Name: Technische Aspekte der Maus aortokavaler Fistel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 12 s
Description: Erfahren Sie eine nahtfreie Technik zur Erstellung einer aortokavalen Fistel bei Mäusen. Diese Methode minimiert Fremdmaterialien und ermöglicht präzise Blutflussmessungen mittels Doppler-Ultraschall für kardiovaskuläre Forschung.

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Diese Arbeit wurde zum Teil durch die National Institutes of Health Zuschuss R01-HL095498 sowie mit den Ressourcen und der Nutzung von Einrichtungen an der VA Healthcare System Connecticut, West Haven, CT unterstützt.

1. Anästhesie und Pre-operative Verfahren <ol><li> Induktion der Narkose Zulassung durch die zuständige Institutional Animal Care und Use Committee erhalten. Männlich C57/black Mäuse im Alter von 10 Wochen werden betäubt. Deliver 4% Isofluran mit 0,8 L / min Sauerstoff zu einer Plexiglas-Box über eine Isofluran Verdampfer und platzieren Sie die Maus im Inneren. Alternativ kann, wenn der Chirurg bevorzugt ist, kann intraperitoneal Anästhesie eingesetzt werden. </li><li> Erhaltung Anästhesie Nach Bestätigung der Anästhesie durch mangelnde Reaktion auf toe Prise wird die Maus auf dem Operationstisch in Rückenlage mit einem Silikon-Maske aufsetzen. Isofluran wird auf 2% reduziert, um geeignete Anästhesie zu halten. </li><li> Haarentfernung Ventral Haar ist vom Hals bis Unterleib mit einem Haarentferner entfernt. Haarentfernung ist bevorzugt, weil das Haar, das links mit einem Rasierer ist mit dem Doppler-Ultraschall stören könnten. </li></ol> 2. Präoperative Ultrasound <ol><li> Ziele des Ultraschalls Doppler-Ultraschall-Untersuchung vor der Operation AVF, um so die Basis-Ebene Erkenntnisse, die mit postoperativen Befunde verglichen werden, um anatomische und physiologische Veränderungen sehen können aufnehmen durchgeführt. </li><li> Punkte der Beobachtung Die Halsschlagader, supra-und infra-renal unteren Hohlvene (IVC) und abdominalen Aorta untersucht sowohl mit Puls-Doppler-und B-Modus. </li><li> Messungen Verwendung des B-Modus Durchmesser jedes Gefäß gemessen wird. Darüber hinaus werden Maximalgeschwindigkeit (systolische Spitzengeschwindigkeit in Arterien) und Wellenformen in jeder der Messpunkte oben beschrieben aufgezeichnet. </li></ol> 3. Operative Verfahren <ol><li> Maus Vorbereitung Bereiten Sie die Einstichstelle mit einem Antiseptikum und weiterhin angemessene aseptische Technik bei der Operation einschließlich der Verwendung eines Operationstuch, sterile Handschuhe und Instrumente etc. </li><li> Laparotomie Mittellinie Bauchschnitt ist f gemachtrom unteren Rand der Leber bis knapp über dem Schambein. </li><li> Die Exposition der Aorta und IVC. Eine Aufrollvorrichtung eingesetzt und alle Eingeweide werden aus der Bauchhöhle gezogen, um die rechte Seite und gehalten eingewickelt