Name: Inchworming: A Novel Motor Stereotypie in der BTBR T + Itpr3 Tf / J-Maus-Modell von Autismus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-07-05T16:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: Erfahren Sie die Analyse von Inchworming-Verhalten bei BTBR-Mäusen zur Untersuchung motorischer Stereotypien im Autismus-Spektrum. Diese Methode nutzt einen modifizierten Juvenile-Play-Test mit Videodokumentation.

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Die Autoren sind dankbar für die technische und logistische Unterstützung und Know-how von Tobias Rose, Younghee Ahn, und David N. Ruskin zur Verfügung gestellt. Die hier beschriebene Arbeit wurde von der Alberta-Kinderklinik-Stiftung und der Alberta-Kinder Hospital Research Institute.

Alle Verfahren wurden in Übereinstimmung mit dem Animal Care Committee Canadian durchgeführt und von der University of Calgary Animal Care Committee zugelassen. 1. Vorbereitung der Tiere <ol><li> Isolieren Mäuse über Nacht (12 Stunden) vor dem Test. Um dies zu tun, legen alle BTBR und B6-Mäusen (P35-P40) für die experimentelle Analyse in Käfigen notwendig durch sie selbst, am Tag vor der Prüfung. </li><li> Legen Sie die isolierten Mäuse in der Verhaltensanalyse Zimmer 30 min vor der Prüfung, so dass Tiere auf die neue Umgebung zu gewöhnen. </li></ol> 2. Vorbereitung der Ausrüstung <ol><li> Legen Sie die 30 x 30 cm Plexiglas-Box mit einem abnehmbaren Deckel in den Testraum. Stellen Sie den Karton auf einem Tisch und positionieren Sie die Videokamera an einen 45 °-Winkel von der Unterseite; Diese Position der Kamera ermöglichen die Visualisierung der gesamte Boden des Gehäuses und der Maus. Verwenden Sie eine Infrarot-Hintergrundbeleuchtung, um Blendung zu minimieren, von der Wanddie Box. </li><li> Verwenden Sie eine Videokamera, die eine hohe Zoom-Funktion besitzt, mit Infrarot-Fähigkeiten, um Dreharbeiten in einem niedrigen Lux-Umgebung zu optimieren. Stellen Sie die Kamera auf dem Gehäuse das Bild zu vergrößern, so dass die Mäuse in der gesamten Box visualisiert. </li><li> Decken den gesamten Boden der Box mit Sägemehl Betten (sollte etwa 1 cm tief sein). </li></ol> 3. Testverfahren <ol><li> Legen Sie eine intra-Dehnungs-Paar von Mäusen (BTBR - BTBR oder B6-B6) innerhalb der Test Gehäuse. </li><li> Mach das Licht aus in den Testraum. </li><li> Starten Sie die Videokamera zu erfassen und den Raum zu verlassen. Dies wird Experimentator Einfluss auf das Verhalten der Mäuse verhindern. Notieren Sie sich die Aktivität für 11 min. </li><li> Sobald die Aufnahme abgeschlossen ist, wieder in den Testraum und geben die Mäuse in ihre ursprünglichen Käfige. </li><li> Entsorgen Sie das Sägemehl Betten, waschen Sie den gesamten Testfeld mit 70% Ethanol und neue Bettwäsche Sägemehl legen in den Boden des TestGehäuse. </li><li> Wiederholen Sie den gesamten Vorgang für den Rest der intra-Fleck-Paare und Rück die Mäuse in ihre ursprünglichen Käfige. </li></ol> Hinweis: Um die Zuverlässigkeit der Daten zu überprüfen inchworming kann das Verfahren an den folgenden Tagen mit verschiedenen BTBR BTBR-und B6-B6 Paarkombinationen wiederholt werden. Dadurch wird sichergestellt, dass das beobachtete Verhalten ist nicht abhängig von der speziellen Partner in der Umhüllung, aber die einzelnen inchworming. 4. Datenanalyse <ol><li> Inchworming als Synchron-und Ausfahren der Vorder-und Hinterfüße des Tieres definiert ist, mit mindestens einem Co-auftretende nach innen und dann nach außen anschließenden Bewegung, die das Bettzeug effektiv verdrängt. Manuell sehen und punkten jedes Video zweimal (einmal für jede Maus), um die Gesamtdauer, die Frequenz und Latenz zu ermitteln, um in der 10 min Video InchWorm. Manuelle Scoring inchworming Dauer, Häufigkeit und Latenz sollte über die Folge basierenten Definitionen: Inchworming Dauer: Wird als Gesamtzeit verbringt jede Maus in der inchworming Verhalten engagiert definiert. Um diesen Aspekt inchworming punkten, verwenden Sie einen Timer, gestartet und gestoppt werden kann. Startzeitpunkt, wenn die Maus fängt an InchWorm und stoppen Sie den Timer, wenn die Maus nicht mehr inchworming. Wann und ob die Maus beginnt wieder inchworm, Re-Start und Re-Timer stoppen. Wiederholen, das Starten und Stoppen des Zeitgebers für die Dauer der 10-minütigen Beobachtungsperiode jedes Mal, wenn die Maus Inchworms. Dies wird eine inchworming Dauer Partitur, die von 0.00 bis 10.00 min zu erzeugen. Inchworming Frequenz: wird als die Anzahl, wie oft die Maus in die inchworming Verhalten in der 10-minütigen Beobachtungsperiode greift definiert. Eine einzelne Zähler wird jedes Mal die Starts und Stopps Maus inchworming ausgezeichnet. Die inchworming Frequenz-Score wird eine Zahl zwischen 0 und ∞ sein. Latency auf Inchworm: Ist als die Zeit definiert, thbei läuft vor dem ersten Auftreten von inchworming. Starten Sie den Timer, wenn das Video startet, wird diesmal 0.00 Uhr sein, und stoppen Sie den Timer, wenn die Maus Inchworms für die erste Zeit. Wenn die Maus nicht die inchworming Verhalten nicht angezeigt, die Latenz zu InchWorm wird 10.00 sein. Bei der Analyse der Latenzzeit bis zum inchworm, wird eine Punktzahl von 0.01 bis 10.00 min erreicht werden. Mäuse, die für die Dauer der Testperiode Inchworm ausfallen sollte der Probenpopulation entfernt werden, um sicherzustellen, dass die Ergebnisse sind relevant für eine Population von Mäusen, die inchworming Verhalten anzuzeigen. </li> <li> Berechnung des Gesamt Häufigkeit und Dauer der inchworming für jede Maus in dem Video. Berechnung der Zeit für die erste Maus in dem Paar für die Latenz für diesen bestimmten Paar von Mäusen Inchworm Inchworm erforderlich. Diese Parameter werden über den Stand der methodischen Arbeit, um sich wiederholende Verhaltensweisen in Graben 6 Mäusen verwandt basiert. </li><li> Berechnen Sie die durchschnittliche Dauer, Häufigkeit,und Latenz für jede Versuchsgruppe in der Analyse (dh BTBR vs B6) zu graben. Verwenden Sie eine Varianzanalyse oder ein t-Test, um Daten zwischen Stämmen / experimentellen Gruppen zu vergleichen. Hinweis: Wenn das Verfahren an einem zweiten Tag beendet ist, verwenden Sie eine ANOVA mit wiederholten Messungen, um sicherzustellen, dass es keine Folgewirkungen oder Testpaarung Wirkungen. </li></ol>

