-12-07T11:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Lernen Sie die Herstellung von doppelten Buffy-Coat-Thrombozytenkonzentraten mit dem INTERCEPT-Blutsystem zur Pathogeninaktivierung. Diese Methode gewährleistet sichere Blutprodukte für die Transfusionsmedizin.

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Finanzierung für die Veröffentlichung von Cerus Corp, Hersteller des INTERCEPT Blood System zur Verfügung gestellt.

Ein. Vollblutspende <ol><li> Vollblut von freiwilligen Spendern in 450 ml oben / unten Kollektion setzt nach den örtlichen Blutentnahme Richtlinien. </li><li> Das Vollblut für mindestens 2 Stunden auf einer Kühlplatte vor der Zentrifugation und Abtrennung gespeichert. </li></ol> 2. Buffy Coat Vorbereitung <ol><li> Zentrifuge das Vollblut mit einem harten Spin um das Blut in drei Schichten trennt: rote Blutkörperchen, Leukozytenfilm und Plasma. Zentrifuge verwendeten Parameter waren 4880 RCF für 11 min bei 22 ± 2 ° C. </li><li> Verwenden eines automatisierten Bluttrenneinheit um das Plasma in den oberen Satellitenbeutel und die roten Blutkörperchen (RBC) in den unteren Satellitenbeutel ausdrücken, so dass der Leukozytenmanschette in dem Sammelbehälter. Ziel bedeuten, Volumen und Hämatokrit Bereiche für buffy coats ca. 48 ml und 37%, bzw. sind. </li><li> Die Buffy-Coats werden über Nacht auf einem Plättchen Rührwerk bei 22 ± 2 ° C gelagert </li></ol><ol><li> Sterile connect 7 buffy coats und 300 ml SSP + Plättchen-Additiv-Lösung (PAS) in einem Zug Konfiguration mit parallelen Linien zur Verringerung der Zuglänge, die PAS sollte an der Spitze des Zuges. Klemmen Sie die Leitung zwischen dem PAS und der ersten Buffy-Coat. </li><li> Öffnen die sterile Verbindung zwischen den Leukozytenfilm Einheiten und damit das buffy coats, in den letzten Behälter abzulassen. </li><li> Öffnen Sie die Schweißnaht und die Klammer zwischen der PAS und der ersten Buffy-Coat. Erlauben einem Drittel des Additivs Lösung durch jedes der Leukozytenmanschette Behälter nacheinander zu spülen. 2 weitere Male wiederholen, wobei jedes Mal eine Hälfte des verbleibenden PAS. </li><li> Die durchschnittliche Leukozytenfilm Pool Volumen sollte ca. 600 ml sein. Wenn das Zielvolumen und Hämatokrit der einzelnen buffy coats erfüllt sind, wird die Plasma-Verhältnis um 32 - 47% für die INTERCEPT Pathogeninaktivierung Behandlung später im Prozess erforderlich. </li><li> Entsorgen Sie die leere SSP + und buffyMantel Behältern. </li><li> Für eine optimale Plättchenregenerationsrate, halten den Pool auf dem Rührwerk für 1 Stunde vor dem Zentrifugieren. </li><li> Sterile Verbindung ein Plättchen Vorratsbehälter mit integriertem Leukoreduktionsfilter der Buffy-Coat-Pool. </li><li> Durchführen einer &quot;soft spin&quot; der Leukozytenmanschette-Pool, um die roten Blutkörperchen von den Plättchen in Suspension (462 RCF für 9 min, 20 sec) zu trennen. Hilfestellung Blutplättchensuspension Verwendung eines automatisierten Bluttrenneinheit durch die Leukoreduktionsfilter in die Blutplättchen Vorratsbehälter. </li><li> Die zuvor beschriebenen Anforderungen an die Verarbeitung sicherzustellen, dass der Plättchensuspension dem Zwischenverarbeitungsuntersystem Spezifikationen von 300 ml entspricht - 420 ml Volumen, 2,5 bis 7,0 x 10 11 Blutplättchen Dosis und ≤ 4 x 10 6 / ml Erythrozyten. </li></ol> 4. INTERCEPT-Behandlung <ol><li> Führen Sie die INTERCEPT Behandlung vor dem Ende von Tag 1 nach der Entnahme (Tag 0 ist der Tag der Sammlung). </li><li> Packen Sie das INTERCEPT Verarbeitung Setmit Dual Storage Containers aus dem klaren Plastikbeutel. </li><li> Sterile verbinden Blutplättchensuspension Behälter zu dem Rohr des Behälters auf der Amotosalen INTERCEPT Verarbeitungssatzes. </li><li> Beschriften Sie die INTERCEPT Verarbeitungssatzes Lagerbehälter mit dem entsprechenden Blutprodukt Identifizierung nach lokalen Anforderungen. </li><li> Hängen Sie die Blutplättchen und brechen zuerst die unteren Kanüle auf dem Amotosalen Behälter, so dass die Amotosalen Lösung fließen in die Beleuchtung Behälter. Break the top Kanüle auf dem Amotosalen Behälter so dass die Blutplättchen durch die Amotosalen Behälter in der Beleuchtung Behälter fließen. </li><li> Vorsichtig mischen und die Blutplättchen Amotosalen Gemischs und exprimieren die Luft aus dem Behälter in die Ausleuchtung Amotosalen Behälters. </li><li> Ausdrücken eine kleine Menge der Blutplättchen Mischung in den Schlauch, Füllen etwa 4 cm von den Schläuchen. Dadurch wird sichergestellt, Thrombozyten sowohl in der Schlauch-und Beleuchtungs-Behälter durchlaufen den Erreger inactivatiauf die Behandlung. </li><li> Verschließen Sie den Schlauch zwischen der Beleuchtung Behälter und Amotosalen Behälter. Hinterlegen nicht mehr als etwa 4 cm von Schläuchen, die sich von der Beleuchtungsvorrichtung Behälters. Entfernen und entsorgen Sie die leere Blutplättchen und Amotosalen Behälter und schließen Sie die Klemmen auf die Probenahme Beutel. </li><li> Platzieren Sie die Verarbeitungssatz in den Illuminator mit dem Beleuchtungssystem Behälters in dem großen Fach auf der linken und der Organisator in der kleineren Kammer auf der rechten Seite. </li><li> Mit dem Hand-held Barcode-Gerät, um die Spende ID, Produkt-Code und-verarbeitung Satz Losnummer in den Illuminator geben. Schließen Sie die Metallabdeckung und wenn sie auf dem Illuminator grafische Benutzeroberfläche aufgefordert, schließen Sie die Schublade. Drücken Sie auf &quot;Start&quot;, um die Beleuchtung zu starten. </li><li> Nach der Belichtung, entfernen Sie die Verarbeitung Satz von der Beleuchtungseinrichtung. Der Illuminator druckt automatisch die Behandlung Bericht für die behandelten Thrombozyten Einheit (en). </li><li> Packen Sie die Behälter von dem Veranstalter und hängen Sie die platelets und Verarbeitungssatzes, brechen die Kanüle an dem Auslass