Name: Isolation, Verarbeitung und Analyse von Murine Gingivazellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 47 s
Description: Lernen Sie die Isolation und Aufbereitung muriner Gingivazellen für Durchflusszytometrie. Diese Methode ermöglicht die Analyse verschiedener Zellpopulationen und immunologischer Veränderungen im Gingivagewebe.

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Diese Forschung wurde unterstützt durch Zuschüsse aus der Israel Science Foundation (Nr. 1418/11) an und AHH (Nr. 1933-1912) zu AW, der Deutsch-Israelischen Stiftung für junge Forscher (GIF Young) zu AHH, und die Dr. I unterstützt . Cabakoff Forschung Endowment Fund an der Hebrew University-Hadassah School of Dental Medicine, um AHH und AW.

Bereiten Sie im Voraus: <ul><li> PBS + 2% FCS </li><li> PBS + 2% FCS mit 2 mg / ml Kollagenase Typ II und 1 mg / ml DNAse Typ I (1 ml pro Probe) </li><li> Sterilisiert chirurgische Instrumente </li><li> 0,5 M EDTA-Lösung </li></ul> 1. Obere Gingival Exzision Technik <ol><li> Euthanize Mäusen mit zugelassenen IACUC Führung. </li><li> Schneiden Sie beide Seiten der Mundhöhle, einschließlich der Wangen und des Unterkiefers Ramus mit einem spitz / stumpf gerade Schere. </li><li> Ziehen Sie den Unterkiefer. </li><li> Schneiden Sie die weichen und harten Gewebe in einer gedachten Linie 1 mm hinter den Backenzähnen Drittel mit Standard-Schere. Richten Sie die Schere senkrecht zur Ebene des palatinalen Knochen (2A, blaue Linien). </li><li> Inzision der weichen und harten Gewebe 2 mm hinter den Schneidezähnen (2A, blaue Linien). </li><li> Ziehen Sie den vorderen Teil des Mundes. Die Nasenhöhle ist nach diesem Schritt beobachtet werden. </li><li> Legen Sie die Schereparallel zum Gaumen, legte ein Messer in die Nasenhöhle, sollte die andere Klinge in der Vorhalle einzuschneiden. Schneiden bis zum hinteren Einschnitt (2A, grüne Linien). Wiederholen Sie diesen Schritt auf beiden Seiten des Oberkiefers. Am Ende der Oberkiefer ist vom Rest des Schädels (2B) löst. </li><li> Entfernen Sie den Oberkiefer, schneiden Sie es in der Mitte Naht (Abbildung 2, schwarz gestrichelte Linie) und schneiden Sie die palatinale Gewebe jedes Hemi-Oberkiefer bis zum Erreichen der Alveolarknochen. </li><li> Schälen Sie die gingivalen Gewebe (sowohl Hemi-Oberkiefer) von ihren vorderen Rand mit Adson Pinzette (ohne Zähne). </li><li> Legen Sie das ausgeschnittene Zahnfleisch in einem Teller mit PBS + 2% FCS. </li></ol> 2. Gingival Verarbeitung <ol><li> Setzen Sie den ausgeschnittenen Zahnfleisch in einem Gewebe Kulturschale (35 x 10 mm) mit 1 ml PBS + 2% FCS, 2 mg / ml Collagenase Typ II und 1 mg / ml DNAse Typ I. </li><li> Mince gut das Gewebe mit einem N ° 15 sterile Klinge. </li><li> Transfer das Gewebe von der Platte auf einem 15 ml konischen Röhrchen. </li><li> Waschen Sie die Gewebe / Zellen noch auf der Platte mit 1 ml PBS + 2% FCS und Transfer zum gleichen Reagenzglas. </li><li> Inkubation in einem Schüttler Inkubator für 20 min bei 37 ° C, 200 rpm (Empfehlung: Heizen Sie den Inkubator). </li><li> In 20 ul 0,5 M EDTA und Inkubation für weitere 10 min bei 37 ° C, 200 UpM. </li><li> Füllen Sie das Teströhrchen bis zu 12 ml mit PBS + 2% FCS und Zentrifuge bei 4 ° C, 400 xg für 8 min (Empfehlung: pre-chill die Zentrifuge). </li><li> Überstand entfernen und resuspendieren Zellen mit 2 ml PBS + 2% FCS. </li><li> Filtern Sie die Probe mit einer 70 um Zell-Sieb und sparen Strom durch. </li><li> Zentrifuge bei 4 ° C, 320 xg für 5 min. </li><li> Überstand entfernen und resuspendieren Zellen mit 300 ul PBS + 2% FCS. </li><li> Zählen Sie die Zellen (ca. 5-10 x 10 5 Zellen sind aus einem Oberkiefer erwartet). </li></ol> 3. Extrazelluläre und intrazelluläre AntikörperFärbung für die Durchflusszytometrie-Analyse Es wird empfohlen, in einer Haube arbeiten, mit Lichter aus. Es ist wichtig, um die Zellen in kalter Umgebung konstant zu halten, sowie alle benötigten Materialien. <ol><li> Stain-Zellen gegen extrazelluläre Moleküle durch Zugabe von 0,2-0,5 ug jedes ausgewählte Antikörper pro 1 x 10 6 Zellen in einem Gesamtvolumen von 100 ul. </li><li> Vortex kurz. </li><li> Die Röhrchen für 15 min im Dunkeln bei 4 ° C. </li><li> Waschen der Zellen mit 2 ml PBS + 2% FCS. </li><li> Zentrifuge bei 4 ° C, 320 xg für 5 min. </li><li> Saugen Sie den Überstand und resuspendieren Zellen durch Zugabe tropfenweise, 500 ul kalten BD Cytoperm / Cytofix unter Vortexen. </li><li> Die Röhrchen für 40 min bei 4 ° C im Dunkeln. </li><li> Vortex kurz. </li><li> Waschen Sie die Zellen zweimal mit 1 ml kaltem BD Perm / Wash Buffer und Spin bei 800 xg für 7 min bei 4 ° C. </li><li> Saugen Sie den Überstand bis auf 300 ul. </li><li> Stain Zellen intrazellulär durchZugabe von 1 ug jedes ausgewählte Antikörper pro 1 x 10 6 Zellen in einem Gesamtvolumen von 100 ul. </li><li> Vortex kurz. </li><li> Inkubieren für 30 min im Dunkeln bei 4 ° C. </li><li> Waschen Sie die Zellen zweimal mit 1 ml kaltem BD Perm / Wash Buffer und Spin bei 800 xg für 7 min bei 4 ° C. </li><li> Saugen Sie den Überstand und resuspendieren Zellen durch Zugabe von 300 ul kalten BD Perm / Wash Buffer. </li><li> Vortex kurz. </li><li> Übertragen Sie die Suspension während filtern FACS-Röhrchen. </li><li> Halten Sie die Rohre in einer dunklen und kalten Umgebung bis zur Analyse. </li></ol>

