Name: In-vivo-Bildgebung mit MR Makrophagen gezielte Kontrastmittel für die Längs-Auswertung der septische Arthritis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-20T21:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Lernen Sie die MR-Bildgebung von Makrophagen in septischer Arthritis mit USPIO-Kontrastmitteln. Diese Methode ermöglicht die nicht-invasive Längsbeobachtung von Makrophagen-Infiltration und Therapieansprechen im Kaninchenmodell.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wir bedanken uns herzlich für die Unterstützung Bierry F. in der Videoproduktion und-bearbeitung.

Alle Verfahren, die tierischen Probanden wurden von der Universitätsklinik Institutional Animal Care Ausschuss genehmigt worden. 1. Innenbandriss Bakterieninokulation <ol><li> Vor der Injektion betäuben Kaninchen durch intramuskuläre Injektion von Ketamin (30 mg / kg Körpergewicht) mit Xylazin (4 mg / kg) innerhalb Rückenstrecker Muskel gemischt. Stellen Sie sicher, Tiere sind völlig betäubt, indem sie zu paw Prise nicht ansprechen. Dieses Protokoll sorgt für ausreichende Anästhesie für die intraartikuläre Injektion des Kniegelenks. Legen Sie die Tiere unter Sauerstoffmaske während der Narkose. </li><li> Shave Tiere Knie. Bereiten Sie das Knie für aseptische Injektion von 3 abwechselnd Tücher Povidonjod Gestrüpp und Alkohol durch die Anwendung von PVP-Jod Lösung. </li><li> Manuelle Identifizierung der Patellarsehne als elastische Struktur an der vorderen Seite des Knies mit einer sterilen Nadel Kappe wie gezeigt, oder einer sterilen Sonde. </li><li&gt; Mit visuellen Kontrolle und durch die Verwendung eines anterioren Zugang, legen Sie eine 25 G Nadel perkutan im rechten Knie von jedem der 12 Kaninchen durch die Patellasehne. </li><li> Injizieren jedes Knie mit 1 ml einer Bakteriensuspension von Staphylococcus aureus (Stamm Neumann) in einer Konzentration von 10 6 UFC / ml. Injektionsvorrichtung ohne Widerstand bestätigt die intraartikuläre Stelle der Spitze der Nadel. </li><li> Nach der Injektion Verfahren, halten das Tier unter konvektiven Quelle, um den Wärmeverlust zu vermeiden und zu überwachen Atemfrequenz durch Beobachtung Bewegung der Brust. Einmal wach, halten Tiere in Käfigen mit freiem Zugang zu Futter und Wasser. </li><li> Verwalten Schmerzen durch Verabreichung eine intramuskuläre Injektion von 0,1 mg / kg alle 8 h Buprenorphin. </li><li> Klinisch beobachten Kaninchen jeden Tag, Überwachung verbrauchten Mengen an Nahrung und Wasser, Gewichtsverlust, Temperatur, und das allgemeine Verhalten. </li><li> Um das Bild der akuten Phase der Infektion führen Sie das erste MR-Bildgebung Sitzung sobaldwie ein Tier erheblichen Gewichtsverlust (10%), in der Regel in diesem Fall nach ca. 2 Tagen. </li><li> Ist eine intravenöse Medikamentengabe vor MRT-Untersuchung erforderlich ist, könnte ein auricular venösen Zugang installiert ist (vgl. unten). </li></ol> 2. MRT-Untersuchung Bei der Abbildung von lebenden Tieren ist eine sorgfältige Installation Tier ein wesentliches Merkmal von Tieren Komfort und optimale Anästhesie zu gewährleisten. Dies wird für die besten Bildergebnisse zu ermöglichen und gewährleisten eine reproduktive Bildaufnahme für Längsschnittstudien. Aufgrund der Größe des Tieres, ist die Verwendung eines klinischen große MR-Einheit (1,5 T oder T 3) am besten geeignet. 