Name: Intraduktale Injection für Lokalisierte Drug Delivery auf die Maus Milchdrüse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-04T23:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: Lernen Sie die nicht-invasive intraduktale Injektion zur lokalisierten Wirkstoffabgabe in die Maus-Milchdrüse. Diese Methode ermöglicht gezielte Studien zur Genfunktion in Mammagewebe und Brustkrebsforschung.

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Die Autoren bedanken sich bei Michael Goldberg zur Herstellung von stabilisierten siRNA-Lösung und Heather Tobin für ihre Unterstützung bei den Tieren bedanken. Diese Studie wurde von DOD Innovator Award W81XWH-08-1 bis 0659 um DEI finanziert. Die Postdoc-Ausbildung von SK wurde von der Susan G Komen Stiftung (KG101329) unterstützt. Die Autoren bedanken sich bei Kristin Johnson für die Vorbereitung der schematische danken.

1. Vorbereitung der Injektionslösung <ol><li> Planen 0,2% Evans-Blau-Farbstoff in phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) oder eine andere wässrige Lösung von Interesse. Diese Vitalfarbstoff ist nützlich für die Beurteilung des Erfolgs der intraduktalen Injektionen und wird als Visualisierungshilfe empfohlen, bei der Entwicklung von Know-how in der Technik. </li></ol> Das erforderliche Volumen hängt von der Anzahl und Lage der Drüsen zu injizierenden abhängen. Alle 10 Brustdrüsen weiblicher Mäuse injiziert werden kann, aber aufgrund der geringeren Größe der Kabelverschraubung sind Drüsenpaare 1 und 5 in der Regel mit 10 ul Lösung injiziert. Alle anderen Milchpaare werden mit 20 &amp;mgr; l injiziert. Diese Mengen reichen aus, um den gesamten duktalen Baum zu füllen. 2. Die präoperative Vorbereitung <ol><li> Nehmen Sie das Körpergewicht von jeder Maus. Wie bei allen präklinischen Studien sollten Tiergewichte regelmäßig überwacht werden (zweimal pro Woche oder länger), um mögliche Toxizität zu beurteilen. </li><li> Anesthetize die mouse mit einem Isofluran Kammer und gelten Auge Schmiermittel. Während des Verfahrens Mäusen wird weiterhin mit eingeatmeten Konzentration von 2-4% Isofluran in Sauerstoff über eine Nasenkegel betäubt werden. Die Maus für Änderungen der Atemfrequenz sorgfältig zu überwachen, die Anpassung der Höhe der Isofluran entsprechend. </li><li> Injizieren Meloxicam (5-10 mg / kg) subkutan vor dem Verfahren, wie Analgesie. </li><li> Tragen Sie eine Over-the-counter-Haarentfernung Creme auf die Brustwarze. Warten Sie 5 min und entfernen sanft lose Haare mit einem Baumwoll-Spitze-Applikator mit kreisenden Bewegungen. Entfernen Sie die Creme mit feuchten Papiertüchern mit warmem Wasser benetzt. Rasur aufgrund der Gefahr einer Beschädigung der Brustwarzen empfohlen. </li><li> Sichern Sie die Maus unter dem Stereoskop durch leichtes Abklebewerkzeugs die Extremitäten. </li><li> Saubere Injektionsstelle bei Alkoholtupfer. </li></ol> 3. Intraduktale Injektion <ol><li> Suchen Sie geeignete Brustwarzen unter dem Stereoskop eingespritzt werden. Verwenden feinen Mikro Sezieren tweezers, jede tote Haut, die die Brustwarze Öffnung abdeckt entfernen. </li><li> Last 10-20 ul Injektionslösung in einen 50 ul-Spritze mit einer 33 G Nadel Metall Nabe befestigt. Manchmal ist nach der Injektion kleiner Mengen (1 ul oder weniger) kann der Nippel beim Herausziehen der Nadel auslaufen. Daher ist es empfehlenswert, 11 oder 21 &amp;mgr; l Injektion jeweils für den möglichen Verlust zu berücksichtigen. </li><li> Halten Sie die Brustwarze sanft mit den feinen Pinzette und leicht anheben, um sie für die Injektion zu positionieren. Es ist nicht notwendig, den Nippel zu schneiden. </li><li> Injizieren Sie die Lösung langsam, um mögliche Schäden durch sich schnell bewegende Flüssigkeit in den duktalen Lumen zu minimieren. Die Einspritzgeschwindigkeit sollte bei etwa 40 ul / min gehalten werden. </li></ol> 4. Postoperative Behandlung <ol><li> Beachten Sie die Injektionsstelle. Es sollte keine Anzeichen von Trauma an der Brustwarze umgebenden Bereich oder Gewebe sein. Schwellung im Bereich um die Brustwarze zeigt wahrscheinlich eine Brustfettpolster Injektion Rather als eine erfolgreiche intraduktale Injektion. </li><li> Nehmen Sie das Tier von der Nase Kegel-und an einem separaten Käfig für die Verwertung. Setzen Sie den Käfig unter einer Wärmelampe zu Unterkühlung zu verhindern, und helfen bei der Wiederherstellung. Mäuse werden einzeln untergebracht und wird eng überwacht werden, bis sie das Bewusstsein und die Mobilität wieder zu erlangen. </li></ol> 5. Analyse von Brustdrüsengewebe <ol><li> Nach Abschluss der Untersuchung werden die Mäuse durch zervikale Dislokation nach CO 2-Druckgas in einer Isolationskammer getötet. Milchdrüsen sind ausgeschnitten und können für ganze Berg Vorbereitung 11, Histologie, oder RNA-und Proteinisolierung verwendet werden. </li></ol>