<ol><li>McFarlane, H. G., Kusek, G. K., Yan, M., Phoenix, J. L., Bolivar, V. J., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autism-like+behavioral+phenotypes+in+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Autism-like behavioral phenotypes in BTBR T+tf/J mice.</a> Genes, Brain, and Behavior. 7, 152-163 (2008).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designing+mouse+behavioral+tasks+relevant+to+autistic-like+behaviors%5BTitle%5D)+AND+%22Mental+Retardation+and+Developmental+Disabilities+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors.</a> Mental Retardation and Developmental Disabilities Research Reviews. 10 (4), 248-258 (2004).</li>
<li>Deacon, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digging+and+marble+burying+in+mice%3A+simple+methods+for+in+vivo+identification+of+biological+impacts%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Digging and marble burying in mice: simple methods for in vivo identification of biological impacts.</a> Nature Protocols. 1 (1), 122-124 (2006).</li>
<li>Thomas, A., Burant, A., Bui, N., Graham, D., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marble+burying+reflects+a+repetitive+and+perseverative+behavior+more+than+novelty-induced+anxiety%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Marble burying reflects a repetitive and perseverative behavior more than novelty-induced anxiety.</a> Psychopharmacology. 204, 361-373 (2009).</li>
<li>Dudek, B. C., Adams, N., Boice, R., Abbott, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+influences+on+digging+behaviours+in+mice+%28Mus+musculus%29+in+laboratory+and+seminatural+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Genetic influences on digging behaviours in mice (Mus musculus) in laboratory and seminatural settings.</a> Journal of Comparative Psychology. 97 (3), 249-259 (1983).</li>
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<li>Pobbe, R. H., Pearson, B. L., Defensor, E., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+social+behaviours+of+C57BL%2F6J+versus+BTBR+inbred+mouse+strains+in+the+visible+burrow+system%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Expression of social behaviours of C57BL/6J versus BTBR inbred mouse strains in the visible burrow system.</a> Behavioural Brain Research. 214, 443-449 (2010).</li>
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<li>Pobbe, R. H., Defensor, E., Pearson, B. L., Bolivar, V. J., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+and+social+anxiety+in+the+BTBR+T%2B+tf%2FJ+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">General and social anxiety in the BTBR T+ tf/J mouse strain.</a> Behavioural Brain Research. 216 (1), 446-451 (2011).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Inchworming ist ein neues Maß für repetitive Verhaltensweisen, die verwendet werden können, um viele Störungen, Stereotypien wie ASD aufweisen studieren. Es gibt 4 Schritte, die von entscheidender Bedeutung für die Erzeugung zuverlässiger inchworming Daten aus dem modifizierten Jugend soziale Interaktion Protokolls sind: 1) die längere Isolationszeitraum ist für die inchworming Test und sollte nicht aus dem Protokoll entfernt oder verkürzt werden. Diese Forderung ist in der hier beschriebenen Paare spezifische Prüfung v...