des Beleuchtungssystems Behälters und damit die Thrombozyten in die Verbindung Adsorptionsvorrichtung (CAD) Behälter fließen. </li><li> Dabei nicht um den CAD Wafer biegen, exprimieren die Luft aus dem Behälter in den CAD Ausleuchtung Behälter unter Verwendung eines Plasma-Extraktor. </li><li> Abzudichten den Schlauch in der Nähe der Einlaßöffnung des Behälters CAD. Entfernen und entsorgen Sie die leere Beleuchtung Behälter. </li><li> Legen Sie die CAD-Container mit den Attached Storage Container auf einem Plättchen Rührwerk für mindestens 6 h, aber nicht mehr als 16 Stunden. Dies wird im Abbau der Rest Amotosalen auf eine Konzentration von ≤ 2 uM führen. </li><li> Nach CAD Behandlung, entfernen Sie die Thrombozyten-Einheiten aus dem Rührwerk. Hängen Sie die Blutplättchen. Brechen die Kanüle und damit Blutplättchen, um in die Lagerbehälter fließen kann. </li><li> Exprimieren die Luft aus den Vorratsbehältern in den CAD-Container. Das verbliebene Plättchenkonzentrat fließen wieder in den Vorratsbehältern durchSchwerkraft. Verschließen Sie den Schlauch über dem Y-Stück und die leere CAD Behälter. </li><li> Umzuverteilen das Volumen zwischen den Vorratsbehältern nach Bedarf. Lautstärkeeinstellungen werden durch Wägung der Vorratsbehälter gemacht. Dichten den Schlauch an jedem Vorratsbehälter wenige Zentimeter über dem Einlass des Vorratsbehälters, dies erleichtert den Erhalt einer sterilen Probe aus dem Endprodukt, wie in 5.2 beschrieben. </li></ol> 5. Produkt-Sampling <ol><li> Für Routine-QC-Tests können die Endlagerung Containern nach den Probenahme-Beutel auf den Vorratsbehältern abgetastet werden. Um dies zu tun, sicherzustellen, dass die Blutplättchen Gerät ist gut gemischt, dann öffnen Sie die Klemme an dem Beutel und drücken Sie mehrere Male. Verschließen Sie den Schlauch nach der Beutel mit Thrombozyten gefüllt. Übertragen Sie die Thrombozyten Probe in einem geeigneten Labor Rohr und führen Tests sofort. </li><li> Um Proben zu verschiedenen Zeitpunkten erhalten im Laufe der Lagerung, wie etwa für eine Validierungsstudie, sterile Verbindungein neuer Probenbehälter auf das Rohr des Plättchens Vorratsbehälter. Sicherstellen, dass die Blutplättchen sind gut vor dem Probenbehälter übertragen gemischt. </li></ol> 6. In vitro Funktion Auswertung <ol><li> Aus diesem Validierungsstudie wurde in vitro Evaluierung nach CAD-Behandlung (Tag 1 oder Tag 2, je nach CAD Dauer) und erneut am Tag 4 durchgeführt (oder Tag 5) und Tag 7. In-vitro-Messungen enthalten Volumen, Thrombozytenzahl, pH, Blutgasanalyse (pO 2, pCO 2), Glukose, Laktat und Schwenken. </li><li> Das Volumen wurde mit 1,01 Gew. g / ml auf der spezifischen Dichte von Blutplättchen in Additiv-Lösung bestimmt. </li><li> Hämoglobin Kontamination wurde visuell mit Vergleich zu einer Farbkarte ausgewertet. </li><li> Swirling wurde visuell bestimmt. </li><li> Siehe &quot;Tabelle der Ausrüstung&quot; für Methodik der anderen Assays. </li></ol> 7. Repräsentative Ergebnisse Das Verfahren zur Herstellung double Dosis Leukozytenfilm Plättchen beginnt mit der Produktion von individuellen Buffy Coats, die Zielvorgaben zu erfüllen für Volumen-und Hämatokrit. Da es nicht sinnvoll, den Hämatokrit des einzelnen Buffy Coats während der letzten Prozessvalidierung zu messen, haben wir begonnen, indem sie sich verpflichten eine separate bemüht, unsere Buffy Coats zu optimieren, um sicherzustellen, könnten wir konsequent erfüllen Zielvolumen und Hämatokrit. Wie in Tabelle 1 gezeigt, der optimierten buffy coats positiv auf die Zielwerte für die Menge und den Hämatokrit bei 46 ± 2 ml und 37 ± 3%, jeweils verglichen. Nach Bündelung, sollte die Menge und Hämatokrit des Leukozytenmanschette Pool etwa 600 ml und 20% liegen, jeweils vor dem weichen Spin Zentrifugation. Wie in Tabelle 2 dargestellt, gemittelt unserer Leukozytenmanschette Pools 615 ± 5 ml; der Hämatokrit durchschnittlich 19 ± 1%. Die weichen spin Ergebnisse in einer doppelten Dosis Thrombozyten concentrate, dass der Eingang für Pathogeninaktivierung Nutzung des INTERCEPT Blood System DS Verarbeitungssatzes gerecht wird. Key Eingabeparameter für INTERCEPT Behandlung gehören Lautstärke, Thrombozytenzahl, Plasma-Verhältnis und RBC Inhalt. Darüber hinaus streben wir an, ≥ 75% der Thrombozyten im Thrombozytenkonzentrat erholen, wie der Buffy-Coat-Pool verglichen. Per lokalen Anforderungen, muss der weißen Blutkörperchen (WBC) Verschmutzung &lt;1x10 6 / Einheit. Die Thrombozytenkonzentrate in unserem Validierung erfüllt die wichtigsten Parameter für INTERCEPT Behandlung sowie die Ziele für WBC Verschmutzung und Plättchenregenerationsrate wie in Tabelle 3 dargestellt. Das INTERCEPT Verfahren zur Pathogeninaktivierung basiert auf der doppelten Dosis Thrombozytenkonzentrat mit einer einzigen INTERCEPT Verarbeitungssatzes durchgeführt. Die Verarbeitung enthält zwei integralen Vorratsbehälter, die der behandelten Einheit in zwei einzelne therapeutische Dosen Blutplättchen bei Beendigung des Weges aufgeteilt werden könnenogen Inaktivierung. Europäische Richtlinien verlangen, dass 75% der getesteten Einheiten ≥ 200x10 9 Blutplättchen enthalten pro therapeutischen Dose1; lokalen Anforderungen in Schweden verlangen, dass 75% der Anteile geprüft&gt; enthalten 240x10 9 Thrombozyten pro Dosis. Nach INTERCEPT Behandlung betrug die durchschnittliche Thrombozytengehalt 265 ± 22 x 10 9 (n = 24). Außerdem trafen 88% der Anteile oder überschritten 240x10 9 Thrombozyten pro therapeutischen Dosis, dies ist auch im Rahmen der beiden europäischen Richtlinien und schwedischen Vorschriften. Siehe Abb. 1 &amp; 2 für eine Darstellung der doppelte Dosis Leukozytenfilm Vorbereitung und INTERCEPT Behandlungsverfahren sind. Aus diesem Validierung, maßen wir die in vitro-Eigenschaften der Thrombozytenkonzentrate nach INTERCEPT Behandlung (dh nach der Trennung in die einzelnen Vorratsbehältern); Parameter wurden über 7 Tagen Lagerung gemessen. Mittelwert und Standardabweichung wurden gesammeltBlutplättchen-Dosis, pH, pO 2, pCO 2, Lactat und Glucose Produktion Verbrauch. Abbildung 3 zeigt die mittlere beginnend Blutplättchen Dosis der doppelten Dosis Plättchenkonzentrat vor INTERCEPT Behandlung und dem mittleren Plättchen-Dosis in jeder der Spaltprodukte nach der Behandlung über INTERCEPT 7 Tagen Lagerung. Platelet Verlust während der Lagerung betrug etwa 9%. Diese Reduktion ist nicht verschieden von den erwarteten Verlust von Thrombozyten während der Lagerung von konventionellen Thrombozyten. 