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</ol>

Die Autoren haben keine finanziellen Angaben.

Transgene und Knockout-Mäuse sind wertvolle Werkzeuge für die Untersuchung der in vivo-Rolle der einzelnen Gene bei Brustkrebs. Es ist jedoch kostspielig und zeitaufwendig, diese Tiere zu erzeugen, und das Gen Zuschlags gewöhnlich überall die manchmal schließt uns Erkennen der spezifischen Wirkung des Gens auf die Brustdrüse. Daher wäre eine gezielte Zuschlags Probleme der unspezifischen Nebenwirkungen und Toxizitäten in anderen Organen zu verringern. Die intraduktale Injektion von siRNA hier vorge ermöglicht die lokalisierte Gen-Knockdown in der Maus Brustdrüse. Es ist eine schnelle Methode für eine gezielte und lokale Arzneimittelabgabe an der Brustdrüse nicht siRNA begrenzt. Solch eine Brustdrüse spezifische Arzneimittelabgabe vermeidet unspezifische Nebenwirkungen und Toxizität für andere Organe und ermöglicht die Untersuchung von Gen-Veränderungen zu bestimmten Zeitpunkten während der Entwicklung der Brustdrüse und Brusttumorbildung. Es gibt keine Beweise für siRNA-Partikel in nicht-injizierten Drüsen, der Leber oder anderen Organen ein weiterer Beweis, dass dieses Verfahren stellt eine bevorzugte Weise zur lokalisierten Gens Zuschlag in der Brustdrüse. Darüber hinaus können die intraduktalen Injektionen pro Woche oder alle zwei Wochen über mehrere Monate wiederholt werden, um langfristige Überwachung von therapeutischen Wirkstoffen ermöglichen. Diese Technik eröffnet die Möglichkeit zur Untersuchung der intraductal Lieferung verschiedener Reagenzien auf die Maus-Brustkanälen. Fortschritte in der lokalisierte Abgabe in gut charakterisierten Mausmodellen sollte die Anwendung der nicht-invasiven beschleunigen, gezielte Therapiestrategien beim Menschen.