Obwohl die Pathophysiologie der Autismus-Spektrum-Störungen (ASD), bleibt unklar, Diagnose hängt von der Anwesenheit von drei breiten Kategorien Symptom: abnorme soziale Gegenseitigkeit, Beeinträchtigungen in der Kommunikation, und sich wiederholende / stereotype Verhaltensweisen ein. Die meisten Nager-Modelle sind nicht in der Lage gleichzeitig wiederzugeben, alle drei Symptome in einem einzigen Tier. So können Modelle, die einige oder alle Aspekte der Erkrankung zuverlässig simulieren kann halten großen Wert für die Entwicklung wirksamer Präventions-und Therapiestrategien. Ein Modell, das alle drei Aspekte der ASD Anzeige macht, ist die Maus BTBR 1,2. In Kombination mit Ultraschall-Laute und sozialen Ansatz Assays wird die Jugendsozialinteraktionstest häufig verwendet, um Maus-Modellen der pädiatrischen ASD charakterisieren; Diese Tests Maß verringert und abnorme soziale Verhaltensweisen, die Kernfunktionen des ASD zu vertreten. Neben der juvenilen sozialen Interaktionstest, viele andereTests wurden zur stereotypes Verhalten in Tiermodellen von ASD messen. Zum Beispiel die Marmor Vergraben Test, der die Tendenz eines Tieres auf Einstreu verdrängen mit der Schnauze und Vorderpfoten in der Bemühung um ein Objekt zu decken sucht, wird gedacht, um zwanghafte Verhaltensweisen, die stereotype Reaktion auf aversive Reize 3,4 auftreten, zu messen. Dementsprechend Graben Tests wurden durchgeführt, um diese repetitive Verhaltensweisen in ASD Tiermodellen und verschiedenen Arten von Nagetieren 3,5-7 quantifizieren. Graben Verhaltensweisen sind so offensichtlich gerichtet Aktionen der Schnauze oder Pfoten zu Einstreu verdrängen definiert und haben die Hypothese aufgestellt, um ein empfindlicher Parameter der repetitive motorische Verhalten 4 sein. Hier wird eine neue Art von Graben, die wir &quot;inchworming&quot; in der BTBR-Stamm von Mäusen bezeichnet Wir berichten. Die Charakterisierung dieser neuartigen Verhalten kann eine stabile Messung eines repetitiven Motorverhalten, das für die weitere val verwendet werden kanndierung von Nagetier-Modelle wie ASD, Huntington-Krankheit oder Zwangsverhalten 8,9. Wir definieren &quot;inchworming&quot; als mindestens eine synchrone Bewegung der vorderen und hinteren Extremitäten nach innen durch eine synchrone Bewegung nach außen, die auf die Verschiebung des Auflagematerials führt gefolgt. Dies unterscheidet sich von typischen Grabverhalten in vielerlei Hinsicht. Zuerst wird das Verhalten inchworming Regel als eine Kombination von Episoden eher als eine einzelne isolierte Ereignis beobachtet. Im Gegensatz dazu kann als Einzelgrab koordinierte Bewegung entweder der Hinter oder Vorderpfoten 3 auftreten. Zusätzlich inchworming Bewegungen dazu neigen, in das Gehäuse horizontal Boden auftreten, im Gegensatz zu den feststehenden Positionen, die charakteristisch für das Graben Verhaltensweisen sind. Schließlich tritt der unten beschriebenen inchworming Verhalten häufig in der BTBR Inzucht-Stamm von Mäusen, aber nur selten in der B6-Kontrollstamm identifiziert, während typische Grab Verhaltensweisen sind häufig in B6 und BTBR Stämme von Mäusen <sup&gt; 10. Die in dieser Studie dargelegten inchworming Testverfahren stellen Modifikationen von einem Standard-Protokoll Jugend soziale Interaktion ein. Da Marmor Vergraben, graben, und Jugendspielwert haben für die Messung abnormales Verhalten in Maus-Modellen der ASD gegründet, ergänzt die inchworming Verhalten diese zuvor definierten Messungen der stereotypen Verhaltensweisen. Insbesondere stellt die inchworming Verhalten eine sinnvolle Maßnahme, um der unteren Motor Stereotypien, die häufig in ASD 8,11 identifiziert werden. Darüber hinaus kann dieses neue Verfahren inchworming Forscher mit einer zusätzlichen wertvolles Werkzeug für die Analyse der sich wiederholenden Motor relevant Entwicklungsstörungen wie ASD Verhalten bereitzustellen.