8-Kanal-klinischen Kniespule verwendet wird, wie es richtige Auflösung und Kontrast-zu-Rausch-Verhältnis für Kaninchen Knie Exploration bietet. <ol><li> Vor der Installation auf dem Imaging-System installieren, ein peripherer venöser Zugang über eine Ohrvene. Dieser Zugriff wird dazu dienen, das Kontrastmittel zu injizieren. <ol><li> Rasur und desinfizieren Sie das Ohr. </li><li&gt; Führen Lokalanästhesie durch subkutane Injektion von Lidocain. </li><li> Legen Sie eine 25 G Katheter innerhalb des lateralen Ohrvene. </li><li> Bewerten Sie die Durchlässigkeit durch Injektion von 1 ml steriler physiologischer Serum. </li><li> Pflegen Sie den Katheter mit Klebstoff Klopfen. </li></ol></li><li> Anesthetize Tiere durch intramuskuläre Injektion von Ketamin (30 mg / kg Körpergewicht) mit Xylazin (4 mg / kg) gemischt. Tiere sind völlig betäubt, wenn sie zu paw Prise nicht ansprechen. Legen Sie eine Gesichtsmaske auf das Kaninchen, die ihm Sauerstoff mit einer Flussrate von 200 ml / min. </li><li> Einmal vollständig betäubt, nehmen Tiere auf die MR-Bildgebung Einheit. Platz Tieren, so dass die Knie in der Mitte des MR-Spule angeordnet. Legen Sie die Tiere die Beine in völliger Ausdehnung, so dass die lange Achse der Tibia parallel zur MR-Bildgebung Einheit Tabelle ist. Mit Klettverschlüssen oder Sandsäcken, um eine optimale Beinstellung zu halten. </li><li> Cardio-Überwachung der Atmung der Tiere wird nicht als erforderlichAnästhesie-Protokoll ermöglicht tiefe Narkose auf die spontane Atmung, aber Tiere sind abgedeckt, um Narkose-induzierten Wärmeverlust zu vermeiden. </li><li> MR-Protokoll ist in Tabelle 1 aufgeführt. Die durchschnittliche Zeit für die gesamte Übernahme einschließlich der optimalen Installation ist ca. 20 min. </li><li> Führen MR-Bildgebung in verschiedenen Ebenen. Dennoch ist die Querebene der Knie (orthogonal zur Tibia) die Referenzebene wie anatomische Reproduzierbarkeit Bild für das sequentielle Längsrichtung Prüfungen gewährleisten und eine optimale Korrelation mit histologischen Schnitten. </li><li> Nach Beendigung der nativen Sequenzen injizieren UPSIO Kontrastmittels im Vorhof venösen Zugang. Langsam Verwaltung der Eisenoxidteilchen in einer Einzeldosis von 150 mmol Fe / kg. Spülen des Katheters durch Injektion von 1 ml steriler physiologischer Kochsalzlösung. </li><li> Wiederholen Sie die erweiterte GRE gewichtete Sequenz 24 Stunden nach der Injektion. Diese Verzögerung ermöglicht die Teilchen durch phagozytiert werdendie Makrophagen. </li><li> Für Längsschnittstudien Auswertung Drogen Wirkung (Antibiotika, Steroide, anti-Makrophagen-Antikörper, etc.), Wiederholen sequentiellen MR-Untersuchungen unter Verwendung der oben beschriebenen Protokoll. </li></ol> 3. Bildanalyse <ol><li> Für Längs-Evaluierung durchzuführen Messungen an der gleichen anatomischen Ebene und definieren eine leicht identifizierbare Wahrzeichen. So ist zum Beispiel durch Erfassung der axialen Ebene, wo der größte Durchmesser der Patella beobachtet wird eine zuverlässige Möglichkeit, reproduzierbare Messung (1) zu erhalten. </li><li> Führen Bildanalyse mit einem DICOM-basierte Software (wie Osirix) oder eine Bildverarbeitungssoftware (ImageJ). </li><li> Mit ImageJ Software, führen Sie die Segmentierung der Gelenkflüssigkeit Bereich, der Signalverlust zeigt auf USPIO-enhanced GRE T2-gewichteten Bild mit der &quot;irregulären Bereich&quot; Malwerkzeug. Sobald der Synovialis mit dunklen Signal wird skizziert, auf &quot;Analysieren&quot; klicken, um den Bereich / erhaltenAnzahl der Pixel (Abbildung 2). </li></ol>