Die Maus-Brustdrüse eines komplexen duktalen-alveoläre Struktur, die in einen zentralen Kanal an der Brustwarze konvergiert besteht. Bei Mäusen als auch Menschen, die Mehrheit von Brusttumoren entstehen in den Epithelzellen der Milchgänge. Aktuell verfügbare Behandlungen gehören intravenöse Chemotherapie, Bestrahlung und Operation. Lokalisierte intraduktalen Behandlungen erforscht worden 1-3 und bieten erhebliche Vorteile in Bezug auf reduzierte Toxizität und Nebenwirkungen. Allerdings bleiben einige Herausforderungen bevor diese weiter verbreitet angewandt werden. Die Fähigkeit, vergleichbare Verfahren in der Brustdrüse der Maus ausführen erleichtert die Charakterisierung von intraduktalen Interventionen. Hier präsentieren wir eine nicht-invasive Methode für die Lieferung von Reagenzien direkt in die Maus-Brustkanal. Intraduktales Lieferung von Chemotherapeutika in beiden Brustkrebspatienten und Mausmodellen wurde zuvor gezeigt, als hoch wirksam ohne Anzeichen vonsystemische Toxizität oder langfristige histopathologischen Veränderungen 6.3. Außerdem Tumorzellinjektion und Lentivirusvektor Lieferung von Onkogenen sind gezeigt worden, zuvor möglich sein über intraduktale Injektion 10.07. Neben der Medikamentenabgabe, ist diese Vorgehensweise sinnvoll für lokale Schweigen der Brustdrüse Gene durch intraduktale Injektion von siRNA. Injektion kleiner Mengen von siRNA-Lösung wirksam ist, ohne die Anatomie und Physiologie der Milchdrüse. In unserem Labor haben wir vor kurzem erfolgreich Silencing Schlüsselvermittler Genen in transgenen Mäusen, die spontan resultierenden Brusttumoren in der Prävention von Tumorprogression (Brock et al., Unveröffentlicht) gezeigt. Wir waren in der Lage, alle zwei Wochen Injektionen in die gleiche Nippel bis zu 7 mal in 2-wöchigen Intervallen ohne sichtbare Gewebeschädigung oder toxische Wirkungen zu wiederholen. Intraduktale Injektionen können in einer erwachsenen Maus, um Ent-Adresse zeitgesteuert werdenrelevant Entwicklung der Brustdrüse opmentally spezifische Ereignisse während der Schwangerschaft, Stillzeit und Rückbildung oder späteren Stadien während der Tumorentstehung und Progression Ziel. Virgin Frauen so jung wie Alter von 8 Wochen haben nicht-invasiv in unserem Labor injiziert.

<table><tbody><tr><td>Isofluran</td><td></td><td></td><td>2-4%</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td></td><td></td><td>5-10 mg/ml</td></tr><tr><td>Evans blauer Farbstoff</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E2129-10G</td><td>0,2% in PBS</td></tr><tr><td>Haarentfernungscreme</td><td>Veet</td><td></td><td>Wählen Sie eine empfindliche Option</td></tr><tr><td>Stereoskop</td><td>Zeiss</td><td>Stemi DV4</td><td></td></tr><tr><td>Mikro-Präparierpinzette</td><td>Roboz</td><td>rs-4976</td><td>Mit einer 0,10 x 0,06 mm Spitze aus dumostar</td></tr><tr><td>Hamilton Spritze</td><td>Hamilton</td><td>7637-01</td><td></td></tr><tr><td>33-Gauge-Nadel</td><td>Hamilton</td><td>7803-05</td><td>Spitze Typ 4, 12 Grad Abschrägung (Standard)</td></tr><tr><td>siGLO Cyclophilin B Kontrolle siRNA</td><td>Dharmacon</td><td>D-001610-01-05</td><td></td></tr></tbody></table>

intraduktale injection für lokalisierte drug delivery auf die maus milchdrüse

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

Hier beschreiben wir ein Protokoll, um verschiedene Reagenzien zu der Brustdrüse der Maus über intraduktalen Injektionen zu liefern. Lokalisierten Arzneimittelabgabe und Knock-down von Genen innerhalb der Brust Epithel war schwierig, aufgrund des Fehlens geeigneter Targeting-Moleküle, die unabhängig von Entwicklungsstufen wie Schwangerschaft und Stillzeit zu erzielen. Hier beschreiben wir eine Technik für die lokale Verabreichung von Reagenzien an der Brustdrüse bei über intraduktale Injektion in die Brustwarzen von Mäusen jeder Phase im Erwachsenenalter. Die Injektionen können auf lebende Mäuse unter Anästhesie durchgeführt werden, und damit für eine nicht-invasive und lokalisierte Arzneimittelabgabe auf die Brustdrüse. Ferner können die Injektionen über mehrere Monate ohne Beschädigung der Brustwarze wiederholt. Vital-Farbstoffe, wie Evans Blue sind sehr hilfreich, um die Technik zu lernen. Nach intraductal Injektion des blauen Farbstoffs wird das gesamte Milchgangbaum für das Auge sichtbar. Weiterhin fluoreszierend markierten Reagenzien ermöglichen auchVisualisierung und Verteilung in der Brustdrüse. Diese Technik ist für eine Vielzahl von Verbindungen, einschließlich siRNA, chemotherapeutische Mittel und kleine Moleküle anpassbar.