in Gaze mit Kochsalzlösung eingeweicht. Präparieren Sie die Membran, die das Retroperitoneum und unteren Dickdarm verbindet Großansicht der Aorta und der IVC bekommen. Üben Sie Druck auf die Blase, wenn es erweitert und bekommt in Weg. </li><li> Exposition der Einstichstelle Einstichstelle wird zwischen der Hälfte bis drei Viertel der Distanz sein von links Nierenvene zu Aortenbifurkation. (Abbildung 1) Präparieren Sie den linken Rand der Aorta, so dass es punktiert werden können. Beachten Sie, dass die Aorta etwa 45 Grad hinter der IVC positioniert ist, und es muss nach hinten neben dem linken seziert werden. (Abbildung 2) Der wichtigste Punkt dieser Operation ist nicht zwischen der Aorta und IVC sezieren. Halten Sie weit weg von ihnen. </li><li> Exposure der Klemme Website des AORta Präparieren Sie die infrarenalen Aorta aus den umliegenden Geweben. Achten Sie darauf, die IVC auf der linken und links Nierenvenen mit seinen Nebenflüssen auf der rechten Seite zu verletzen. </li><li> Spannen der Aorta Spannen Sie den proximalen Aorta durch Anlegen Mikrochirurgie Clips. </li><li> Rotation der Aorta Durch Ergreifen des Bindegewebes um die Aorta, drehen die Aorta, so dass die Punktion von leicht dorsale Seite der Aorta (2) hergestellt werden kann. </li><li> Die Punktion der Aorta bis zur IVC Halten Sie die Aorta in einer gedrehten Position, Punktion der Aorta bis zur IVC mit einer 25 G Nadel. (Abbildung 2) Wenn dies gelingt, kann die Nadel durch die dünne Wand IVC gesehen werden. </li><li> Hämostase Durch Ziehen der retroperitonealen Gewebe, einschließlich der Muskeln, wickeln Sie die Einstichstelle der Aorta. Nicht komprimieren die Aorta gegen die IVC, wie es wolle Gerinnsel die AVF (Abbildung 3). </li><li> De-Klemmen der Aorta Nach Bestätigungder primären Hämostase, de-klemmen die Aorta. Zusätzliche Blutungen auftreten, aber es kann mit weiteren Kompression vorstehend beschrieben, gestoppt werden. Nach de-Klemmung kann arterielle Blut gesehen, das in den IVC statt dunkel venösen Blutfluss werden. </li><li> Schließung des Bauches Bringen Sie die Eingeweiden in seiner natürlichen Position und schließen Sie den Bauch. </li></ol> 4. Post-operative Verfahren <ol><li> Post-operative Betreuung Nach Schließung des Bauches wird Isofluran gestoppt. Post-operative Versorgung einschließlich Analgesie und Wundversorgung wird in Übereinstimmung mit den Anweisungen von Institutional Animal Care und Use Committee empfohlen angewendet. Für Analgesie verwenden wir Buprenorphin bei 0,1 mg / kg alle 12 h intrasmuscularly für 24 Stunden nach den chirurgischen Eingriffen. </li><li> Post-operative Ultraschall Am ersten Tag nach der Operation wird Doppler-Ultraschall durchgeführt, um die AVF zu bestätigen. Darüber hinaus werden andere Variablen gemessen, um die Änderungen von der präoperativen überprüfenWerte. </li></ol>