<ol><li>Arizon, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Langerhans+cells+down-regulate+inflammation-driven+alveolar+bone+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Langerhans cells down-regulate inflammation-driven alveolar bone loss.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 109, 7043-7048 (2012).</li>
<li>Listgarten, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of periodontitis.</a> J. Clin. Periodontol. 13, 418-430 (1986).</li>
<li>Kinane, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causation+and+pathogenesis+of+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontol%22%5BJournal%5D)">Causation and pathogenesis of periodontal disease.</a> Periodontol. 25, 8-20 (2000).</li>
<li>Jotwani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+dendritic+cells+infiltrate+the+T+cell-rich+region+of+oral+mucosa+in+chronic+periodontitis%3A+in+situ%2C+in+vivo%2C+and+in+vitro+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Immunol%22%5BJournal%5D)">Mature dendritic cells infiltrate the T cell-rich region of oral mucosa in chronic periodontitis: in situ, in vivo, and in vitro studies.</a> J. Immunol. 167, 4693-4700 (2001).</li>
<li>Graves, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-1+and+tumor+necrosis+factor+antagonists+inhibit+the+progression+of+inflammatory+cell+infiltration+toward+alveolar+bone+in+experimental+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Interleukin-1 and tumor necrosis factor antagonists inhibit the progression of inflammatory cell infiltration toward alveolar bone in experimental periodontitis.</a> J. Periodontol. 69, 1419-1425 (1998).</li>
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<li>Moughal, N. A., Adonogianaki, E., Kinane, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Langerhans+cell+dynamics+in+human+gingiva+during+experimentally+induced+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Buccale%22%5BJournal%5D)">Langerhans cell dynamics in human gingiva during experimentally induced inflammation.</a> J. Biol. Buccale. 20, 163-167 (1992).</li>
<li>Cochran, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+and+bone+loss+in+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Inflammation and bone loss in periodontal disease.</a> J. Periodontol. 79, 1569-1576 (2008).</li>
<li>Taubman, M. A., Valverde, P., Han, X., Kawai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+response%3A+the+key+to+bone+resorption+in+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Immune response: the key to bone resorption in periodontal disease.</a> J. Periodontol. 76, 2033-2041 (2005).</li>
<li>Graves, D. T., Kang, J., Andriankaja, O., Wada, K., Rossa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+to+study+host-bacteria+interactions+involved+in+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oral+Biol%22%5BJournal%5D)">Animal models to study host-bacteria interactions involved in periodontitis.</a> Front Oral Biol. 15, 117-132 (2012).</li>
</ol>