Die Brustwarzen kann leicht mit einem Stereomikroskop einmal Haare in der Umgebung ist (Abbildung 1A) entfernt lokalisiert werden. Um die Injektionstechnik zu beherrschen, ist es empfehlenswert, Evans blauen Farbstoff zu injizieren und zu überwachen, die Integrität der Drüse (1B und C). Dieser Ansatz ermöglicht auch die Bestimmung der angemessenen Mengen in jeder Drüse injiziert als eine visuell beurteilt, ob der Farbstoff die gesamte Milchgangsystem (1C und 2A) erreicht werden. Ein Bild des injizierten Evans-Blau Bild kann dann auf die gesamte montierte Brustdrüse, bei dem die gesamte Milchgang Baum wird mit Alaun Karmin-Farbstoff (2B) gefärbt verglichen werden. Bitte beachten Sie, dass die Robustheit dieses Injektionsverfahren ist stark abhängig von der Bedienungsperson. Zum Beispiel wird das Perforieren des Kanals in einer Brustfettpolster Injektion führen und Injizieren der Lösung zu schnell kann das duktale Epithel cel beschädigenls und provozieren eine entzündliche Reaktion. Erfolgreiche intraductal Injektion ermöglicht die lokalisierte Arzneimittelabgabe an die Brustdrüse und vermindert unspezifische Nebenwirkungen oft nicht anders festgestellt. Ein Beispiel einer Bildführung mit fluoreszierend markierten injiziert siRNA Targeting Cyclophilin (ein nicht-essentielles Gen) ist in Abbildung 3 dargestellt. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/50692/50692fig1.jpg"> Fig. 1 ist. Ein Leistenbrustdrüse injiziert durch den Nippel mit Evans-Blau-Farbstoff. A) Aussehen der Brustwarze vor Injektion und B) nach der Injektion von 20 &amp;mgr; l Evans-Blau-Farbstoff. Kein Quellen oder Gewebeschäden. C) Beim Öffnen der Haut beobachtet, erlaubt der Farbstoff Visualisierung des gesamten Brust duktalen Baum. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/50692/50692fig2.jpg"> 2. Whole-mount Analyse von Evans-Blau-inzogen Drüse. A) Repräsentative Bild einer seziert Drüse aus dem Tier herausgeschnitten und auf einen Objektträger unmittelbar nach der Injektion. B) insgesamt Mount-Färbung der gleichen Verschraubung mit Farbstoff Karmin nach Fett ausgebreitet hatte geräumt. Der Vergleich mit A) bestätigt, dass die injizierten Lösung füllt den Brust duktalen Baum und die Drüse ist anatomisch intakt. <img alt="Fig. 3" src="/files/ftp_upload/50692/50692fig3.jpg"> 3. Intraduktale Lieferung von fluoreszierenden siRNA. Vertreter Bild der frischen Gewebeprobe herausgeschnitten 48 Stunden nach der Injektion.

Ein Protokoll für die nicht-invasive intraductal Lieferung von wässrigen Reagenzien zu der Brustdrüse der Maus beschrieben. Die Methode nutzt lokalisierte Injektion in den Brustwarzen der Brustdrüsen Targeting Milchgänge speziell. Diese Technik ist für eine Vielzahl von Verbindungen, einschließlich siRNA, chemotherapeutischen Mitteln und kleinen Molekülen anpaßbar.