<ol><li>Madri, J. Inflammation and healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMadri%2C+J+%22Anderson%27s+Pathology%22">Anderson's Pathology</a>. Kissane, J. , 67-110 (1990).</li>
<li>Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSephel%2C+G+%22Rubin%27s+Pathology%22">Rubin's Pathology</a>. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).</li>
<li>Verdrengh, M., Tarkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+macrophages+in+Staphylococcus+aureus-induced+arthritis+and+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Role of macrophages in Staphylococcus aureus-induced arthritis and sepsis.</a> Arthritis Rheum. 43 (10), 2276-2282 (2000).</li>
<li>Heale, J., Speert, D. Macrophages in bacterial infection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeale%2C+J+%22The+Macrophage%22">The Macrophage</a>. Burke, B., Lewis, C. , Oxford University Press. Oxford, England. 210-252 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+activity+in+infected+areas+of+an+experimental+vertebral+osteomyelitis+model%3A+USPIO-enhanced+MR+imaging--feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Macrophage activity in infected areas of an experimental vertebral osteomyelitis model: USPIO-enhanced MR imaging--feasibility study.</a> Radiology. 248 (1), 114-123 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+of+macrophages+in+infectious+knee+synovitis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR+Am.+J.+Roentgenol%22%5BJournal%5D)">MRI of macrophages in infectious knee synovitis.</a> AJR Am. J. Roentgenol. 194 (6), W521-W526 (2010).</li>
<li>Lutz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+synovial+macrophages+in+an+experimental+rabbit+model+of+antigen-induced+arthritis%3A+ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide-enhanced+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Detection of synovial macrophages in an experimental rabbit model of antigen-induced arthritis: ultrasmall superparamagnetic iron oxide-enhanced MR imaging.</a> Radiology. 233 (1), 149-1457 (2004).</li>
<li>Weissleder, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide%3A+an+intravenous+contrast+agent+for+assessing+lymph+nodes+with+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasmall superparamagnetic iron oxide: an intravenous contrast agent for assessing lymph nodes with MR imaging.</a> Radiology. 175 (2), 494-498 (1990).</li>
<li>Lefevre, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Septic+arthritis%3A+monitoring+with+USPIO-enhanced+macrophage+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Septic arthritis: monitoring with USPIO-enhanced macrophage MR imaging.</a> Radiology. 258 (3), 722-728 (2011).</li>
<li>Sigovan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid-clearance+iron+nanoparticles+for+inflammation+imaging+of+atherosclerotic+plaque%3A+initial+experience+in+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Rapid-clearance iron nanoparticles for inflammation imaging of atherosclerotic plaque: initial experience in animal model.</a> Radiology. 252 (2), 401-409 (2009).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Während unspezifische Gadolinium-basierte Kontrastmittel Informationen über das Volumen und die Durchblutung der extrazellulären Raum zu bieten, ermöglicht Makrophagen Bildgebung durch USPIO-enhanced MR eine genaue anatomische Lokalisation und eine qualitative Beurteilung der Makrophageninfiltration in infizierten synovium ohne die Notwendigkeit der Gewebeentnahme 9. Aufgrund ihrer hohen Empfindlichkeit kann USPIO demonstrieren sogar subtile Zellinfiltrat in den frühen Phasen der Infektion. Unter erfolgreiche...