2 Tabelle 4 fasst die in vitro Eigenschaften der INTERCEPT Blutplättchen nach der Behandlung und Aufteilen in einzelne Einheiten. Per europäischen Anforderungen, muss der pH-Wert der Blutplättchen über 6,4 bis zum Ende der Haltbarkeitsdauer bleiben. Während der Verarbeitung, Konzentrate der pH der Thrombozyten fällt leicht auf der Blutplättchenkonzentration, Volumen und die Gasdurchlässigkeit der Blutplättchen basiert stoWut Behälters. 4 stellt den pH-Wert der geteilten Thrombozytenprodukten über 7 Tagen Lagerung. Während der Lagerung, ist der pH-Wert stabil und gut innerhalb der Verarbeitungsanforderungen aufrechterhalten. Wie in 5A und 5B, der Thrombozyten-O 2-Verbrauch und die CO 2-Produktion zeigen an, setzte die Atmung durch die INTERCEPT Blutplättchen im PL2410 Behälter während 7 Tagen Lagerung. 6A und 6B zeigen die Laktat und Glukose über 7 Tagen Lagerung . Blutplättchen-Glucose und Lactatproduktion stimmen miteinander während der 7-tägiger Lagerung. 5 Einheiten hatten Glukosespiegel weniger als 1,11 mmol / l (die Untergrenze für das Glucose-Assay). Der Buffy-Coat-Zubereitung und Bündelung Validierung produziert Thrombozytenkonzentrate, dass trafen die Eingangs-Kriterien für INTERCEPT Behandlung; speziell, Volumen, Thrombozytenzahl, Plasma-Verhältnis und rot blood Zellkontamination. Die letzten Einheiten erfüllt die Prüfkriterien über 7 Tage der Lagerung einschließlich Thrombozyten Dosis und pH-Wert. <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Target Range </td><td> Ergebnisse Mittelwert ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> ~ 48 </td><td> 46 ± 2 </td></tr><tr><td> Hämatokrit (%) </td><td> ~ 37 </td><td> 37 ± 3 </td></tr><tr><td> Halten Sie Zeit vor Pooling </td><td> Übernachtung auf Rührwerk </td><td> Übernachtung auf Rührwerk </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Merkmale der einzelnen Buffy Coats (n = 19). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Target Range </td><td> Ergebnisse Mittelwert ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> ~ 600 </td><td> 615 ± 5 </td></tr><tr><td> Hematocrit (%) </td><td> ~ 20 </td><td> 19 ± 1 </td></tr><tr><td> Haltezeit vor der Zentrifugation </td><td> 1 h auf Rührwerk </td><td> 1 h auf Rührwerk </td></tr></tbody></table> Tabelle 2. Merkmale der Buffy Coat Pools (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td> Parameter </td><td> Ziel </td><td> Ergebnisse Mittelwert ± SD </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> 370 bis 420 </td><td> 404 ± 8 </td></tr><tr><td> Thrombozytenzahl (x10 9 / Einheit) </td><td> 250 bis 700 </td><td> 577 ± 62 </td></tr><tr><td> Mittlere Platelet Recovery (%) </td><td> ≥ 75 </td><td> 75 ± 4 </td></tr><tr><td> Plasma-Ratio (%) </td><td> 32 bis 47 </td><td> 38 ± 1 </td></tr><tr><td> RBC (x10 6 / ml) </td><td> ≤ 4 </td><td> 1,2 ± 0,4 </td></tr><tr><td> WBC (x10 6 </sup&gt; / Einheit) </td><td> ≤ 1 </td><td> 0,11 ± 0,1 </td></tr><tr><td> Halten Sie Zeit vor INTERCEPT (hr) </td><td> ≤ Ende von Tag 1 </td><td> ≤ Ende von Tag 1 </td></tr></tbody></table> Tabelle 3. Merkmale des Double-Dose Thrombozytenkonzentraten (n = 12). <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Mittelwert ± Standardabweichung </td><td> Min </td><td> Max </td></tr><tr><td> Volumen (ml) </td><td> 199 ± 16 </td><td> 182 </td><td> 236 </td></tr><tr><td> Thrombozytenzahl (x10 9 / Einheit) </td><td> 265 ± 22 </td><td> 225 </td><td> 292 </td></tr><tr><td> pH (22 ° C) </td><td> 6,9 ± 0,1 </td><td> 6,8 </td><td> 7,0 </td></tr><tr><td> pO 2 (kPa) </td><td> 21,4 ± 4,8 </td><td> 12,8 </td><td> 27,3 </td></tr><tr><td> pCO 2 (kPa) </td><td> 4,3 &amp; plusmn; 0,4 </td><td> 3,3 </td><td> 4,9 </td></tr><tr><td> Lactat (mmol / l) </td><td> 9,1 ± 1,7 </td><td> 6,8 </td><td> 12,4 </td></tr><tr><td> Glucose (mmol / l) </td><td> 5,3 ± 0,9 </td><td> 3,7 </td><td> 6,5 </td></tr></tbody></table> Tabelle 4. Merkmale des INTERCEPT behandelte Thrombozyten Day 1/2 (Einzel-Units, n = 24). <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig1.jpg" /> Abbildung 1. Herstellung einer doppelten Dosis Thrombozytenkonzentrat aus einem Pool von 7 buffy coats. <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig2.jpg" /> Abbildung 2. Pathogeninaktivierung einer doppelten Dosis Thrombozytenkonzentrat mit dem INTERCEPT Blood System. <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig3.jpg" /> Abbildung 3. Mittlere Blutplättchen Dosis vor und für7 Tage nach INTERCEPT-Behandlung (n = 12 vor INTERCEPT; n = 24 nach INTERCEPT). <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig4.jpg" /> Abbildung 4. Mittelwert ± SD pH Blutplättchen nach INTERCEPT Behandlung (n = 24). <img alt="5A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5a.jpg" /> 5A. Mittelwert ± SD pO 2 nach INTERCEPT Behandlung (n = 24). <img alt="5B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig5b.jpg" /> 5B. Mittlere pO 2 ± SD nach INTERCEPT-Behandlung (n = 24). <img alt="6A" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6a.jpg" /> 6A. Mittlere Laktatwerte ± SD nach INTERCEPT-Behandlung (n = 24). <img alt="6B" src="/files/ftp_upload/4414/4414fig6b.jpg" /> 6B. Mittlere Blutzuckerwerte &amp;plusmn; SD nach INTERCEPT-Behandlung (n = 24).