<table><tbody><tr><td>30 cm x 30 cm Plexiglasbox mit Deckel</td><td></td><td></td><td>Kann aufgebaut werden </td></tr><tr><td>IR-Kamera </td><td>Survshop (Calgary, Alberta)</td><td>Sony CCD Kamera DP955V- 30&#8217; Infrarot-Panzerkuppel</td><td>Finden Sie eine Kamera mit hoher Auflösung und Zoomfunktion</td></tr><tr><td>DVR</td><td>Supercircuits (Austin, Texas)</td><td>SCHWARZ 4-Kanal-H.264-Sicherheits-DVR der Enterprise-Klasse mit DVD-Brenner</td><td>Hohe Datenkapazität</td></tr><tr><td>Sägemehl</td><td></td><td></td><td>Wie Einstreumaterial </td></tr></tbody></table>

inchworming: a novel motor stereotypie in der btbr<em&gt; t<sup&gt; +</sup&gt; itpr3<sup&gt; tf</sup</em&gt; / j-maus-modell von autismus

Inchworming: A Novel Motor Stereotypy in the BTBR T+ Itpr3tf/J Mouse Model of Autism

Autismus-Spektrum-Störung (ASD) ist ein verhaltens definiert neurologische Erkrankung, die durch eine verminderte der sozialen Interaktion, abnorme Kommunikation und repetitive Verhaltensweisen mit eingeschränktem Interesse. Als Diagnose basiert auf klinischen Kriterien sollten alle potenziell relevanten Tiermodellen dieser heterogene Erkrankung ideal rekapitulieren diese unterschiedlichen Verhaltensmerkmale. Die BTBR T + Itpr3 tf / J (BTBR) Maus ist ein etabliertes Tiermodell der ASD, zeigt repetitive Verhaltensweisen wie erhöhte Körperpflege, sowie kognitive Inflexibilität. In Bezug auf die soziale Interaktion und Interesse hat die Jugendspieltest in mehreren Tiermodellen des ASD beschäftigt. Hier zeigen wir, dass, wenn BTBR Mäuse werden in einer Jugend soziale Interaktion Gehäuse Sägemehl Bettwäsche enthalten getestet, eine sich wiederholende Bewegungssynchrongrab zeigen sie. Diese sich wiederholenden motorischen Verhalten, bezeichnet als &quot;inchworming&quot;, hießwegen der stereotypen Charakter der Bewegungen der Mäuse zeigten während horizontal bewegt über den Boden. Inchworming Mäuse müssen ihre Vorder-und Hintergliedmassen synchron verwenden, um die Betten zu verdrängen, die Durchführung mindestens ein nach innen und nach außen eine Bewegung. Obwohl beide BTBR und C56BL/6J (B6) Mäuse zeigen dieses Verhalten, BTBR Mäuse zeigen eine deutlich höhere Dauer und Häufigkeit der inchworming und eine verringerte Latenz zu initiieren inchworming, wenn in einem Bett Gehäuse gesetzt. Wir schließen daraus, dass diese neu beschriebene Verhalten stellt ein Maß einer repetitiven Motor Stereotypie, die leicht in Tiermodellen von ASD gemessen werden kann.