Magnetic Resonance Imaging (MRI) gilt als das bildgebende Verfahren der Wahl für die Demonstration von infektiösen Synovitis aufgrund seiner hohen räumlichen Auflösung und Weichgewebe Gegensatz sein. Signal Veränderungen im MRT bei Arthritis niedrig T1 und T2 hohen Signal spiegelt die verstärkte Präsenz von extrazellulären Wassergehalt und eine deutliche Verbesserung nach Gadolinium-basierte Kontrastmittel Verabreichung beobachtet, im Einklang mit den Ergebnissen der histologisch erhöhte Durchblutung infolge Vasodilatation und Angiogenese 1. Dennoch ist MRI oft nicht Auflösung der Infektion während einer antibiotischen Therapie zeigen als persistente Verbesserung in den Gelenken von Patienten mit klinisch und biologisch geheilt septische Arthritis durch Persistenz vergrößerten extrazellulären Raum (Granulationsgewebe, fibrotische Narbe) 2 beobachtet werden. Neben extrazellulären Veränderungen, Entzündungszellen einschließlich einer intensiven Rekrutierung von Makrophagen massiv in die infiltrierenSynovia betroffen. Makrophagen spielen eine wichtige Rolle sowohl in der akuten und chronischen Phase einer bakteriellen Infektion 3. Sie induzieren die entzündliche Reaktion erforderlich ist, um pathogene Mikroorganismen zu beseitigen, und koordinieren Entzündung Auflösung, wie Makrophagen-induzierte Entzündung besteht, solange nekrotische Gewebe nicht entfernt werden, Verhindern Reparatur bis 4 beginnen. So kann die Reduktion von Makrophageninfiltration in infizierten Synovia nach effizienten Therapie ein zuverlässiger Indikator für die Auflösung der Infektion sein. Cellular Imaging ist in der Lage, spezifische zelluläre Infiltration im pathologischen Gewebe zu demonstrieren. Spezifische Makrophagen MR-Bildgebung durch gezielte Kontrastmittel wurde vielfach untersucht und hat gezeigt, seine Fähigkeit zu gemeinsamen Entzündung oder Infektion 5-7 demonstrieren. Nach intravenöser Injektion sind solche gezielte Kontrastmittel wie USPIO (ultrakleine superparamagnetische Eisenoxide) Partikel von Phagozyten wie Makrophagen aufgenommen undaufgrund ihrer magnetischen Eigenschaften zu induzieren Signaländerungen in Geweben präsentiert Makrophageninfiltration 8. Die Längs-Follow-up von denen MR-Signals ändert Therapie ermöglicht eine nicht-invasive in vivo Evaluierung Makrophageninfiltration, und eine Reduktion der USPIO beladenen Makrophagen-ähnlichen Signal Änderungen würden Therapieerfolg zu demonstrieren. Der Zweck dieses Berichts ist es bis heute, wie Makrophagen MR-Bildgebung durchführen, um nicht-invasiv überwacht septische Arthritis durch den Nachweis der Reduktion von Makrophageninfiltration innerhalb der Synovia.

<table><tbody><tr><td>Name des Reagenzes/Materials</td><td>Firma</td><td>Katalognummer</td><td>Kommentare</td></tr><tr><td>P904</td><td>Guerbet</td><td></td><td>Dosis: 150 &mu; mol Fe/kg</td></tr><tr><td>Ketamin (500 mg/ml Ketamin)</td><td>Virbac</td><td></td><td>Dosis: 30 mg/kg</td></tr><tr><td>Rompun (20 mg/ml Xylazin)</td><td>Axience</td><td></td><td>Dosis: 4 mg/kg</td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>Vetoquinol</td><td></td><td>Dosis: 0,1 mg/kg/8 Std</td></tr>. <tr><td>BD 22 G, 1 Zoll</td><td>BD Biosciences</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>BD 25 G, 5/8 Zoll</td><td>BD Biosciences</td><td>305122</td><td></td></tr></tbody></table>

in-vivo-bildgebung mit mr makrophagen gezielte kontrastmittel für die längs-auswertung der septische arthritis

In vivo Macrophage Imaging Using MR Targeted Contrast Agent for Longitudinal Evaluation of Septic Arthritis