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Buffy coat Thrombozyten erfordern mehrere Verarbeitungsschritte, die sich in der Post-Inkassokosten, einschliesslich Personal Zeit, Verbrauchsmaterialien, Geräten und Abfällen, die faktorisiert werden muss in die Gesamtkosten der Herstellung der Thrombozyten-Einheiten. Verbesserung der Plättchenausbeute voneinander Leukozytenmanschette (über die Optimierung der Leukozytenmanschette Volumen und Hämatokrit) erlaubt die Herstellung einer doppelten Dosis Leukozytenmanschette Blutplättchen Einheit aus einem Pool von sieben Buffy Coats. Wenn diese Optimierung durchgeführt wird, benötigt die Anzahl der Buffy Coats, um eine feste Anzahl von Blutplättchen Dosen produzieren kann reduziert werden, wodurch die Gesamtauslastung des Buffy Coats und ermöglicht die Produktion von zusätzlichen Thrombozytenkonzentrate (PCs). Personalzeiterfassung sowie Verbrauchsmaterialien und Geräte Kosten wie Bündelung Sets, Thrombozyten Additiv-Lösung, sterile Verbindung Wafer-, Filter-Sets, und Zentrifugation Verfahren um bis zu 50% reduziert. Neben der Optimierung Thrombozyten Produktion und die Reduzierung damit verbundenen Kosten, this Pooling Verfahren können ein Plättchenkonzentrat (PC), die die Eingabe Anforderung für die Verwendung mit dem Vorratsbehälter INTERCEPT dualen Verarbeitungssatz erfüllt, so dass wir in unseren verbesserten Schutz Transfusionsempfängern sowie bereitzustellen. Das INTERCEPT Blood System für Pathogeninaktivierung verwendet Amotosalen und UV-A (UVA) Licht kovalent vernetzen DNA und RNA und verhindert Nucleinsäurereplikation und Rendering Krankheitserreger nicht eine Krankheit verursachen. 3 Es effektiv inaktiviert ein breites Spektrum von Krankheitserregern wie Viren, Bakterien , Parasiten und verunreinigen Spender weißen Blutkörperchen. 4-6 INTERCEPT bietet eine Alternative zu den aktuellen Tests Paradigma für auftauchende Krankheitserreger, die in der Vergangenheit eine wesentliche Verzögerung, während ein neuer Test entwickelt und letztendlich erfordert eine erhebliche finanzielle Investition zu realisieren, wenn ein Test zur Verfügung stehen. 7,8 Es kann auch eine Alternative redundante Sicherheitssysteme Messres wie bakterielle Detektion 9 und Gamma-Bestrahlung. 10-12 Darüber hinaus ermöglicht INTERCEPT uns doppelte Dosis Thrombozyteneinheiten behandeln welche Vorteile unsere Effizienz in der Produktion und hilft uns, unsere Budgets einzuhalten. INTERCEPT und die doppelte Dosis Leukozytenmanschette Verfahren kann auf eine Vielzahl von Blut entfernt Workflows angepasst werden. Als Beispiele kann Vollblut Sammlungen auf 500 ml erhöht werden; Sammlungen könnte auch über Nacht bei 22 ° C gelagert werden, vor der Trennung. Darüber hinaus ist eine alternative Leukozytenmanschette Pooling Verfahren möglich (z. B. eine Krake Verfahren statt einer Zug-Methode) und / oder eine automatische Vorrichtung (zB TACSI) kann für die zweite Zentrifugation und Abtrennung der Blutplättchensuspension von den restlichen Erythrozyten verwendet werden . Wenn erhöhte Thrombozytengehalt benötigt wird, sind mehrere Techniken verfügbar, einschließlich Vorauswahl von Spendern auf Thrombozytenzahl, Nacht-Inkubation des Vollblutes, einstellbar basierendtment Zentrifugation Einstellungen oder die Verwendung eines Pools von 8 buffy coats anstelle von 7. Aufgrund der Beschränkung der gegenwärtig verfügbaren Pooling setzt und die Kapazität der Zentrifugenbehälter sollte das Gesamtvolumen der Leukozytenmanschette Pool etwa 600 ml betragen. Die Zentrifugation und Einstellungen in diesem Protokoll beschriebenen wurden optimiert, um Produkt, das INTERCEPT Parameter erfüllt für einen Pool von 7 buffy coats ergeben. Die Zentrifugation Einstellungen müssen geändert werden, wenn die Zahl der Buffy Coats im Pool wird geändert werden. In einigen Ländern ist die minimale Thrombozyten höhere Dosis und die QC-Anforderungen sind strenger als in Schweden. Als solches kann unsere Ergebnisse nicht universell anwendbar. In diesen Ländern wird die doppelte Dosis PC vor INTERCEPT Behandlung benötigen, um eine größere Anzahl von Blutplättchen enthalten, um lokale Anforderungen nach INTERCEPT Behandlung und Split zu erfüllen. Da die maximale Thrombozytengehalt und Behandlung Volumen for INTERCEPT sind 7x10 11 Blutplättchen und 420 ml, wird der Anteil an Einheiten, die dem Zwischenverarbeitungsuntersystem zu übertreffen und bei zu geringer Gehalt an Blutplättchen in zwei therapeutischen Dosen aufgeteilt werden, abhängig von Faktoren wie der lokalen Voraussetzungen für die Blutplättchen-Dosis, QC Kriterien, Buffy-Coat-Optimierung Ergebnisse und Produktion Stabilität. Wenn eine doppelte Dosis PC übertrifft die INTERCEPT Anforderungen an die Verarbeitung, kann es manuell eingestellt werden, um die Anforderungen zu erfüllen und anschließend behandelt. In den wenigen Gelegenheiten, bei denen die 7-Buffy-Coat-Pool liefert unzureichende Thrombozyten für eine doppelte Dosis Produkt nach INTERCEPT, wählen wir nicht die INTERCEPT Behandlung durchzuführen. Alternativ können andere Blutzentren entscheiden, den PC mit einer einzigen Dosis INTERCEPT Verarbeitungssatz (dh die großvolumige set) zu behandeln und Speichern des PC als einzelne therapeutische Dosis größer, wodurch eine Pathogeninaktivierung auf alle Einheiten. Um sicherzustellen, dass wir unserenQC Anforderungen und Pathogen zu inaktivieren, da viele unserer Thrombozyteneinheiten möglichst wir Buffy Coats auf den Donor Blutplättchen, die, wenn sie vereinigt, in einem minimalen Gehalt an Blutplättchen 5.6x10 11 Blutplättchen in dem Pool führt auszuwählen. Dies gewährleistet eine ausreichende Thrombozytengehalt zwei therapeutischen Dosen nach INTERCEPT Behandlung herzustellen. Unsere Validierung zeigt, dass 7 Vollblut gewonnen Leukozytenfilm Einheiten erfolgreich gebündelt werden und mit dem INTERCEPT Verfahren für Blutplättchen, was in 2 Erregers inaktivierten Thrombozyten Produkte erfüllen die Aufnahmekriterien für die Herstellung von (Swedish Anforderungen und europäischen Richtlinien) und für die Unterstützung der Patienten erfordern Thrombozyten-Transfusionen nach klinischen Leitlinien und Standards Thrombozyten Infusionsverfahren in Schweden.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Spende von Vollblut, primäre Trennung und Herstellung von Thrombozyten</td></tr><tr><td>Blutentnahmeset</td><td>Fenwal</td><td>R6485</td><td>Oberer/Unterer Satz</td></tr><tr><td>Automatischer Komponentenextraktor</td><td>Fenwal</td><td>Optipress-II</td><td></td></tr><tr><td>Blutmischer und Wägesystem</td><td>Baxter</td><td>Easymix V3</td><td></td></tr><tr><td>Plättchen-Leukozyten-Filtrationsset</td><td>Fenwal</td><td>K4R7042</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Hettich</td><td>Roto Silenta 63 RS</td><td>Version 5.5</td></tr><tr><td>Plättchen-Additivlösung - SSP+</td><td>MacoPharma</td><td>SSP2030U</td><td>300 ml</td></tr><tr><td>Steriler Schlauchschweißer</td><td>Terumo</td><td>T-SCD</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">INTERCEPT-Behandlung &amp;amp; Lagerung</td></tr><tr><td>INTERCEPT-Verarbeitungsset</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT2503</td><td>Dual-Storage-(DS-)Set</td></tr><tr><td>INTERCEPT Illuminator</td><td><a href="http://www.interceptbloodsystem.com/" target="_blank"><img src="/img/new_window.png"> Cerus</a></td><td>INT100</td><td></td></tr><tr><td>PC-Musterpaket</td><td>Fenwal</td><td>FTX 1122</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>Helmer</td><td>PC2200/PC3200</td><td></td></tr><tr><td>Rührer</td><td>Helmer</td><td>PF48H/PF96H</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Auswertung von &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; Thrombozytenfunktion</td></tr><tr><td>Blutgasanalysator</td><td>Radiometer</td><td>ABL 735</td><td>Zur Messung von pH, Blutgasen und Laktat verwendet</td></tr><tr><td>Chemie-System</td><td>Ortho Clinical Diagnostic</td><td>Vitros 5.1</td><td>Zur Glukosemessung verwendet</td></tr><tr><td>Hämatologieanalysator</td><td>Boule Medical AB</td><td>Medonic CA620-Cellguard</td><td>Zur Messung der Thrombozytenanzahl verwendet</td></tr><tr><td>Durchflusszytometer</td><td>BD</td><td>FACSCanto</td><td>Wird zur Bestimmung der weißen Blutkörperchen verwendet</td></tr></tbody></table>