Autoren haben nichts zu offenbaren.

Oberkiefer Zahnfleischgeweben aus einem einzigen Mausklick erhalten sind ausreichend für die Analyse von Sub-Populationen von T-und B-Lymphozyten, sowie ihre Fähigkeit, extra-und intrazellulären Molekülen auszudrücken, wie wir zuvor beschrieben 1. Dennoch, wenn seltenen Zellpopulationen von Interesse sind (z. B. DCs), wird es in Pool Geweben 2-3 Mäuse empfohlen. Zu beachten ist, wenn bevorzugt, ist es möglich, sowohl den Gaumen schälen und Zahnfleischgeweben und dann der Verbrauchsteuer das Zahnfleisch (eine ...

Gingiva ist das weiche Gewebe um den zervikalen Teil der Zähne und deckt den Alveolarfortsatz (Abbildung 1). Das Zahnfleisch ist eine Art von Kau-Mukosa, die weiter in Schleimhaut-Epithel und Bindegewebe (auch als Submukosa oder Lamina propria bekannt) getrennt werden können. Die anatomische Struktur des Zahnfleisches und der angrenzenden Zähne ermöglicht es Bakterien, leben und entwickeln Plaque (Biofilm), die ständig herausfordert die lokale Immunsystem. Als ein Ergebnis entwickelt Entzündungsreaktion in der Gingiva, die unter Umständen gesundheitsschädlich wird - ein Zustand bezeichnet Parodontopathien 2. Grundsätzlich kann Plaque-induzierte parodontalen Erkrankungen in Gingivitis und Parodontitis unterteilt werden. Gingivitis eine reversible Zustand der lokalen Entzündungsreaktion, die das Zahnfleisch beschränkt ist. Periodontitis, auf der anderen Seite, ist eine irreversible zerstörende Verfahren, bei dem die Befestigungsvorrichtung (Alveolarknochen periodontalenLig. Zement und Zahnfleisch) ist 3 zerstört. Das Zahnfleisch wurde vorgeschlagen, sowohl als Effektor und induktive Websites während Parodontalerkrankungen 4 dienen. Menschliche Studien haben vorgeschlagen, dass als Reaktion auf Zahnbelag, Immuneffektorzellen und Moleküle dynamisch infiltriert oder Abreise das Zahnfleisch 5-7. Diese Aktivität wurde gezeigt, dass eine wichtige Rolle bei der parodontalen Zerstörung 8,9 spielen. Während Daten von diesen Studien lieferten wertvolle Informationen über diesen pathologischen Prozess, die Arbeit mit menschlichen Geweben erzeugt besitzen erhebliche ethische, technische und experimentelle Einschränkungen. Die Entwicklung von experimentellen Modellen erlaubt Ursache-Wirkungs-Experimente über den Einsatz transgener Mäuse und in vivo Interventionen 10. Dadurch erhöht unser Wissen über die Mechanismen in Parodontitis beteiligt sich während der letzten zwei Jahrzehnte. Trotzdem aufgrund der Komplexität der periodontalen Krankheiten bestehteine Debatte über die Art der lokalen Immunantwort Erleichterung Gewebezerstörung. Es ist auch ein Mangel in unserem Verständnis von der Funktion des zentralen Immunzellen in das Zahnfleisch während Parodontalerkrankungen. Es ist somit wesentlich, pathologische entzündliche Ereignisse in das Zielgewebe von der Krankheit, der Gingiva zu studieren.