Makrophagen sind Schlüssel-Zellen in der Initiierung, die Entwicklung und die Regulierung der Entzündungsreaktion auf bakterielle Infektion. Makrophagen sind intensiv und zunehmend in septischen Gelenke von den frühen Phasen der Infektion rekrutiert und die Infiltration soll einmal zurückbilden effiziente Beseitigung der Erreger erreicht wird. Die Fähigkeit, in vivo Makrophagenaktivität in einer infizierten gemeinsamen identifizieren können daher zwei Hauptanwendungen: Früherkennung der akuten Synovitis und Überwachung der Therapie. In vivo-invasive Erfassung von Makrophagen können mit Magnet-Resonanz-Bildgebung mit Eisen-Nanopartikeln wie ultrakleine superparamagnetische Eisenoxid (USPIO) durchgeführt werden. Nach intravaskulären oder intraartikuläre Verabreichung USPIO speziell von aktivierten Makrophagen und aufgrund ihrer magnetischen Eigenschaften phagozytiert, induzieren Signaländerungen in Geweben präsentiert Makrophageninfiltration. Ein quantitative Auswertung des infiltrieren möglich, da der Bereich mit einem Signalverlust (Anzahl dunkler Bildpunkte) auf Gradientenecho MR-Bildern beobachtet Teilchen nach Injektion mit der Menge an Eisen in dem Gewebe korreliert und daher gibt die Anzahl der USPIO-beladenen Zellen. Wir stellen Ihnen hier ein Protokoll zu Makrophagen Bildgebung mit USPIO-enhanced MR-Bildgebung in einem Tiermodell der septische Arthritis, so führen Sie einen Anfangs-und Längs-invasive in vivo Evaluierung von Makrophagen Infiltration und eine Bewertung der Therapie Aktion.

Auf nativen Bilder präsentiert der Synovialis von infizierten Knie eine diffuse Schwellung der Zwischen-Signal, nicht unterscheidbar von umgebenden Weichgewebe, während Oberschenkelknochen und Kniescheibe so niedrig Signal Strukturen (Abbildung 1) angezeigt. Auf den USPIO-enhanced Bilder werden 24 Stunden nach der Kontrastmittelgabe, Gelenkflüssigkeit Bereich mit USPIO-beladenen Makrophagen zeigen Signalverlust (Abbildungen 1 und 2). <p ...

Wir zeigen, wie Sie ausführen Makrophagen MR Bildgebung mit ultrakleine superparamagnetische Kontrastmittel (USPIO) in septische Arthritis, so dass eine erste und Längs-<em&gt; In vivo</em&gt; Non-invasive Beurteilung von Makrophagen Infiltration und eine Beurteilung der Wirksamkeit der Therapie.

In-vivo-Bildgebung mit MR Makrophagen gezielte Kontrastmittel für die Längs-Auswertung der septische Arthritis

Macrophages are key-cells in the initiation, the development and the regulation of the inflammatory response to bacterial infection. Macrophages are ...