vorbereitung und pathogeninaktivierung von double dose buffy coat platelet produkte, die intercept blood system

Preparation and Pathogen Inactivation of Double Dose Buffy Coat Platelet Products using the INTERCEPT Blood System

Blut-Zentren sind mit vielen Herausforderungen wie die Maximierung der Produktion Ertrag aus dem Blut und Sachspenden, die sie erhalten, sowie die Gewährleistung der höchstmöglichen Sicherheit für Transfusionsmedizin Patienten, einschließlich des Schutzes vor Transfusionen übertragbaren Krankheiten konfrontiert. Dies muss in einer verantwortungsvollen Haushaltspolitik Weise betrieblichen Aufwendungen einschließlich Verbrauchsmaterial, Ausrüstung, Abfall und Personalkosten, unter anderem minimiert erreicht werden. Mehrere Methoden stehen zur Verfügung, um zu produzieren Thrombozytenkonzentrate zur Transfusion. Einer der häufigsten ist der Buffy-Coat, bei dem eine einzelne therapeutische Thrombozyten Einheit (≥ 2,0 x10 11 Plättchen pro Gerät oder pro örtlichen Vorschriften) durch die Bündelung der Buffy-Coat-Schicht von bis zu sechs Vollblutspenden vorbereitet wird. Ein Verfahren zur Herstellung von &quot;doppelte Dosis&quot; Vollblut gewonnen Blutplättchen hat erst vor kurzem entwickelt worden. Hier ist dargestellt ein neues Verfahren zur Herstellungdoppelte Dosis Vollblut gewonnen Thrombozytenkonzentrate aus Pools von 7 buffy coats und anschließend die Behandlung der doppelte Dosis Einheiten mit dem INTERCEPT Blood System für Pathogeninaktivierung. INTERCEPT wurde entwickelt, um Viren, Bakterien, Parasiten und verunreinigen Spender weißen Blutkörperchen, die vorhanden sein in Blut kann zu inaktivieren. Pairing Schnittpunkt mit der doppelten Dosis Leukozytenfilm Verfahren unter Ausnutzung des INTERCEPT Verarbeitung mit Dual Storage Container (die &quot;DS set&quot;) Set ermöglicht Blutspendezentren jedem ihrer doppelte Dosis Einheiten in einem einzigen Pathogeninaktivierung Verarbeitungssatzes zu behandeln, damit die Maximierung der Patientensicherheit bei gleichzeitiger Minimierung der Kosten. Die doppelte Dosis Leukozytenfilm Methode erfordert weniger buffy coats und reduziert die Verwendung von Verbrauchsmaterialien, die von bis zu 50% (z. B. Pooling-Sets, Filter-Sets, Plättchen-Additiv-Lösung, und sterile Verbindung Wafern) im Vergleich zu der Zubereitung und Behandlung von Einzeldosis Leukozytenfilm Thrombozyteneinheiten . Weitere Kosteneinsparungen sind weniger Abfall, weniger Geräte wartungsce, geringere Leistungsaufnahme, geringere Personal Zeit und geringere Kosten der Erhebung der Apherese-Technik verglichen.