Intraduktale Injection für Lokalisierte Drug Delivery auf die Maus Milchdrüse

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, wässrige Reagenzien nicht-invasiv an die Brustdrüse der Maus abzugeben. Einführend. Dies wird erreicht, indem zuerst die Maus betäubt und die Haare um die Brustwarzen herum entfernt werden. Der zweite Schritt besteht darin, abgestorbene Hautschüppchen, die die Spitze der Brustwarzen bedecken, mit einer Mikropinzette zu entfernen.Als nächstes wird eine wässrige Lösung mit einer 33-Gauge-Nadel in den Nippel injiziert. Der letzte Schritt besteht darin, sicherzustellen, dass die Injektion erfolgreich war, indem die Injektionsstelle auf mögliche Schwellungen beobachtet wird, was auf eine Injektion von Brustfettpolstern anstelle einer Injektion in die Brustdrüse hindeuten würde. Letztendlich kann der Erfolg des Verfahrens durch die Visualisierung des duktilen Baums nach der Evans-Blau-Injektion bestimmt werden.Diese Methode kann helfen, Schlüsselfragen im Bereich Brustkrebs zu beantworten, wie z. B. den Beitrag bestimmter Gene in verschiedenen Stadien der Gedächtnistumorgenese. Bereiten Sie zunächst 160 Mikroliter 0,2 %igen Evans-Blau-Farbstoff in steriler, phosphatgepufferter Kochsalzlösung für jede Maus vor, die vor der Injektion injiziert werden soll. Wiegen Sie jede Maus und notieren Sie ihr Körpergewicht.Betäuben Sie dann die Maus nacheinander mit einer Fluorkammer und tragen Sie Augenschmiermittel auf. Setzen Sie nach der Sedierung eine Fluornase auf und injizieren Sie Meloxicam in einer Dosis von fünf bis 10 Milligramm pro Kilogramm subkutan vor dem Eingriff. Überwachen Sie die Maus während des Eingriffs kontinuierlich auf Veränderungen der Atemfrequenz und passen Sie den Fluorspiegel entsprechend an, insbesondere wenn die Atemfrequenz der Maus anzeigt, dass die Anästhesie reduziert werden muss. Bereiten Sie anschließend den Brustwarzenbereich für die Injektion vor, indem Sie eine rezeptfreie Haarentfernungscreme auftragen.Warten Sie fünf Minuten und entfernen Sie dann vorsichtig die losen Haare mit dem Wattestift-Applikator. Entfernen Sie mit kreisenden Bewegungen alle Cremereste mit feuchten Papiertüchern, die mit warmem Wasser vermischt sind. Sichern Sie dann die Maus unter dem Stereoskop, indem Sie die Extremitäten vorsichtig abkleben und die Injektionsstellen mit Alkoholtupfern reinigen.Um zu beginnen, lokalisieren Sie die zu injizierenden Brustwarzen unter dem Stereoskop. Verwenden Sie dann eine feine Mikro-Präparierpinzette, um abgestorbene Hautschüppchen zu entfernen, die die Brustwarzenöffnung bedecken. Es ist nicht notwendig, den Sauger für die Injektion zu schneiden.Laden Sie anschließend 11 Mikroliter Injektionslösung in eine 50-Mikroliter-Spritze, die mit einer 33-Gauge-Metallnabennadel ausgestattet ist. Nach der Injektion tritt häufig ein Mikroliter der Injektionsflüssigkeit aus, was zum Endziel von 10 Mikrolitern erfolgreich injizierter Lösungen führt. Halten Sie den Sauger vorsichtig mit der feinen Pinzette fest und heben Sie ihn leicht an, um ihn für die Injektion zu positionieren.Injizieren Sie dann 11 Mikroliter in jede Drüse im ersten und letzten Paar der Brustdrüsen, da sie ein geringeres Volumen als die mittleren Paare benötigen, um den duktilen Baum der Drüse vollständig zu füllen. Injizieren Sie anschließend 21 Mikroliter in jede Drüse im zweiten bis vierten Paar der Brustdrüsen. Die Injektionsrate sollte bei etwa 40 Mikrolitern pro Minute gehalten werden, um mögliche Schäden durch sich schnell bewegende Flüssigkeit in den duktalen Lumen zu minimieren.Nach der Injektion. Beobachten Sie die Injektionsstelle. Es sollten keine Anzeichen eines Traumas in der Brustwarzenregion oder im umgebenden Gewebe vorhanden sein.Schwellung im Bereich der Brustwarze. Deutet wahrscheinlich eher auf eine Injektion von Brustfettpolstern als auf eine erfolgreiche duktale Injektion hin. Nehmen Sie dann das Tier aus dem Nasenkonus und bringen Sie es zur Bergung in einen separaten Käfig.Stellen Sie den Käfig unter eine Wärmelampe, um Unterkühlung zu verhindern und die Genesung zu unterstützen. Halten Sie das Tier alleine und überwachen Sie es genau, bis es wieder zu Bewusstsein und Mobilität gelangt. Nach Abschluss der Studie werden die Mäuse durch Zervixdislokation nach CO2-komprimiertem Gas in einer isolierten Kammer eingeschläfert.Entfernen Sie dann die Brustdrüsen und fahren Sie mit der richtigen Probenhandhabung für die interessierende Analyse fort. Hier ist die Brustdrüse einer Maus zu sehen, bevor und nachdem sie durch die Brustwarze mit Evan's Blue Dye injiziert wurde. Der Brustwarzenbereich weist keine Schwellungen oder Gewebeschäden auf, die durch die Injektion des Farbstoffs in das Fettpolster, das die Kanäle umgibt, verursacht würden.Der diffuse blaue Farbstoff, der im rechten Bild zu sehen ist, ist ein guter Indikator für eine korrekte Injektion. Dies kann durch die Betrachtung der gesamten Drüse oder eines Querschnitts nach der Entfernung der Drüse bestätigt werden. In der hier gezeigten Analyse des gesamten Reittiers zeigt die Evans-blaue Injektionsdrüse die gesamte Drüse, die mit Farbstoff gefüllt ist, ohne die einheimischen Entenstrukturen zu beschädigen.Dies wird durch Carmen Dye bestätigt, das auch die duktilen Strukturen hervorhebt. Es ist auch möglich, diese Methode für die Verabreichung von therapeutischen Molekülen wie Irna an duktale Zellen zu nutzen. In dem hier gezeigten Bild, einer fluoreszenzmarkierten Irna, die auf Sichelfüllung abzielt, wurde ein nicht-essentielles Gen injiziert und dann das Gewebe 48 Stunden später abgebildet, um die Lokalisierung der Moleküle zu zeigen.Befolgen Sie dieses Verfahren. Andere Methoden wie der SRNA-Knockdown können durchgeführt werden, um zusätzliche Fragen zur Rolle eines bestimmten Gens bei der Gedächtnisentwicklung oder der Tumorgenese zu beantworten.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Hier beschrieben ist ein Verfahren, bei dem Lipopolysaccharid in der laktierenden Milchdrüse der Maus über den Nippel, um Mastitis zu simulieren, ein Zustand, üblicherweise durch bakterielle Infektion verursacht wird injiziert. Lipopolysaccharide Injektion führt zu einer erhöhten nuclear factor kappa B (NF-kappaB) Signaltechnik, visualisiert durch Biolumineszenz Bildgebung eines NF-kappaB Luciferase-Reporter-Maus.