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</ol>

Es gibt mehrere Berichte, die AVF beschrieben wurden an Ratten, einschließlich femoralis AVF, 6, 7 Halsschlagader zu AVF 8 und aorto-Kava AVF Halsschlagader. 9, 10 Die Ratte ist um ein Mehrfaches größer als die Maus, die einen leichteren Chirurgie an der Ratte im Vergleich zu die Maus. Um dennoch die Vorteile der Maus genetischen Stämme und Varianten, das Verfahren muss erweitert werden, um Maus-Modellen erweitert werden. Mehrere bisher veröffentlichten Berichte führte die AVF-Modell bei...

Die häufigste Option für Nierenersatztherapie bei Patienten mit terminaler Niereninsuffizienz ist die Hämodialyse gewählt. Zugang für die Hämodialyse wird durch arteriovenöse Fistel (AVF), arteriovenöse Transplantats oder temporäre Katheterplatzierung durchgeführt. Obwohl AVF der bevorzugte Modus des Zugangs sind, AVF weitem noch nicht perfekt. Ein-Jahres-Primär AVF Durchgängigkeitsraten sind nur 60-65%, mit vielen Ausfällen aufgrund Neointimahyperplasie. Die Molekularbiologie und Physiologie der normalen AVF Bildung und maladaptive Bildung bleibt schlecht charakterisiert. Als solches ist es wesentlich zu verbessern AVF Ergebnisse mit zugehörigen Verstärkung in Verständnis der Regulation der Fistel gewonnen werden. 1-3 Belichtung einer Vene arteriellen Fluss häufig in Zusammenhang mit Venentransplantaten die direkte Modelle von chirurgischen Bypass sind. 4, 5 untersucht Obwohl Venentransplantaten und AVF ähnlich Setzen einer Vene zu einem arteriellen Umgebung gibt es mehrere kritische differences zwischen ihnen. Erstens ist der Widerstand des distalen Abfluss Bett wesentlich niedriger AVF, die AVF Drains in den rechten Vorhof während die Venentransplantat Drains der oft erkrankten distalen kleinen Arterien, was zu einer erhöhten Durchblutung und Schubspannung in der AVF. Zweitens kann das Blut im venösen Teil des AVF eine Mischung von venösen und arteriellen Blut, was zu niedrigeren Sauerstoffversorgung im Vergleich zu den rein arteriellen Inhalt in die Vene Transplantat. Drittens wird die Ader in der AVF nicht von seinem Bett entfernt, was zu Erhaltung seiner vaso venorum und nervös Innervationen, verglichen mit der vollständigen Umsetzung der Venentransplantat in den arteriellen Bett. Schließlich ist die Anzahl der in der Regel zwei Anastomosen bei Gefäßplastiken während ein AVF typischerweise nur einen. In dieser Studie stellen wir ein Mausmodell aortokavaler Fistel, die für die Untersuchung von AVF verwendet werden können.

<table><tbody><tr><td>Vevo 770 Ultraschallgerät</td><td>Visualsonics</td><td>20-60 Mhz Scankopf; RMV-704</td><td></td></tr><tr><td>Gefäßklemme</td><td>Roboz Chirurgisches Instrument Co.</td> KG<td>RS-5424</td><td></td></tr><tr><td>Klemmzange zum Anlegen</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5410</td><td></td></tr><tr><td>25 Gauge Nadel</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD PrecisionGlide Nadel 25G x 7/8 #305124</td><td></td></tr></tbody></table>

technische aspekte der maus aortokavaler fistel

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technische Aspekte der Erstellung eines arteriovenösen Fistel in der Maus werden diskutiert. Unter Vollnarkose wurde Bauchschnitt vorgenommen und der Aorta und Vena cava inferior (IVC) ausgesetzt sind. Die proximalen infrarenale Aorta und die distale Aorta für Klammer Platzierung und Punktion seziert, beziehungsweise. Besondere Aufmerksamkeit wird bezahlt, um zwischen Dissektion der Aorta und der IVC vermeiden. Nach dem Einspannen der Aorta wird eine 25 G Nadel zu durchstechen beide Wände der Aorta in die IVC verwendet. Das umgebende Bindegewebe ist für blutstillende Kompression verwendet. Erfolgreiche Gründung des AVF zeigt pulsatile arterielle Durchblutung der IVC. Eine weitere Bestätigung der erfolgreichen AVF kann durch postoperative Doppler-Ultraschall erreicht werden.

Nach dem Training, ist das Überleben am ersten postoperativen Tag in der Regel über 95%; bei postoperativen Tag 7 war die Überlebensrate 91,3% Abbildungen 1 und 2 zeigen die ideale Einstichstelle in koronalen und Querschnitte;. Platzierung der Punktion Website ist entscheidend für die Erzielung guter Überleben ohne übermäßige Blutung. Intra-operative Todesfälle und frühen postoperativen Todesfälle sind in der Regel aufgrund von Blutungen. Dies neigt dazu, mit übermäßiger Dissektion zwischen der Aorta un...