<table><tbody><tr><td>Kollagenase Typ II</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td>CLS-2</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>SIGMA</td><td>DN25-1G</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>SIGMA</td><td>E6758-100G</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's PBS</td><td>SIGMA</td><td>D8537</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum </td><td>Biological Industries</td><td>04-121-1</td><td>Hitzeinaktivierter</td></tr><tr><td>vakuumbetriebener</td><td>Filterstrahl Biofil</td><td>FPE-204-500</td><td></td></tr><tr><td>5 ml Polystyrol mit rundem Boden Schlauch</td><td>BD Falcon</td><td>352052</td><td></td></tr><tr><td>Cell Strainer 70 &mu; m</td><td>SPL Lifesciences</td><td>93070</td><td></td></tr><tr><td>Gewebekulturschale 35&#215; 10 mm</td><td>NUNC</td><td>153066</td><td></td></tr><tr><td>BD Cytofix/Cytoperm</td><td>BD</td><td>554714</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Maus CD11c Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>117305</td><td>Klon N418</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD45.2 Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>109819</td><td>Klon 104</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD4 Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>100413</td><td>Klon GK1.5</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD8a Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>100733</td><td>Klon 53-6.7</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD3 Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>100214</td><td>Klon 17A2</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD326 (Ep-CAM) Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>118219</td><td>Klon G8.8</td></tr><tr><td>Anti-Maus CD207 (Langerin) Antikörper</td><td>Imgenex</td><td>DDX0362D</td><td>Klon 929F3.01</td></tr><tr><td>Anti-Maus I-Ad (MHC-II) Antokörper</td><td>Biolegend</td><td>115010</td><td>Klon 39-10-8</td></tr><tr><td>LSR II Durchflusszytometer</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FlowJo Software v 7.6.5</td><td>Tree Star</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

isolation, verarbeitung und analyse von murine gingivazellen

Isolation, Processing and Analysis of Murine Gingival Cells

Wir haben eine Technik entwickelt, um genau zu isolieren und zu verarbeiten Maus Zahnfleisch für die Durchflusszytometrie und molekularbiologische Studien entwickelt. Das Zahnfleisch ist eine einzigartige und wichtige Gewebe Immunmechanismen zu studieren, weil es in Immunantwort gegen orale Biofilme, die Parodontalerkrankungen führen könnten beteiligt ist. Darüber hinaus ermöglicht die Nähe des Zahnfleisches zu Alveolarknochen Gewebe auch das Studium Knochenumbau unter entzündlichen Bedingungen. Unsere Methode liefert große Mengen von Immunzellen, die Analyse selbst seltenen Zellpopulationen wie Langerhans-Zellen und regulatorischen T-Zellen ermöglicht, wie wir bereits gezeigt, 1. Verwendung Mäusen zu lokalen Immunreaktionen in Alveolarknochenschwund bei Parodontopathien beteiligt studieren ist aufgrund der Verfügbarkeit von verschiedenen immunologischen und experimentelle Werkzeuge vorteilhaft. Allerdings lassen sich aufgrund ihrer geringen Größe und der relativ unbequem Zugang zum murinen Zahnfleisch, vermieden viele Studien Prüfung von this kritischen Gewebe. Das Verfahren in dieser Arbeit beschriebenen erleichtern könnte gingivalen Analyse, die hoffentlich unsere Unterbewertung auf die orale Immunsystem und seine Rolle während der Parodontalerkrankungen wird zunehmen.