Dieser Artikel beschreibt den Prozess, durch Örebro University Hospital verwendet werden, um doppelte Dosis Leukozytenfilm Thrombozytenkonzentrate aus Vollblutspenden hergestellt und behandelt mit dem INTERCEPT Blood System für Pathogeninaktivierung produzieren. Die<em&gt; In vitro</em&gt; Qualität der endgültigen Thrombozyten Einheiten sind über 7 Tagen Lagerung ausgewertet.

Vorbereitung und Pathogeninaktivierung von Double Dose Buffy Coat Platelet Produkte, die INTERCEPT Blood System

Blutzentren stehen vor zahlreichen Herausforderungen, darunter die Maximierung der Produktionsausbeute aus den erhaltenen Blutproduktspenden sowie die Gewährleistung der ...

In diesem Video wird ein Thrombozytenkonzentrat mit doppelter Dosis aus einem Pool von sieben Buffy-Coats hergestellt und anschließend mit Intercept behandelt. Nach dem Ansehen dieses Videos sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie ein pathogen-inaktiviertes Thrombozytenkonzentrat mit doppelter Dosis hergestellt wird. Zunächst zeigen wir eine schematische Übersicht, gefolgt von einer Demonstration.Die ersten sieben Einheiten gespendeten Vollbluts werden zentrifugiert und aufgetrennt, um sieben Buffy-Coat-Einheiten zu gewinnen, die die vorgegebenen Werte für Volumen und Hämatokrit erreichen. Die Buffy Coats werden verbunden, gepoolt und erneut zentrifugiert. Anschließend wird die Thrombozytensuspension von den restlichen roten Blutkörperchen getrennt, um ein Doppel-Dosis-Thrombozytenkonzentrat herzustellen, mit dem Pathogene und Leukozyten inaktiviert werden.Der Doppel-Dosis-Thrombozytenkonzentrat wird mit dem Intercept-System behandelt, das Nukleinsäuren vernetzt. Letztendlich ergibt dieses Verfahren zwei therapeutische Thrombozytendosen mit akzeptabler In-vitro-Qualität über sieben Tage Lagerung, wie durch die Bestimmung von pH, Glukose, Laktat, PO₂ und PCO₂ sowie Shallot Doru festgestellt wurde. Ein Techniker meines Blutspendezentrums wird das Verfahren sowie die beschriebenen Aufbereitungsanforderungen demonstrieren.Zunächst sicherstellen, dass das Doppelkonzentrat an Thrombozyten die Anforderungen für die Inaktivierungsbehandlung erfüllt: ein Volumen von 300 bis 420 Milliliter, eine Thrombozytenkonzentration von 2,5 bis 7 × 10¹¹ pro Dosis und weniger als 4 × 10⁶ pro Milliliter rote Blutkörperchen. Beginnen Sie dieses Verfahren mit sieben Einheiten Vollblut, die in 450-Milliliter-Top-Bottom-Sammelsystemen gesammelt wurden.Stellen Sie die Bluteinheiten in Zentrifugenröhrchen und führen Sie eine harte Zentrifugation bei 4.880 RCF für 11 Minuten bei Raumtemperatur mit Bremseinstellung B fünf gemäß den Herstelleranweisungen durch. Nach der Zentrifugation trennt sich das Blut in drei Schichten: rote Blutkörperchen, Buffy Coat und Plasma. Leiten Sie das Plasma in den oberen Satellitenbeutel und die roten Blutkörperchen in den unteren Satellitenbeutel ab, wobei der Buffy Coat mit einem Volumen von etwa 48 Millilitern und einem Hämatokrit von 37 % im Sammelbehälter verbleibt.Stellen Sie die Buffycoats über Nacht auf einen Thrombozytenaggregator bei Raumtemperatur. Steril verbinden Sie sieben Buffycoats und 300 Milliliter SSP-Plus-Thrombozyten-Additivlösung in einer Zuganordnung mit der Additivlösung an der Spitze. Klemmen Sie die Leitung zwischen der Additivlösung und dem ersten Buffycoat wie hier gezeigt ab. Öffnen Sie die Schweißnähte zwischen den Buffycoat-Einheiten und lassen Sie sie in den letzten Buffycoat-Behälter ablaufen.Öffnen Sie als Nächstes die Klemme und die Verbindung zwischen der Additivlösung und dem ersten Buffy-Coat und lassen Sie etwa ein Drittel der Additivlösung, ungefähr 100 Milliliter, nacheinander durch jeden der Buffy-Coat-Behälter spülen, bevor Sie die Klemme schließen. Wiederholen Sie diesen Waschvorgang noch zweimal, wobei jedes Mal ungefähr 100 Milliliter der Additivlösung verwendet werden. Trennen Sie den Behälter mit dem gepoolten Buffy Coat von den leeren Behältern. Das Volumen des Buffy-Coat-Pools einschließlich der Additivlösung sollte ungefähr 600 Milliliter betragen.Stellen Sie die gepoolten Buffycoats eine Stunde lang bei Raumtemperatur auf einen Schüttler. Anschließend verbinden Sie einen Thrombozyten-Speicherbehälter mit integriertem Leko-Reduktionsfilter mit dem Beutel, der den Buffycoat-Pool enthält. Geben Sie die gepoolten Buffycoats und den Thrombozyten-Speicherbehälter in eine Zentrifuge und zentrifugieren Sie sie 9 Minuten und 20 Sekunden bei 462 RCF.Nach der Zentrifugation wird die Thrombozytensuspension durch den Luca-Reduktionsfilter in den Thrombozyten-Speicherbehälter abfiltriert. Das Ergebnis ist ein Doppel-Dosis-Thrombozytenkonzentrat mit etwa sieben mal 10 hoch 11 Thrombozyten in 420 Milliliter, das einer Pathogeninaktivierung mit Intercept zur Pathogeninaktivierung unterzogen werden kann. Das Doppel-Dosis-Thrombozytenkonzentrat wird mithilfe eines Intercept-Verarbeitungssets behandelt, das aus einem Antoin-Behälter, einem Bestrahlungsbehälter und zwei Speicherbehältern besteht.Verbinden Sie den Behälter mit der Thrombozytensuspension mit dem Amin-Behälter am Intercept-Verarbeitungsset. Hängen Sie anschließend die Thrombozyten auf. Brechen Sie die untere Kanüle am Amin-Behälter ab, um den Fluss der Lösung in den Beleuchtungsbehälter zu ermöglichen.Dann brechen Sie die obere Kanüle am Amin-Behälter, um den Thrombozyten den Durchfluss durch den Amin-Behälter in den Beleuchtungsbehälter zu ermöglichen. Mischen Sie vorsichtig die Mischung aus Thrombozyten und Amotosin. Drücken Sie leicht auf den Beleuchtungsbehälter, um die Luft aus