Das Ziel ist es, eine arteriovenöse Fistel, die einfach und reproduzierbar herzustellen. Diese Methode verwendet keine Nähte oder Kleber. Daher können die Proben mit der geringsten Menge an Fremdmaterialien für die Analyse verwendet werden.

Technische Aspekte der Maus aortokavaler Fistel

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Das allgemeine Ziel dieses Verfahrens besteht darin, erfolgreiche Aorten-Kava-Fisteln anzulegen, was erreicht wird, indem zunächst vorsichtig die Aorta in der Nähe der Einstichstelle präpariert wird. Anschließend wird die Aorta proximal zur gewünschten Position der Aorta-cava-Fistel abgeklemmt. Danach wird mit einer 25-Gauge-Nadel ein Durchstich von der linken Aorta zur unteren Hohlvene vorgenommen.Schließlich wird die Hämostase erreicht, ohne die aortocavale Fistel zu verschließen. Abschließend wird mittels Doppler-Ultraschall ein Anstieg des Blutflusses in der Vena cava nachgewiesen. Der Hauptvorteil dieser Technik gegenüber bestehenden Methoden wie der aortocavalen Fistel nach der Osmose-Methode besteht darin, dass sie eine einfache Methode ist, die in kurzer Zeit durchgeführt werden kann und keine Nahtmaterialien erfordert, für die vor der Operation Zeit und Schulung nötig wären.Verwenden Sie die Puls-Doppler-Sonographie, um Basismessungen der suprarenalen und infrarenalen Vena cava inferior oder IVC sowie der Aorta abdominalis im B-Modus durchzuführen. Messen Sie den Durchmesser jedes Gefäßes sowie die maximale Geschwindigkeit und die Wellenform an jedem Messpunkt. Beginnen Si

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir beschreiben ein Verfahren, bei dem ein Abschnitt der Bauchaorta von einer Maus transplantiert orthotopisch wird knapp unterhalb der Nierenarterien in einer allogenen oder syngenen Empfänger. Diese Technik kann in Untersuchungen, bei denen die Transplantation von grossen Arterien von einheitlicher Größe als vorteilhaft erachtet wird nützlich.

Orthotopen Aortic Transplantation in Mäuse für das Studium der Vascular Disease

Dieses Video zeigt eine Methode zur Generierung eines Maus-Aorten-Interpositionsmodells, um die alloimmuninduzierte vaskuläre Abstoßung zu untersuchen. Nach dem Platzieren einer anästhesierten Spendermaus in Rückenlage wird die infrarenale Bauchaorta (IAA) sorgfältig von den umgebenden Strukturen isoliert. Verzweigte Gefäße werden ligiert und beide Enden der IAA werden geklemmt, um den Blutfluss vor der Resektion zu verhindern. Anschließend wird die Spender-IAA in eine allogene Empfängermaus...

Ein Maus-Aorten-Interpositionsmodell zur Untersuchung der Alloimmun-induzierten Gefäßabstoßung

Wir beschreiben Protokolle für unseren Maus Transplantat arteriosclerois (GA)-Modelle, die unter Zwischenschaltung einer Maus Gefäßsegmentes beinhalten in einen Empfänger des gleichen Inzuchtstammes. Durch Rückkreuzen zusätzliche genetische Veränderungen in den Behälter Spender kann das Modell beurteilen die Wirkung bestimmter Gene auf GA.

Mausmodelle für Graft Arteriosklerose

Wir beschreiben ein Verfahren zum Erzeugen einer zuverlässigen Modell der zerebralen venöse Hypertonie in der adulten Maus. Dieses Modell ist vielfältig beschrieben und geprüft bei der Ratte ist. Diese neue Gegenstück in den Mäusen eröffnet die Möglichkeit der Verwendung von gentechnisch veränderten Tieren und verbreitert, wodurch die Anwendungen des Modells.

Erwachsene Maus venöse Bluthochdruckmodell: A. carotis communis, um äußere Jugularvene Anastomose.