Beispiele für Durchflusszytometrie-Analyse auf Gingivazellen vorgestellt. Gingival Zellen aus 2 Mäuse wurden vereinigt in einem LSR II Durchflusszytometer laufen und unter Verwendung FlowJo Software. 3A demonstriert die Verteilung der gingivalen Zellen aus naiven Mäusen in einer Seitwärts-Streulicht (SSC) gegen forward scatter (FSC) Grundstück. Gating Strategie zur Identifizierung (i) Lymphozyten (ii) Monozyten / dendritische Zellen und (iii) Granulozyten angegeben. Zum Vergleich dazu präsentieren wir a...

Diese Studie beschreibt ein effizientes Verfahren zur Isolation und Behandlung Gingiva von der Maus Mundhöhle, um eine Einzelzellen-Kultur zu erzeugen. Die resultierenden Zellen können weiter für die Durchflusszytometrie und molekulare Studien eingesetzt werden.

Isolation, Verarbeitung und Analyse von Murine Gingivazellen

We have developed a technique to precisely isolate and process murine gingival tissue for flow cytometry and molecular studies. The gingiva is a unique ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, das mirin Zahnfleisch präzise zu isolieren und aufzubereiten, um anschließend eine Durchflusszytometrie-Analyse durchführen zu können. Dies wird erreicht, indem das Zahnfleisch zunächst chirurgisch sorgfältig isoliert wird. Anschließend wird das entfernte Gewebe aufgearbeitet, um eine Einzelzell-Suspension zu erzeugen.Anschließend erfolgen die extrazelluläre und intrazelluläre Färbung mit Antikörpern. Schließlich wird die Probe mittels Durchflusszytometrie analysiert. Letztendlich können Ergebnisse erhalten werden, die unterschiedliche Zellpopulationen im Zahnfleisch sowie zelluläre Veränderungen im Gewebe nach Exposition gegenüber einer immunologischen Noxe durch die Analyse mittels Durchflusszytometrie zeigen.Der Hauptvorteil dieser Technik im Vergleich zu anderen Methoden wie der OC-Chemie oder der Mono-Fluoreszenz besteht darin, dass sie eine schnelle und einfache Methode zur Analyse einer großen Anzahl von Zellen darstellt, die gleichzeitige Untersuchung mehrerer Variablen ermöglicht und zudem die Sortierung verschiedener Zelltypen für weitere Experimente erlaubt. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der

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Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Ein optimiertes Protokoll für die Isolierung von Stammzellen aus der Maus Speicheldrüse beschrieben. Die Methode nutzt enzymatische und mechanische Verdauung, und erlaubt Isolierung salispheres enthaltenden Zellen mit Eigenschaften von Stammzellen.

Isolierung von Maus Speicheldrüsen Stem Cells

Quelle: Choi, Y. S., et al. In-situ-Nachweis von Bakterien in paraffineingebetteten Geweben mit einer digoxin-markierten DNA-Sonde, die auf 16S-rRNA abzielt. J. Vis. Exp. (2015).Dieses Video demonstriert die In-situ-Detektion von Bakterien in Maus-Zahnfleischgewebeschnitten mit digoxin-markierten DNA-Sonden, die auf bakterielle DNA abzielen. Der Abschnitt wird mit der Sonde inkubiert. Alkalische Phosphatase-konjugierte Antikörper, die spezifisch für Digoxin sind, werden hinzugefügt. Endogene...

In-situ-Nachweis von Bakterien in Maus-Zahnfleischgewebeschnitten

Dieses Video zeigt das Isolierungsverfahren des zahnfleischartigen Immunzellnetzwerks aus einem Mausmodell. Durch die enzymatische Verdauung wird das Zahnfleischgewebe von den anhaftenden Zähnen und Knochen freigesetzt, das weiter mechanisch verdaut wird, wodurch Immunzellen aus dem Zahnfleisch freigesetzt werden. Die isolierten Zellen sind bereit für immunologische Experimente.