dem Beleuchtungsbehälter herauszupressen.Versiegeln Sie den Schlauch zwischen der Beleuchtungseinheit und der Amato- und der Behältereinheit, sodass nicht mehr als vier Zentimeter Schlauch aus der Beleuchtungseinheit herausragen. Entfernen und entsorgen Sie die leeren Behälter. Stellen Sie das Verarbeitungsset in den Beleuchter, wobei sich die Beleuchtungseinheit im großen Fach auf der linken Seite und der Organisator im kleineren Fach auf der rechten Seite befindet.Scannen Sie die Spenden-ID. Produktcode und Verarbeitung. Geben Sie die Chargennummer in den Beleuchter ein.Schließen Sie die Metallabdeckung und die Schublade. Drücken Sie auf Start, um die Beleuchtung zu beginnen. Der Beleuchter liefert eine kontrollierte Dosis an UVA-Licht an die Plättchenaminmischung im Beleuchtungsbehälter.Amin dockt zwischen den Nukleinsäure-Basenpaaren von Krankheitserregern ein, die in der Thrombozyten-Einheit vorhanden sein können. Bei Beleuchtung entstehen dauerhafte Vernetzungen, die die DNA oder RNA miteinander verbinden, sodass die Erreger sich nicht mehr vermehren und beim Empfänger des Blutpräparats eine Erkrankung verursachen können. Nach der Beleuchtung entfernen Sie das Verarbeitungsset.Als Nächstes entfernen Sie die Behälter vom Organizer, hängen die Thrombozyten und das Verarbeitungsset auf. Brechen Sie die Kanüle am Auslass des Beleuchtungsbehälters ab und lassen Sie die Thrombozyten in den CAD-Behälter fließen. Im Inneren des CAD-Behälters befindet sich ein Wafer mit immobilisierten makroporösen Polystyrolkügelchen, die die Restmengen von Amin im Blutprodukt reduzieren.Darauf achten, dass die CAD-Wafer nicht verbogen wird. Die Luft aus dem CAD-Behälter in den Beleuchtungsbehälter auspressen. Den Schlauch nahe dem Einlassstutzen des CAD-Behälters verschließen.Entfernen und entsorgen Sie den leeren Beleuchtungsbehälter. Stellen Sie den CAD-Behälter mit den angebrachten Speicherbehältern sechs bis 16 Stunden lang auf einen Thrombozyten-Agitator. Dadurch wird die Konzentration des restlichen Amlin auf weniger als oder gleich zwei Mikromolar reduziert.Nach der CAD-Behandlung die Thrombozytenkonzentrate vom Schüttler nehmen, die Thrombozyten aufhängen, die Kanüle am Auslass des CAD-Behälters abbrechen und die Thrombozyten in die beiden Lagerungsbehälter abfließen lassen. Anschließend die Luft aus den Lagerungsbehältern herausdrücken. Das Schlauchsystem oberhalb des Y-Stücks verschließen und den CAD-Behälter entfernen.Das Ergebnis sind zwei pathogeninaktivierte Thrombozytenkonzentrate zur Beurteilung der in-vitro-Thrombozytenfunktion. Die Thrombozytenkonzentratdosis pH PO zwei PC O2-Laktatproduktion und Glukoseverbrauch des Achsenabschnitts. Die Thrombozytenkonzentrate wurden bis zum siebten Tag der Lagerung untersucht.Diese Abbildung zeigt die mittlere anfängliche Thrombozyten-Dosis des Doppelkonzentrats vor der Intercept-Behandlung sowie die mittlere Thrombozyten-Dosis in jedem der behandelten Teilprodukte bis zum siebten Tag der Lagerung. Wie hier zu sehen ist, betrug der Thrombozytenverlust während der Lagerung etwa 9 %. Diese Verringerung unterscheidet sich nicht signifikant vom erwarteten Verlust von Thrombozyten bei der Lagerung konventioneller Thrombozytenkonzentrate. Gemäß den europäischen Anforderungen muss der pH-Wert der Thrombozyten bis zum Ende der Haltbarkeitsdauer über 6,4 liegen.Während der Verarbeitung sinkt der pH-Wert von Thrombozytenkonzentraten geringfügig, abhängig von der Thrombozytenkonzentration, dem Volumen und der Gaspermeabilität des Lagerbehälters für Thrombozyten. Diese Abbildung zeigt den pH-Wert der aufgeteilten Thrombozytenprodukte über sieben Tage Lagerung; dabei bleibt der pH-Wert stabil und wird innerhalb der Anforderungen der Verarbeitung gut aufrechterhalten. Der aerobe Stoffwechsel sollte in den gelagerten Thrombozyten weiterhin stattfinden und ist ein Indikator für die Fähigkeit der Thrombozyten, nach der Transfusion in einen Patienten im Körper zu funktionieren.Der Sauerstoffverbrauch und die CO2-Produktion der Thrombozyten weisen auf eine anhaltende Atmung der Thrombozyten im PL 24 10-Behälter während der sieben Tage Lagerung hin. Ebenso sollte der anaerobe Stoffwechsel in gelagerten Thrombozyten fortgesetzt werden. Daher sind auch der Glukoseverbrauch und die Laktatproduktion Indikatoren für die Fähigkeit der Thrombozyten, nach einer Transfusion zu funktionieren.Diese beiden Abbildungen zeigen die Lactat- und Glucosespiegel über sieben Tage Lagerung. Der Glucoseverbrauch durch Thrombozyten und die Lactatproduktion stimmen gut überein. Während der sieben Tage Lagerung wiesen fünf Einheiten Glucosespiegel unter 1,11 Millimol pro Liter auf, was der unteren Grenze für den Glucose-Assay entspricht.Die Buffy-Code-Präparation und die Validierung der Poolbildung ergaben Thrombozytenkonzentrate, die die Eingabekriterien für die Intercept-Behandlung erfüllen, insbesondere Volumen, Thrombozytenzahl, Plasmaanteil und Erythrozytenkontamination. Die endgültigen Einheiten erfüllen die Validierungskriterien über sieben Tage Lagerung, einschließlich Thrombozytendosis und pH-Wert. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber der herkömmlichen Buffy-Code-Präparationsmethode, die ein Einzeldosis-Thrombozytenkonzentrat erzeugt, liegt darin, dass sie die Komponentenausbeute aus Blutspenden maximiert, die Betriebskosten durch Anwendung einer Doppeldosistechnik senkt und die Patientensicherheit verbessert, indem transfusionsübertragene Krankheitserreger inaktiviert werden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