Wir beschreiben ein Protokoll für die Aorteninterpositionstransplantation bei Mäusen. Ziel des Protokolls ist es, ein Modell zur Verfügung zu stellen, mit dem pathologische Prozesse und therapeutische Strategien, die für alloimmune Reaktionen in den Arterien relevant sind, und die daraus resultierenden arteriellen Veränderungen, die zum Versagen von Organtransplantaten beitragen, untersucht werden können.

Maus-Modell der Alloimmune-induzierte Gefäßabstoßung und Transplantat-Arteriosklerose

Hier präsentieren wir ein Mausmodell des Versagens von arteriovenösen Fisteln (AVF), in das eine klinisch relevante Anastomosenkonfiguration integriert ist. Dieses Modell kann verwendet werden, um die Pathophysiologie zu untersuchen und mögliche therapeutische Interventionen zu testen.

A Novel Mausmodell der arteriovenöse Fistel Ausfall: Der chirurgische Eingriff im Detail

Nach dem Punktieren der Aorta durch die untere Hohlvene (IVC), um eine Aorto-Kaval-Fistel in der Maus zu erzeugen, wird die Lösung, die ein Medikament enthält, über dieselbe Nadel in die IVC infundiert, gefolgt von der Inkubation. Diese Methode ermöglicht eine robustere Verabreichung des Wirkstoffs an das venöse Endothel im Vergleich zum externen Weg.

Intraluminale Drug Delivery auf die Maus arteriovenöse Fistel Endothel

Eine aortocavale Fistel wurde durch Daspunktieren der murinen Infra-Nieren-Aorta durch beide Wände in die untere Vena cava geschaffen und es folgte die Schaffung einer Stenose in ihrem Abfluss durch partielle Ligation der unteren Vena cava. Dieses reproduzierbare Modell kann verwendet werden, um zentrale venöse Stenose zu studieren.

Murine Modell der zentralen venösen Stenose mit Aortocaval Fistel mit einem Abfluss Stenose

Dieses Protokoll beschreibt die chirurgischen Schritte der Bildung einer musinen gemeinen iliakalen arteriovenösen Fistel. Wir haben dieses Modell entwickelt, um die Pathophysiologie der Gliedmaßen zu untersuchen, die mit dem Zugang zur Hämodialyse zusammenhängt.

Ein murines Modell der Hämodialysezugangsbedingten Handfunktionsstörung

Dieses Protokoll beschreibt die konsekutive Implantation einer osmotischen Pumpe zur Induktion eines Bauchaortenaneurysmas durch Angiotensin-II-Freisetzung bei Mäusen mit Apolipoprotein E (ApoE)-Mangel und eines vaskulären Zugangsports mit einem Jugularvenenkatheter zur wiederholten medikamentösen Behandlung. Die Überwachung der Aneurysmaentwicklung durch 3D-Ultraschall wird trotz dorsaler Implantate effektiv durchgeführt.

Medikamentöse Behandlung mittels zentralvenösem Katheter in einem Mausmodell des Angiotensin-II-induzierten Bauchaortenaneurysmas und Überwachung mittels 3D-Ultraschall

Dieses Protokoll stellt die Etablierung und Bestätigung eines postnatalen Modells der rechtsventrikulären Volumenüberlastung (VO) bei Mäusen mit abdominaler arteriovenöser Fistel (AVF) dar, das angewendet werden kann, um zu untersuchen, wie VO zur postnatalen Herzentwicklung beiträgt.

Etablierung und Bestätigung eines postnatalen Mausmodells mit rechtsventrikulärer Volumenüberlastung

Erfahren Sie eine nahtfreie Technik zur Erstellung einer aortokavalen Fistel bei Mäusen. Diese Methode minimiert Fremdmaterialien und ermöglicht präzise Blutflussmessungen mittels Doppler-Ultraschall für kardiovaskuläre Forschung.

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