Isolierung eines gingivalen Immunzellnetzwerks aus murinen Zahnblöcken

Ein Schlüssel zur erfolgreichen Untersuchung der Mikroglia-Biologie ist die Erhaltung der Immunfunktion Mikroglia ex vivo bei der Isolierung von ZNS-Gewebe. Trenn Mikroglia über Dreh Schütteln Ergebnisse in hochreiner und immunofunctional Zellkulturen durch Fluoreszenz-Bildgebung, Immunzytochemie, und ELISA folgenden Mikroglia-Aktivierung mit der proinflammatorische Stimuli Lipopolysaccharide (LPS) und Pam 3 4 CSK (Pam) bewertet.

Isolation kortikaler Mikroglia mit bewahrten Immunophänotyp und Funktionalität aus Murine Neugeborene

Wir haben ein Verfahren zur Isolierung, phänotypische Charakterisierung und funktionelle Analyse von Immunzellen aus murinen Gingiva etabliert.

Isolierung, Charakterisierung und funktionelle Untersuchung des Zahnfleisch Immune Cell Network

Bemühungen, Mikroglia-Funktion im Detail zu verstehen haben durch das Fehlen von Mikroglia Kultur Modelle behindert worden, die die Eigenschaften der Reifen in Vivo Mikroglia rekapitulieren. Dieses Protokoll beschreibt einen Isolation und Kultur Ansatz entwickelt, um robuste überleben stark verzweigten Reife Ratte Mikroglia Bedingungen definiert-Mittel zu erhalten.

Isolation und Kultur von Nagetier Microglia zur Förderung einer dynamisches verzweigt Morphologie in serumfreien Medium

Die Tränendrüse (LG) hat zwei Zelltypen, die α-glatte Muskelaktin (αSMA) ausdrücken: Myoepithelialzellen (MECs) und Pericytes. MECs sind ektodermaler Herkunft, der in vielen Drüsengeweben zu finden ist, während die Periicyten vaskuläre glatte Muskelzellen endodermalen Ursprungs sind. Dieses Protokoll isoliert MECs und Periicytes von murinen LGs.

Isolierung von myepithelialen Zellen aus der Urmorine, Lacrimal und Submandibular Drüsen

Hier präsentieren wir ein Protokoll zur In-vitro-Isolierung mehrerer Gliazellpopulationen aus einem Maus-ZNS. Diese Methode ermöglicht die Segregation von regionalen Mikroglia, Oligodendrozytenvorläuferzellen und Astrozyten, um die Phänotypen jedes einzelnen in einer Vielzahl von Kultursystemen zu untersuchen.

Dissektion und Isolierung von murinen Glia aus mehreren Regionen des zentralen Nervensystems

Hier stellen wir eine modifizierte Methode zur Isolierung und Kultur menschlicher Zahnfleischepithelzellen vor, indem wir den Rock-Inhibitor Y-27632 zur traditionellen Methode hinzufügen. Diese Methode ist einfacher, weniger zeitaufwendig, verbessert die Stammzelleigenschaften und produziert eine größere Anzahl von Epithelzellen mit hohem Potenzial sowohl für das Labor als auch für klinische Anwendungen.

Isolierung und Kultur primärer humaner Zahnfleischepithelzellen mit Y-27632

Das aktuelle Protokoll stellt eine schnelle, effiziente und schonende Methode zur Isolierung einzelner Zellen dar, die für die Einzelzell-RNA-seq-Analyse aus einem kontinuierlich wachsenden Mausschneidezahn, Mausmollaren und menschlichen Zähnen geeignet sind.

Schnelle Isolierung einzelner Zellen aus Maus- und menschlichen Zähnen

Lernen Sie die Isolation und Aufbereitung muriner Gingivazellen für Durchflusszytometrie. Diese Methode ermöglicht die Analyse verschiedener Zellpopulationen und immunologischer Veränderungen im Gingivagewebe.

Isolation, Verarbeitung und Analyse von Murine Gingivazellen

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