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DOI: 10.3791/50773-v
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This protocol describes a rapid and low material consuming procedure for the integration of transgenic extrachromosomal arrays into the Caenorhabditis elegans genome using ultraviolet (UV) irradiation. This method is particularly effective for transgenic lines that transmit extrachromosomal arrays at a high rate.
Dieses Protokoll beschreibt ein schnelles und materialsparendes Verfahren zur Integration von transgenen extrachromosomalen Arrays in das Genom von Caenorhabditis elegans mittels ultravioletter (UV) Bestrahlung. Darüber hinaus eignet sich dieses Protokoll besonders gut für transgene Linien, die extrachromosomale Arrays mit hoher Geschwindigkeit übertragen.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, transgene extrachromosomale Arrays mittels ultravioletter Bestrahlung in das Serratus-Elegance-Genom zu integrieren. Zuerst wählen Sie die transgene Linie mit der höchstmöglichen Transmissionsrate, idealerweise mehr als 80 %, dann UV-Bestrahlung der ausgewählten transgenen L vier Larven und wählen Sie vier der fluoreszierenden transgenen F zwei Tiere aus jeder ausgewählten F1-Platte aus. Nächster Bildschirm, die F zwei Platten für 100% fluoreszierend transgen.
F drei Würmer. Letztendlich kann die Auswahl eines fluoreszierenden Tieres der dritten Generation die 100%ige Vererbung des Transgens zeigen. Dieser experimentelle Ansatz eignet sich gut für transgene Linien, die zusätzliche Chromosomenarrays mit hoher Geschwindigkeit übertragen.
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