Die modifizierte Version des hier beschriebenen jugendlichen Spiel Test kann verwendet werden, um zu beobachten und zu analysieren, die sich wiederholenden Roman Grab Verhalten bezeichnet inchworming werden. Inchworming wird in einem weit größeren Umfang als BTBR Mäuse B6 Kontrollen ausgestellt. In einem typischen 10 Minuten-Sitzung BTBR Mäuse den deutlichen inchworming Verhalten (Synchron-und Ausfahren der Pfoten in dem Bemühen, das Sägemehl zu verdrängen Betten) für ca. 5 min, oder die Hälfte der Beobachtungszeitraum ...

Inchworming ist ein stark repetitiven synchrone Bewegung durch Grab BTBR T + ITPR 3TF / J (BTBR) Mäusen angezeigt, wenn in einem Test Käfig mit genügend Bettwäsche Sägemehl gelegt. Das Verfahren ist eine Modifikation des Jugendlichen soziale Interaktion Protokoll und wird hier verwendet, um sich wiederholende Motor relevant Autismus-Spektrum-Störung Stereotypien zu beurteilen.

Inchworming: A Novel Motor Stereotypie in der BTBR<em&gt; T<sup&gt; +</sup&gt; Itpr3<sup&gt; Tf</sup</em&gt; / J-Maus-Modell von Autismus