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments besteht darin, die makrophagale Infiltration im Synovium longitudinal zu bewerten. Im Kaninchenmodell einer septischen Arthritis kann dies mithilfe der MRT-Bildgebung durch die Verwendung eisenoxidhaltiger Partikel erfolgen, die Makrophagen markieren und deren Präsenz sichtbar machen. Makrophagen sind Schlüsselzellen bei der Entstehung, Verstärkung und Auflösung einer Arthritis, insbesondere bei einer septischen Arthritis. Die in-vivo-Nachweise ihrer Präsenz und Verteilung innerhalb eines infizierten Gelenks könnten ein wertvolles Hilfsmittel zur Überwachung darstellen. Eine Antibiotikatherapie hat ein krankes Gelenk, das nicht massiv von Makrophagen infiltriert sein sollte. Makrophagen können verfügbar sein, während sie Zytone verlieren.He R-Kontrastmittel wie US-PIOs, ultra-kleine superparamagnetische Eisenoxidpartikel. Nach intravasculärer Verabreichung werden sie gezielt von aktivierten Makrophagen aufgenommen. U-S-P-I-O bestehen aus einem Eisenoxidkern mit einer Kristallgröße von etwa 40 Nanometern.Sie wirken als kleine Magnete, die MR-Signalveränderungen in Geweben mit Makrophagen erzeugen. Auf diesen beiden axialen MRT-Bildern eines Kaninchenknies ist zu erkennen, dass 24 Stunden nach der Gabe von U-S-P-I-O die Synovialmembran eine intensive und diffuse Signalabnahme aufweist. Aufgrund der Anwesenheit von SPI-OED-haltigen Makrophagen korreliert die Anzahl der dunklen Pixel im MRT-Bild mit dem Eisengehalt im Gewebe und damit mit der Anzahl der Makrophagen.Die longitudinale Nachverfolgung von U-S-P-I-O-bedingten R-Signalveränderungen könnte daher eine In-vivo-Bewertung des Vorhandenseins von Makrophagen im John während der Therapie ermöglichen. Hallo, mein Name ist Guian Bii. Ich bin Assistenzprofessor für Radiologie am Universitätsklinikum von Strat, Frankreich.Heute werden wir Ihnen zeigen, wie man eine Makrophagen-Bildgebung mittels MRT in einem Tiermodell der septischen Arthritis durchführt. Im ersten Teil wird unser wissenschaftlicher Mitarbeiter Ihnen erklären, wie man eine septische Arthritis im Knie eines Kaninchens durch direkte intraartikuläre Applikation von Staphylococcus auslöst. Im zweiten Teil werden wir Ihnen anschließend demonstrieren, wie die MRT-Untersuchung durchgeführt wird, wie das Kontrastmittel verabreicht wird und schließlich, wie die Ergebnisse ausgewertet werden.Stellen Sie das Tier in einen speziellen Sicherheitskäfig und betäuben Sie es durch eine Injektion von Tine und Ketamin, wodurch eine chirurgische Narkose von 30 Minuten ermöglicht wird. Rasieren Sie das Knie und desinfizieren Sie es mit Povidon. Identifizieren Sie das patellare Ligament als einen vorderen elastischen Streifen.Dann führen Sie eine 35-Gauge-Nadel hindurch, um das Gelenk zu erreichen. Injizieren Sie ein Milliliter der bakteriellen Suspension. Die Injektion muss widerstandsfrei erfolgen, um die korrekte intraartikuläre Lage der Nadel zu bestätigen.Stellen Sie das Tier zurück in seinen Käfig und verabreichen Sie eine analgetische Therapie durch tägliche intramuskuläre Injektion von Bovinen. Nach einer Zwischenzeit haben wir zwei Tage. Das Tier zeigt verminderte spontane Schlafbewegungen, was das Vorhandensein einer Gelenkinfektion bestätigt.Die R-Untersuchung kann daher durchgeführt werden. Stellen Sie das Tier in einen speziellen Sicherheitskäfig. Desinfizieren Sie die Stelle hier mit Pov.Setzen Sie einen Katheter mit 24 Gauge in eine geeignete Vene ein und sichern Sie ihn mit einem Adhäsiv. Diese venöse Zugangsstelle dient zur Verabreichung des Kontrastmittels. Betäuben Sie das Tier mittels intramuskulärer Injektion von Ketamin.Platzieren Sie das Tier anschließend bauchseits innerhalb der MR-Knie-Spule. Bei vollständiger Streckung der Knie müssen die Beine an den MR-Tisch fixiert und gegebenenfalls mit Klebeband fixiert werden, um die Streckung aufrechtzuerhalten. Das MRT-Protokoll besteht aus Gradientenecho-T2-gewichteten Sequenzen.Die Sequenz wird bevorzugt, da sie die empfindlichste U-S-P-I-O-Detektion ermöglicht. Hier ist ein Beispiel für die MR-Parameter, die wir derzeit verwenden. Am Ende dieser ersten MR-Untersuchung injizieren Sie langsam das U-S-P-I-O über die Venenleitung und spülen mit einem Milliliter Zellleitung nach.Die zweite MR-Untersuchung wird 24 Stunden nach der Kontrastmittelgabe mit denselben Verfahren wie zuvor beschrieben durchgeführt. Hier sehen Sie zwei axiale T2-gewichtete Gradientenecho-Bilder des Kaninchenknies: links ohne Kontrastmittel, rechts 24 Stunden nach Gabe von USPO.Wie auf dem Bild rechts zu sehen ist, weist ihr Areal mit USPI-beladenen Makrophagen einen Signalverlust mit dunklen Pixeln auf. Die Anzahl der dunklen Pixel korreliert mit dem Eisengehalt und damit mit der Menge an MicroAge-Infiltration. USPI-beladene Makrophagen können histologisch mittels Ein-Puls-Blau-Färbung nachgewiesen werden, wodurch eisenhaltige Zellen als blaue Punkte sichtbar werden. Die Anzahl der dunklen Pixel, die auf einem Einzelbild beobachtet werden, kann mit verschiedenen Softwareprogrammen gezählt werden.Hier ein Beispiel, das die M SGA-Software verwendet, die die Anzahl nach manueller oder automatischer Schwellenwertbestimmung der aktuellen Zonenflächen liefert. USPA OS MRT ermöglicht eine indirekte Beurteilung der Makrophagenverteilung, die im Verlauf der Therapie verfolgt werden kann. Eine Verringerung der Makrophageninfiltration wird mit einer Abnahme der Anzahl dunkler Pixel bei der in-vivo-MRT-Bildgebung assoziiert sein.Mithilfe eines spezifischen Kontrastmittels können Sie die Makrophagenpopulation im Kniegelenk nichtinvasiv bewerten. Während einer Therapie lässt sich dann das Vorhandensein und die Verteilung von Makrophagen ohne Gewebeprobenentnahme und in einem nativen Milieu verfolgen, was für longitudinale Studien von besonderem Interesse ist.