In diesem Video demonstrieren wir die Isolierung von mononukleären Zellen des peripheren Blutes, PBMCs, die Monozyten und Lymphozyten enthalten, aus einem menschlichen Buffy-Coat durch Dichtegradientenzentrifugation. Die isolierten PBMCs können für weitere Analysen verwendet werden.

Isolierung von mononukleären Zellen des peripheren Blutes aus menschlichen Buffy Coats

Dieses Video zeigt den auf Riboflavin und UV-Licht basierenden Prozess zur Reduzierung von Krankheitserregern gegen bakterielle Kontamination mit hohen Titern in menschlichen Thrombozytenprodukten. Dieses Verfahren könnte dazu beitragen, das Risiko schwerer unerwünschter Transfusionsereignisse im Zusammenhang mit bakterieller Kontamination zu senken.

Eine Riboflavin- und UV-Lichtbehandlung von Thrombozytenprodukten zur Beseitigung von Bakterien

Die Lagerbedingungen von Thrombozytenprodukten schaffen eine ideale Umgebung für bakterielle Verunreinigungen, um sich auf ein gefährliches Niveau zu vermehren.  Das Ziel dieser Studie war es, einen koloniebildenden Assay zu verwenden, um einen Riboflavin-basierten Erregerreduktionsprozess gegen bakterielle Kontamination mit hohem Titer in humanen Thrombozytenprodukten zu bewerten.

Behandlung von Thrombozyten Produkte mit Riboflavin und UV-Licht: Wirksamkeit gegen bakterielle Kontamination mit hohem Titer

Die Thrombozytentransfusion und Hämostase wurde unter Verwendung von Blutrekonstitution und mikrofluidischen Flusskammern modelliert, um die Funktion von Blutbankplättchen zu untersuchen. Die Daten zeigen die Auswirkungen einer Thrombozytenspeicherung auf die Blutstillung in vitro.

Mikrofluidik-Strömungskammern Mit Rekonstituierte Blut Hämostaseologie und Transfusions Platelet zu Modell<em&gt; In Vitro</em

Dieses Dokument beschreibt ein experimentelles Modell der Hämostase, die Thrombozytenfunktion und Koagulation gleichzeitig misst. Blutplättchen- und Fibrin- Fluoreszenz wird in Echtzeit gemessen und die Plättchenadhäsion Rate, Gerinnungsrate und Einsetzen der Gerinnung bestimmt. Das Modell wird verwendet, um die Thrombozyten Prokoagulanz-Eigenschaften unter Strömung in Konzentraten für Transfusions bestimmen.

Ein Mikrofluidik-Flow-Kammer-Modell für Platelet Transfusions und Hämostase Maßnahmen Platelet Deposition und Fibrinbildung in Echtzeit

In diesem Artikel beschreiben wir eine Methode zur Bestimmung der endothelialen von Willebrand Faktor Release und das anschließende Plättchen erfassen unter Fluid Schubspannung in Reaktion auf entzündliche Reize mit einer in-Vitro -Fluss-Kammer-System.

Untersuchung von Willebrand Faktor Pathophysiologie mit einem Flow-Kammer-Modell des von Willebrand-Faktor-Thrombozyten String Bildung

Thrombozyten-Inventar-Management basierend auf screening-Mikropartikel Inhalte in Thrombozyten-Konzentraten ist eine neue Qualität Verbesserungsinitiative in Krankenhaus-Blutbanken. Das Ziel ist, aktiviert von nicht aktivierten Thrombozyten zur Optimierung der Nutzung von Blutplättchen zu unterscheiden. Eine nicht aktivierte Thrombozyten für Hämatologie-Onkologie-Patienten könnte ihr hohe Risiko feuerfesten zu reduzieren.

Routine-Screening Methode für Mikropartikel in Thrombozytentransfusionen

Dieses Protokoll stellt einen zugänglichen Leitfaden für die Sammlung, Lagerung und das Auftauen von mononukleären Zellen des peripheren Blutes dar, der für nachgelagerte Analysen und Arbeitsabläufe wie Durchflusszytometrie und RNA-Sequenzierung geeignet ist. Plasma- und Buffy-Coat-Sammlungen werden ebenfalls vorgeführt.

Isolierung und Kryokonservierung von hochlebensfähigen mononukleären Zellen des peripheren Blutes des Menschen aus Vollblut: Ein Leitfaden für Einsteiger

Dieses Protokoll beschreibt eine automatisierungskompatible Methode mit hohem Durchsatz zur Isolierung von mononukleären Zellen des menschlichen peripheren Blutes für Biobanking und andere Zwecke.

Isolierung von mononukleären Zellen des humanen peripheren Blutes aus Buffy Coats durch immunmagnetische Hochdurchsatz-Bead-Trennung

Die Thrombozytenfunktion unter Fluss kann beurteilt und eine simulierte hämostatische Wiederbelebung mit einem mikrofluidischen Gerät modelliert werden, das in der Trauma- und Transfusionsmedizin Anwendung findet.

Mikrofluidik zur Beurteilung der Thrombozytenfunktion

Der Thrombozytenstoffwechsel ist von Interesse, insbesondere da er sich auf die Rolle der Hyper- und Hypoaktivität von Blutplättchen bei Blutungen und thrombotischen Erkrankungen bezieht. Die Isolierung von Blutplättchen aus dem Plasma ist für einige metabolische Assays notwendig. Hier wird ein Verfahren zur Isolierung intrazellulärer Metaboliten aus gewaschenen Blutplättchen vorgestellt.

Vorbereitung von gewaschenen menschlichen Blutplättchen für quantitative Stoffwechselflussstudien

Lernen Sie die Herstellung von doppelten Buffy-Coat-Thrombozytenkonzentraten mit dem INTERCEPT-Blutsystem zur Pathogeninaktivierung. Diese Methode gewährleistet sichere Blutprodukte für die Transfusionsmedizin.

Vorbereitung und Pathogeninaktivierung von Double Dose Buffy Coat Platelet Produkte, die INTERCEPT Blood System

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