Autism Spectrum Disorder (ASD) is a behaviorally defined neurodevelopmental disorder characterized by decreased reciprocal social interaction, abnormal ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, einen modifizierten juvenilen Spieltest zu verwenden, um das Inch-Worm-Verhalten, eine neuartige motorische Stereotypie, zu beobachten. Dies wird erreicht, indem zunächst jede Maus 12 Stunden vor Beginn des Tests sozial isoliert wird, mit eigenständigem Futter und Wasser. Der zweite Schritt besteht darin, die Videokamera in einem Winkel von 45 Grad zur Testumgebung aufzustellen.Anschließend werden die isolierten Mäuse paarweise in die Vorrichtung gebracht, wo sie für eine Dauer von 11 Minuten im Dunkeln videoaufgezeichnet werden. Im letzten Schritt wird das Inchworm-Verhalten anhand des Videos analysiert, um Dauer, Frequenz und Latenz des Inchwormens zu bestimmen. Letztendlich ermöglicht diese Methode die Analyse motorischer Neuropathien und kann als Indikator für die Prüfung neuartiger therapeutischer Interventionen dienen.Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich Autismus zu beantworten, beispielsweise die Häufigkeit und Regulierung motorischer Stereotypien. Die visuelle Demonstration dieses Verfahrens ist entscheidend für das Erlernen der Aufgabe, da das Verhaltensphänotyp schwer zu identifizieren ist und das Inchworm-Verhalten schnell und wiederholt auftritt. Bereiten Sie die BTBR- und Black-Six-Mäuse für das Verfahren vor, indem Sie sie über Nacht 12 Stunden lang in separaten Käfigen isolieren.Bevor mit der Untersuchung begonnen wird, zeigen die in dieser Studie verwendeten BTBR-Mäuse alle Hauptmerkmale von Autismus-Spektrum-Störungen, die bei Mäusen beobachtet werden können; als Kontrollen dienen Schwarz-sechs-Mäuse am Tag des Experiments. Stellen Sie die isolierten Mäuse 30 Minuten vor der Untersuchung in den Raum für die Verhaltensanalyse, damit sich die Tiere an die neue Umgebung gewöhnen können. Danach wird eine 30 mal 30 Zentimeter große Plexiglasbox mit abnehmbarem Deckel diagonal auf den Tisch gestellt.Im Testraum das Gehäuse mit einem Infrarotlicht von hinten beleuchten, um Blendungen zu minimieren. Danach eine Videokamera mit hoher Zoomeinstellung und Infrarotfunktion in einem Winkel von 45 Grad so positionieren, dass sie den gesamten Boden des Gehäuses sowie die Maus aufzeichnen kann. Richten Sie die Kamera auf das Gehäuse aus, sodass die Mäuse im gesamten Gehäuse sichtbar bleiben.Nachdem die Box und die Kamera eingerichtet sind, bedecken Sie den gesamten Boden der Box mit Sägemehlstreu, sodass diese etwa einen Zoll tief ist. Stellen Sie zwei BTBR- oder Black-Six-Mäuse gleichzeitig in die Testumgebung und schalten Sie das Licht im Testraum aus. Starten Sie dann die Videokamera zur Aufnahme und verlassen Sie den Raum, um die Mäuse nicht zu stören oder ihr Verhalten zu beeinflussen.Notieren Sie die Aktivität 11 Minuten lang. Sobald die Aufnahme abgeschlossen ist, betreten Sie den Versuchsraum erneut und bringen die Mäuse in ihre ursprünglichen Heimkäfige zurück. Entsorgen Sie die Sägespäne.Reinigen Sie die gesamte Testbox mit 70 % Ethanol und füllen Sie dann frisches Sägemehl als Einstreu in den Boden des Testgehäuses, etwa einen Zoll tief. Wiederholen Sie den gesamten Vorgang für die übrigen Interessen-Stamm-Paare und bringen Sie die Mäuse anschließend in ihre ursprünglichen Heimkäfige zurück. Um nach Abschluss die Zuverlässigkeit der Inch-Worming-Daten zu überprüfen, wiederholen Sie das Verfahren an darauf folgenden Tagen mit unterschiedlichen Kombinationen von BTBR- und Black-Six-Interessenstämmen.Dadurch wird sichergestellt, dass das beobachtete Verhalten nicht durch einen bestimmten Partner im Gehege beeinflusst wird. Jedes Video manuell zweimal ansehen und auswerten, einmal für jede Maus, um die Gesamtdauer, Häufigkeit und Latenz der Inchworm-Bewegung zu ermitteln. In den Videos.Analysieren Sie jedes Video zehn Minuten lang, beginnend ab dem Zeitpunkt von drei Sekunden bis zu zehn Minuten. Drei Sekunden. Definieren Sie das „Inch-Worming“ als die synchrone, einwärts und auswärts gerichtete Bewegung der vorderen und hinteren Pfoten des Tieres, wobei mindestens eine gleichzeitige einwärts gerichtete und anschließend auswärts gerichtete Bewegung erforderlich ist, die effektiv das Einstreuen verschiebt. Werten Sie die Dauer des Inch-Warming-Verhaltens als die Gesamtzeit aus, die jede Maus mit der Ausführung dieses Verhaltens verbringt.Um diesen Aspekt des Inchworm-Verhaltens zu bewerten, verwenden Sie einen Stoppuhr, die gestartet und angehalten werden kann. Beginnen Sie mit der Zeitmessung, wenn die Maus mit dem Inchwormen beginnt, und stoppen Sie die Stoppuhr, wenn die Maus wieder anhält. Wenn die Maus erneut mit dem Inchwormen beginnt, starten Sie die Stoppuhr erneut und lassen Sie sie weiterlaufen, bis die Maus erneut anhält. Dadurch wird ein Zoll-Wärmungs-Dauer-Score erzeugt, der zwischen null und 10 Minuten liegt. Definieren Sie die Frequenz der Zoll-Wärmung als die Anzahl der Male, die die Maus das Zoll-Wärmungsverhalten zeigt. Während des 10-minütigen Beobachtungszeitraums wird jedes Mal ein einzelner Zählerwert vergeben, wenn die Maus das Verhalten beginnt und beendet.Inchworm-Bewegung. Definieren Sie die Latenzzeit bis zur Inchworm-Bewegung als die Zeitspanne, die vor dem ersten Auftreten der Inchworm-Bewegung vergeht. Starten Sie die Stoppuhr, wenn das Video beginnt, und stoppen Sie sie, sobald die Maus zum ersten Mal die Inchworm-Bewegung ausführt.Falls die Maus das Zollwurmsverhalten nicht zeigt, beträgt die Latenzzeit bis zum Zollwurmsverhalten 10 Minuten. Berechnen Sie anschließend die Gesamthäufigkeit und Dauer des Zollwurmsverhaltens für jede Maus im Video. Der Durchschnitt der beiden Mäuse wird als Gesamthäufigkeit und Dauer für dieses Video verwendet.Bestimmen Sie anschließend die Zeit, die erforderlich ist, bis die erste Maus des Paares mit dem Zwei-Zoll-Wurmverhalten beginnt, für die Latenz des Zwei-Zoll-Wurms. Entfernen Sie für dieses spezifische Mauspaar Tiere, die während des gesamten Testzeitraums kein Wurmverhalten zeigen, aus der Stichprobe, um sicherzustellen, dass die Ergebnisse auf eine Population von Mäusen bezogen sind, die das Wurmverhalten tatsächlich zeigen. Berechnen Sie für jede experimentelle Gruppe die durchschnittliche Dauer, Frequenz und Latenz zum Graben und verwenden Sie anschließend Innova- oder T-Tests, um die Daten zwischen den Stämmen innerhalb der experimentellen Gruppen zu vergleichen. Nach dem zweiten Testtag wenden Sie eine wiederholte Messung mit Innova an, um sicherzustellen, dass keine nachfolgenden Versuchseffekte oder Paarungseffekte in den dargestellten Daten vorliegen.Hier sind die durchschnittliche Frequenz, Dauer und Latenz zum Inchworm-Verhalten bei Paaren von BTBR- und Black-Six-Mäusen. Der BTBR-Stamm zeigte eine signifikant höhere Frequenz und Dauer des Inchworm-Verhaltens sowie eine signifikant kürzere Latenz im Vergleich zum Black-Six-Kontrollstamm. Bei Wiederholung dieser Tests mit alternativen Paarungen wurden keine signifikanten Unterschiede gefunden, was sicherstellt, dass die Effekte nicht von spezifischen Mauspaarungen oder der Wiederholung der Tests abhängen. Während des Durchführens dieses Verfahrens ist es wichtig, lediglich das Schwärmverhalten zu erfassen, definiert als die synchronisierte, ein- und auswärts gerichtete Bewegung der Vorder- und Hinterpfoten des Tieres. Nach Beherrschung dieses Verfahrens.Andere Methoden wie die Verabreichung von Arzneimitteln können dem Paradigma hinzugefügt werden, um zusätzliche Fragestellungen zu untersuchen, beispielsweise therapeutische Zielstrukturen für stereotypische Verhaltensweisen.