in-vivo-macrophage-imaging-using-mr-targeted-contrast-agent-for

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir beschreiben ein nicht-invasives Verfahren zur Unterscheidung entzündlichen Phasen. Systemische Lieferung von Luminol zeigt Bereiche der akuten Entzündung abhängig MPO-Aktivität in neutrophilen Granulozyten. Im Gegensatz dazu ermöglicht das Einstreuen Lucigenin zur Visualisierung der chronischen Entzündung abhängig Phox Aktivität in Makrophagen.

In-vivo-Imaging-Methode zu unterscheiden, akuten und chronischen Entzündungen

Wir beschreiben eine Mehrfachwinkel-Dreh optischen Abbildungs ​​(Maroi)-System für die in vivo Quantifizierung einer Fluoreszenzmarkierung von Saposin C (SapC), Dioleoylphosphatidylserin (DOPS) nanovesicles geliefert. Der Einsatz Mausmodellen von Krebs und Arthritis, zeigen wir, wie die Signalkurve Maroi Analyse kann für die genaue Zuordnung und biologische Charakterisierung von Krankheitsprozessen eingesetzt werden.

In Vivo Optical Imaging von Hirntumoren und Arthritis mit fluoreszierenden SapC-DOPS Nanovesicles

Kombinierte optische und μCT Bildgebung in einem Mausmodell der orthopädischen Implantatinfektion unter Verwendung eines Biolumineszenz-engineered Stamm von Staphylococcus aureus, sofern die Möglichkeit, die Dynamik der bakteriellen Infektion, sowie die entsprechende Entzündungsreaktion und anatomische Veränderungen in den nichtinvasiven und in Längsrichtung zu überwachen Knochen.

Kombiniert<em&gt; In-vivo-</em&gt; Optische und μCT Imaging-Infektion, Entzündung und Knochenanatomie in einem Orthopädie Implantat-Infektion in Mäuse Monitor

Wir beschreiben ein Protokoll zur Überwachung des Verhaltens von Neutrophilen und Monozyten in Mesenterialvenen unter stationären und entzündlichen Bedingungen mittels intravitaler konfokaler Mikroskopie an anästhesierten Mäusen.