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In diesem Artikel diskutieren wir, wie man ein Brustkrebsmodell bei weiblichen Mäusen etablieren kann, indem Brustkrebszellen in das Brustfettpolster injiziert werden. Das Beispielprotokoll demonstriert die orthotope Injektion.

Orthotope Injektion in das Brustfettpolster: Etablierung von Brustkrebs bei Mäusen

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Intraduktale Injektion: Abgabe der Injektionsmischung in die Kanäle der Brustdrüse der Maus

In diesem Video beschreiben wir eine Technik zur Verabreichung einer Lösung von Interesse in den Milchgang eines Kaninchens und bestätigen die Abgabe von Kontrastmitteln durch hochauflösende Ultraschallbildgebung.

Intraduktale Injektion von Kaninchen: Lokalisierte Abgabe der interessierenden Lösung in die Brustdrüse des Kaninchens

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Initiation Metastasierende Mammakarzinom durch Targeting des duktalen Epithel mit Adenovirus-Cre: Eine neue transgene Maus-Modell der Brustkrebs

Hier beschreiben wir eine Technik zur lokalisierten Verabreichung von Reagenzien an die Brustdrüse von Kaninchen über eine intraduktale Injektion. Darüber hinaus beschreiben wir ein Protokoll zur Visualisierung und Bestätigung der Abgabe durch hochauflösende Ultraschallbildgebung von Kontrastmitteln.

Intraduktale Lieferung an die Kaninchen Brustdrüse

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