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Nagetiermodelle sind wertvolle Werkzeuge zur Untersuchung von Kernverhaltensweisen im Zusammenhang mit der Autismus-Spektrum-Störung (ASS). In diesem Artikel erläutern wir zwei Verhaltenstests zur Modellierung der Kernmerkmale von ASD bei Mäusen: Self-Grooming, der sich wiederholendes Verhalten bewertet, und der Drei-Kammer-Test für soziale Interaktion, der soziale Beeinträchtigungen dokumentiert.

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt einen Verhaltenstest zur Bewertung der sozialen Dominanz bei Nagetieren mit Hilfe des Röhrchentests. Die soziale Dominanz bleibt über die Zeit stabil, und mehrere Modelle von Entwicklungsstörungen und neurologischen Störungen weisen robuste Anomalien der sozialen Dominanz auf. Daher dient der Röhrchentest als geeignetes Ergebnismaß für mechanistische Studien oder präklinische therapeutische Screenings.

Bewertung der sozialen Dominanz in Mausmodellen mit dem Röhrentest

Erfahren Sie die Analyse von Inchworming-Verhalten bei BTBR-Mäusen zur Untersuchung motorischer Stereotypien im Autismus-Spektrum. Diese Methode nutzt einen modifizierten Juvenile-Play-Test mit Videodokumentation.

Inchworming: A Novel Motor Stereotypie in der BTBR

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