Abbilden Neutrophilen und Monozyten in Mesenterialvenen von Intravitalmikroskopie an narkotisierten Ratten in Echtzeit

Dieses Papier beschreibt die Anwendung von Fluoreszenz - Bildgebung einer aktivierbare optische Abbildungssonde mit der in vivo Aktivität von Schlüsseln Matrixmetalloproteinasen in zwei verschiedenen Versuchsmodellen der Entzündung zu visualisieren.

Nicht-invasiv<em&gt; In vivo</em&gt; Fluoreszenzoptische Bildgebung der entzündlichen MMP-Aktivität unter Verwendung eines aktivierbaren Fluoreszenzbildgebers

Target-spezifische Sonden stellen ein innovatives Tool für die Analyse der molekularer Mechanismen, wie z. B. Protein-Expression in verschiedenen Arten von Krankheiten (z. B. Entzündungen, Infektionen und Tumorgenese). In dieser Studie beschreiben wir eine quantitative dreidimensionale tomographische Bewertung der intestinalen Makrophagen Infiltration in einem Mausmodell der Kolitis mit F4/80-spezifische Fluoreszenz-vermittelten Tomographie.

Fluoreszenz-vermittelten Tomographie für die Erkennung und Quantifizierung von murinen Makrophagen bedingte Darmentzündung

Wir präsentieren Ihnen Methoden, um die phagocytic Fähigkeit der primären murinen Knochenmark stammenden Makrophagen mit Gewebekulturen beschrifteten Myelin Schutt und intrazellulären Lipid Droplet Färbung bewerten.

In-vitro- Phagozytose von Myelin Schutt durch Knochenmark stammenden Makrophagen

Die Auswertung der Gewebeentwicklung in Fraktur Kallus während Endochondral Knochenheilung ist wichtig, den Heilungsprozess überwachen. Wir berichten hier, die Verwendung von einer Magnetresonanztomographie (MRT)-kompatibel Fixateur externe für die Maus Femur erlauben MRI scans während Knochenregeneration bei Mäusen.

In Vivo Bewertung der Fraktur Kallus Entwicklung während der Knochenheilung bei Mäusen mit einem MRI-kompatiblen Osteosynthese Gerät für Maus Femur

Die In-vivo-Bildgebung der Gelenke ist eine wertvolle Technik, um das Migrationsverhalten der Leukozyten und die molekulare Dynamik in den entzündeten Gelenken aufzudecken. Hier stellen wir ein detailliertes Protokoll für die in vivo Bildgebende der Gelenke mit einem Mausmodell der Typ-II-Kollagen-induzierten Arthritis (CIA) vor.

Im lebenden Organismus Die Bildgebung deckt das Wanderverhalten der Leukozyten in den Gelenken auf

Wir entwickelten ein humanes ex-vivo-Transwell-System , das in der Lage ist, akute entzündliche, infektiöse und strukturelle Veränderungen im Synovium zu bewerten.

Ein präklinisches Modell der Synovitis unter Verwendung ex vivo menschlichen Synovialgewebes mit erhaltener Funktion und Architektur

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die intravitale Bildgebung einer abgeschwächten, BSL-2-zugelassenen Mycobacterium tuberculosis. Spannung in der Mauslunge unter Verwendung eines permanenten Lungenfensters. Dieser Ansatz ermöglicht eine longitudinale, einzelzellige Auflösungsanalyse früher Wirts-Pathogen-Interaktionen, einschließlich bacillärer Lokalisation, vaskulärer Dynamik und Makrophagenaufnahme innerhalb derselben Lungenmikroumgebung.

Intravitale Bildgebung der abgeschwächten auxotrophen Mycobacterium tuberculosis in der Mauslunge während früher intravaskulärer Infektion

Lernen Sie die MR-Bildgebung von Makrophagen in septischer Arthritis mit USPIO-Kontrastmitteln. Diese Methode ermöglicht die nicht-invasive Längsbeobachtung von Makrophagen-Infiltration und Therapieansprechen im Kaninchenmodell.

In-vivo-Bildgebung mit MR Makrophagen gezielte Kontrastmittel für die Längs-Auswertung der septische Arthritis

Weitere Videos entdecken